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公开(公告)号:CN110760473B
公开(公告)日:2020-12-18
申请号:CN201911204404.1
申请日:2019-11-29
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 一种猪卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法与应用,属于卵母细胞体外成熟培养技术领域。为了解决目前猪卵母细胞体外成熟率和发育率低的问题,本发明提供了一种猪卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法与应用。本发明所述的培养液由基础培养液TCM‑199,青霉素,链霉素,NaHCO3,4‑羟乙基哌嗪乙磺酸,聚乙烯醇,丙酮酸钠,胰岛素,半胱氨酸,表皮生长因子,猪卵泡液,孕马血清促性腺激素,人绒毛膜促性腺激素和单宁酸组成。本发明所述的培养液,可以提高卵母细胞体外成熟质量、卵丘细胞扩散指数、孤雌胚胎囊胚率和囊胚总细胞数、体外受精胚胎卵裂率、囊胚率以及囊胚总细胞数。
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公开(公告)号:CN110760473A
公开(公告)日:2020-02-07
申请号:CN201911204404.1
申请日:2019-11-29
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 一种猪卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法与应用,属于卵母细胞体外成熟培养技术领域。为了解决目前猪卵母细胞体外成熟率和发育率低的问题,本发明提供了一种猪卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法与应用。本发明所述的培养液由基础培养液TCM-199,青霉素,链霉素,NaHCO3,4-羟乙基哌嗪乙磺酸,聚乙烯醇,丙酮酸钠,胰岛素,半胱氨酸,表皮生长因子,猪卵泡液,孕马血清促性腺激素,人绒毛膜促性腺激素和单宁酸组成。本发明所述的培养液,可以提高卵母细胞体外成熟质量、卵丘细胞扩散指数、孤雌胚胎囊胚率和囊胚总细胞数、体外受精胚胎卵裂率、囊胚率以及囊胚总细胞数。
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公开(公告)号:CN108707599A
公开(公告)日:2018-10-26
申请号:CN201810552641.6
申请日:2018-05-31
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/06
CPC classification number: C12N15/02
Abstract: 一种小鼠胚胎干细胞单细胞融合方法,属于细胞工程技术领域。针对细胞融合效率低的问题,本发明提供了一种小鼠胚胎干细胞单细胞融合方法,是以小鼠胚胎干细胞(mESC)作为细胞融合对象,用含质量分数0.25%胰酶的消化液将mESC消化成单细胞,利用细胞凝集素构建一对一的单细胞对,在含有50%聚乙二醇中培养1min,随后将细胞继续培养7天,获得小鼠胚胎干细胞融合细胞。本发明适用于动物育种的研究或单克隆抗体的生产。
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公开(公告)号:CN107227307A
公开(公告)日:2017-10-03
申请号:CN201710483310.7
申请日:2017-06-23
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90
CPC classification number: C12N15/113 , C07K14/47 , C12N9/22 , C12N15/85 , C12N15/907 , C12N2810/10
Abstract: 一种特异靶向猪IRS1基因的sgRNA导向序列及其应用,涉及一种sgRNA导向序列及应用。该sgRNA导向序列为CGTAGTACTCGAGGCGCGCG。本发明提供的sgRNA导向序列可通过CRISPR/Cas9系统敲除或编辑IRS1基因,进而消除IRS1的表达,为制备IRS1转基因猪奠定基础。本发明应用于基因工程领域。
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公开(公告)号:CN104357483B
公开(公告)日:2017-04-05
申请号:CN201410613163.7
申请日:2014-11-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种提高猪细胞重编程能力的方法及应用,属于细胞移植和胚胎发育技术领域。本发明所提供的方法是在获取并培养猪卵母细胞和猪胎儿成纤维细胞后,进行体细胞核移植,最后进行iPS诱导并进行碱性磷酸酶染色。方法中利用小分子药物GSK126进行了处理,其使用方式有以下三种:1)猪胎儿成纤维细胞在核移植前利用小分子药物GSK126进行处理;2)在猪胎儿成纤维细胞体细胞核移植后,利用小分子药物GSK126处理融合胚胎;3)用于iPS诱导的猪胎儿成纤维细胞,在培养成熟后接种前利用小分子药物GSK126进行处理。本发明所提供的方法可以显著提高克隆胚胎的发育率和iPS诱导效率,提高幅度分别达到44.7%和111.3%。
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公开(公告)号:CN104059876A
公开(公告)日:2014-09-24
申请号:CN201410273222.0
申请日:2014-06-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了一种提高鸡骨骼肌细胞氧化代谢能力的培养方法,属于生物技术领域。本发明所提供的方法是将经过分离、纯化的鸡骨骼肌成肌细胞和肌源成纤维细胞分别接种于Transwell培养皿的上室和下室,二者以1μm孔径的PET膜分开但共享添加有H2O2的成肌分化培养基;经过成肌分化诱导培养7-10天获得具有自主收缩能力的肌管,期间每隔8-12小时进行1次低温冲击刺激。本发明提供的方法能够显著提高鸡骨骼肌细胞的线粒体含量及其跨膜电位和有氧代谢酶的活性,同时降低了ATPase的活性。该方法具有培养周期短、效果稳定的特点,为研究鸡骨骼肌能量代谢规律、纤维类型形成机制等奠定了基础,具有良好的研究及应用价值。
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公开(公告)号:CN102851279A
公开(公告)日:2013-01-02
申请号:CN201210134764.0
申请日:2012-05-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/11 , C12N15/63 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/907 , A01K67/0275 , A01K2217/07 , A01K2227/108 , C07H21/04 , C12N15/79 , C12N15/85 , C12N15/8509
Abstract: 本发明公布了一种猪ROSA26特异性整合位点及其应用,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所述,通过其衍生的打靶载体系列如SEQ ID NO.1所示。本发明采用的ROSA26特异性位点在猪或高等哺乳动物基因组中不会受到免疫介导的排斥和表观遗传修饰,能介导外源基因稳定高效的表达。提供的ROSA26特异性位点打靶载体可以高效特异的实现打靶。
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公开(公告)号:CN101921808A
公开(公告)日:2010-12-22
申请号:CN201010256337.0
申请日:2010-08-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种提高猪体细胞核移植效率的方法,属于繁殖或授精方法领域。通过用小分子药物Calyculin A处理供体细胞,诱使供体核染色质凝聚、甲基化升高和乙酰化降低,体细胞核表观遗传修饰的“归零”,然后进行核移植,构建重构胚,通过优化条件,选择最佳浓度10nM,及处理时间30min,使猪克隆胚胎体外发育囊胚率提高了9.7%,囊胚细胞数增加了23.78个,为提高克隆动物的生产效率奠定了基础。
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公开(公告)号:CN202406775U
公开(公告)日:2012-09-05
申请号:CN201120510003.1
申请日:2011-11-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: A01K15/00
Abstract: 本实用新型涉及一种用于野鼠实验动物化的防咬抓取装置。采用塑料或不锈钢等坚硬材料制成两条夹臂,连接轴在顶端将其连接,末端各安装一圆形固定网,两固定网直径不同,但中心相对,以确保闭合时能使直径较小的固定网周缘与直径较大的固定网网面紧密贴合,从而稳固地固定住野鼠,随着夹持力度的改变,固定网内的空间亦随着改变,可以固定住个体大小存在一定差异的野鼠。固定网是由具有良好弹性和滑韧性的尼龙等材质的纱网制成,便于隔着纱网即可安全、方便、快捷地进行实验操作,如注射激素或检栓,从而避免野鼠咬伤技术人员,甚至传播病原菌危及人类生命。
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