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公开(公告)号：CN106636041A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201610711601.2
申请日：2016-08-23
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种灰略红链霉菌耐高温中性蛋白酶及其编码基因和应用。该蛋白酶基因从灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)克隆得到，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，上述编码的耐高温中性蛋白酶，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。本发明通过在重组蛋白C端添加聚组氨酸标签(HIS6·Tag)，保证了蛋白活性的同时，也便于蛋白酶的纯化。本发明的蛋白酶具有较宽的适用温度和pH范围，特别是在较高温度55℃下能表现出很好的酶活性；且对多种金属离子及酶活性抑制剂(EDTA、DTT、SDS和NaN3)均有较强的耐受能力。
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公开(公告)号：CN106636035A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201610711425.2
申请日：2016-08-23
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种灰略红链霉菌果胶酯酶及其编码基因和应用。该果胶酯酶基因从灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)克隆得到，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1或其密码子优化后的SEQ ID NO.2所示，上述编码的果胶酯酶，其氨基酸序列为SEQ ID NO.3，以及该果胶酯酶及其编码基因在降解果胶中的应用。本发明通过对目的蛋白添加可溶性标签和目的蛋白的周外空间表达，保证了蛋白生物活性的同时便于后续蛋白的纯化。该酶是一种碱性、耐高温的果胶水解酶，该酶对多种金属离子及酶活性抑制剂均有很强的耐受能力，因此在实际的生产和应用中具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN105778919A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610131742.7
申请日：2016-03-09
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种微胶囊造粒技术领域的巨大芽孢杆菌?壳聚糖微胶囊的制备方法，通过在发酵原液中接种活化后的巨大芽孢杆菌菌种进行发酵，制成巨大芽孢杆菌发酵液，然后以巨大芽孢杆菌发酵液作为芯材、壳聚糖作为壁材制成均匀菌悬液，最后将均匀菌悬液喷雾干燥得到巨大芽孢杆菌?壳聚糖微胶囊。本发明能够降低巨大芽孢杆菌制剂的含水率，提高稳定性，实现巨大芽孢杆菌的长期储存与运输，延长巨大芽孢杆菌的使用寿命。
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公开(公告)号：CN103868858B
公开(公告)日：2016-02-10
申请号：CN201410074713.2
申请日：2014-03-03
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N21/25
Abstract: 本发明公开了一种确定盐渍土主导盐分光谱响应最佳波段的方法。该方法通过具有特定采样间隔的光谱仪器检测盐渍土样本，得到光谱曲线，以特定的波长将光谱曲线分段，对各波段中的反射率与主导盐分含量做相关性分析，选择相关系数大于设定值的为“初级条带”，对其反射率求平均值，绘制平均值与主导盐分含量的散点图，拟合并选取决定系数最大的波段为“次级条带”；按照原采样间隔，再做相关性分析，根据相关系数确定“三级条带”；对“三级条带”内的反射率求平均值，再做相关性分析，选取相关系数大于设定值，且极显著的波段，即为盐渍土样本的最佳波段。用本发明的方法确定的最佳波段具有数目少、范围窄、基于全波段、较精确等优点。
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公开(公告)号：CN103203356B
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201310084477.8
申请日：2013-03-15
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种次生盐渍化土壤微生物菌剂及其制备、用途。所述次生盐渍化土壤微生物菌剂由巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)NCT-2CGMCC NO.4698和载体组成，所述载体为稻麦秸秆和葡萄糖。制备时，每升巨大芽孢杆菌菌液中加入0.5～0.6kg稻麦秸秆，0.3～0.4kg的葡萄糖，混合均匀，即得所述次生盐渍化土壤微生物菌剂；每毫升所述巨大芽孢杆菌液的含菌量为2.0×108～2.32×108个。本发明提供的次生盐渍化土壤微生物菌剂可以有效降低次生盐渍化土壤中的硝态氮含量，并大大增加微生物种群的数量和植物产量；采用本发明的微生物菌剂对次生盐渍化土壤进行修复的方法属于原位修复，操作简单，成本低廉，易于产业化实施；且修复效果佳，不破坏土壤肥力，能提高资源利用率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104232558A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410462541.6
申请日：2014-09-12
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种基因工程领域的基于外切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和谷胱甘肽标签的引物进行PCR扩增得到编码外切葡聚糖酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，再将获得的连接产物转入大肠杆菌表达菌株内，获得外切葡聚糖酶过表达重组菌株。本发明通过构建外源表达载体，优化蛋白诱导表达的条件和融合标签等方法，实现了外切葡聚糖酶的胞外过表达。
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公开(公告)号：CN104232554A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410462373.0
申请日：2014-09-12
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种基因工程领域的木糖苷酶的工程菌，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和聚组氨酸标签的引物进行PCR扩增得到编码木糖苷酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，再将获得的连接产物转入大肠杆菌表达菌株内，获得木糖苷酶过表达重组菌株。本发明针对现有技术存在的由于木糖苷酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成，此外本发明通过在表达重组蛋白C端添加聚组氨酸标签的方法，提高蛋白活性的同时也保证了纯化后木糖苷酶的纯度；此外，本发明通过载体信号肽实现了目的蛋白的周质空间表达，提高了木糖苷酶的活性。
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公开(公告)号：CN104152392A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410374667.8
申请日：2014-07-31
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域的半纤维素酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA经过全基因合成构建得到的pUC57‐XL载体为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增并对应分别得到编码木聚糖酶的核苷酸序列XL和编码木糖苷酶的核苷酸序列XO；然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1，最终重组共表达载体pETDuet‐XL‐XO；之后将该重组共表达载体转化到大肠杆菌表达菌株内，获得转基因共表达菌株。本发明能够应用基因工程手段实现木聚糖酶和木糖苷酶体外的大量表达合成，最终实现半纤维素的原位快速降解。
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公开(公告)号：CN104140944A
公开(公告)日：2014-11-12
申请号：CN201410373906.8
申请日：2014-07-31
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: Y02A40/12
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域的硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增依次得到编码硝酸盐还原酶催化亚基及电子转移亚基的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1，最终获得重组共表达载体pETDuet‐NB‐NA；之后将该硝酸盐还原酶表达载体转化到大肠杆菌表达菌株。本发明针对现有技术存在的由于硝酸盐还原酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，应用基因工程手段实现硝酸盐还原酶体外的大量表达合成，对于次生盐渍化土壤的快速修复乃至实现精准农业具有重大意义。
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公开(公告)号：CN103881958A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201410126924.6
申请日：2014-03-31
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物工程技术领域的基于β‐葡萄糖苷酶的工程菌及其实现方法，该β‐葡萄糖苷酶基因克隆自灰色链霉菌(Streptomyces？griseorubens)JSD‐1，将其连接到表达载体上得到重组表达载体，进一步将该重组表达载体导入大肠杆菌并诱导合成β‐葡萄糖苷酶。本发明克服现有技术中β‐葡萄糖苷酶多为胞内酶且表达量非常低等不足，应用基因工程菌表达本发明所述的β‐葡萄糖苷酶基因制备β‐葡萄糖苷酶，可为工业化发酵生产β‐葡萄糖苷酶提供一种新方法。
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