一种靶向CD30的复制缺陷性重组慢病毒CAR-T转基因载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105950663A

    公开(公告)日:2016-09-21

    申请号:CN201610327646.X

    申请日:2016-05-17

    Inventor: 祁伟 俞磊 欧黄思

    CPC classification number: C12N15/86 A61K35/17 C12N2740/15043 C12N2800/107

    Abstract: 本发明公开了一种靶向CD30的复制缺陷性重组慢病毒的CAR‑T转基因载体,包括:用于质粒复制的原核复制子pUC Ori序列;用于目的菌株大量扩增的含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列;用于增强真核细胞内的复制的病毒复制子SV40Ori序列;用于慢病毒包装的慢病毒包装顺式元件;用于真核细胞表达绿色荧光的ZsGreen1绿色荧光蛋白;用于共同转录表达蛋白质的IRES核糖体结合序列;用于嵌合抗原受体基因的真核转录的人EF1α启动子;用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体;用于增强转基因的表达效率的eWPRE元件。此外,还公开了该载体的构建方法和应用。本发明能显著提高细胞因子的分泌、CAR‑T细胞的体外杀伤作用,临床治疗霍奇金淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤效果突出。

    CAR-CIK转基因细胞及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN108660111B

    公开(公告)日:2020-01-17

    申请号:CN201710187804.0

    申请日:2017-03-27

    Abstract: 本发明公开了一种CAR‑CIK转基因细胞,其包含靶向CD19抗原的嵌合抗原受体CAR基因、CD56细胞以及CD3细胞,CAR基因、CD56细胞、CD3细胞均表达阳性。本发明还公开了该CAR‑CIK转基因细胞的制备方法,包括:步骤1,分离外周血单个核细胞PBMC;步骤2,激活CIK细胞;步骤3,加入靶向CD19抗原的hCAR19慢病毒转基因载体转导及CAR‑CIK细胞诱导培养;步骤4,CAR‑CIK细胞体外扩增,得到CAR‑CIK转基因细胞。本发明还公开了该CAR‑CIK转基因细胞在制备肿瘤的细胞治疗药物中的应用。该CAR‑CIK转基因细胞对比CAR‑T细胞,杀伤效率更高,杀伤范围更广。

    一种封闭IL6R的用于缓解CRS的CAR-T转基因载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN108148863B

    公开(公告)日:2019-12-17

    申请号:CN201611103319.2

    申请日:2016-12-05

    Abstract: 本发明公开了一种封闭IL6R的用于缓解CRS的CAR‑T转基因载体,包括:含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列(SEQ ID NO.1);原核复制子pUC Ori序列(SEQ ID NO.2);病毒复制子SV40 Ori序列(SEQ ID NO.3);eWPRE增强型土拨鼠乙肝病毒转录后调控元件(SEQ ID NO.11);人EF1α启动子(SEQ ID NO.12);用于慢病毒包装的慢病毒包装顺式元件;人IL6R的人源化单链抗体IL6RscFv1(SEQ ID NO.21)、IL6RscFv2(SEQ ID NO.22)、或IL6RscFv3(SEQ ID NO.23);IRES核糖体结合序列(SEQ ID NO.25);IL6信号肽(SEQ ID NO.26);人源抗体Fc段(SEQ ID NO.27);以及用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体。此外,本发明还公开了该载体的构建方法及其在制备缓解CRS的药物中的应用。

    一种基于OCTS技术的前列腺癌CAR-T治疗载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN107164410B

    公开(公告)日:2019-09-03

    申请号:CN201710391643.7

    申请日:2017-05-27

    Abstract: 本发明公开了一种基于OCTS技术的前列腺癌CAR‑T治疗载体,包括慢病毒骨架质粒、人EF1α启动子(SEQ ID NO.14)、OCTS嵌合受体结构域和PDL1单链抗体;OCTS嵌合受体结构域包括:CD8 leader嵌合受体信号肽(SEQ ID NO.15)、PSMA单链抗体轻链VL(SEQ ID NO.16)、PSMA单链抗体重链VH(SEQ ID NO.17)、PDL1单链抗体轻链VL(SEQ ID NO.18)、PDL1单链抗体重链VH(SEQ ID NO.19)、抗体内铰链Inner‑Linker(SEQ ID NO.20)、单链抗体间铰链Inter‑Linker(SEQ ID NO.21)、CD8 Hinge嵌合受体铰链(SEQ ID NO.22)、CD8 Transmembrane嵌合受体跨膜区(SEQ ID NO.23)、TCR嵌合受体T细胞激活域(SEQ ID NO.26)以及嵌合受体共刺激因子区域。此外,本发明还公开了该载体的构建方法及其在制备治疗前列腺癌的药物中的应用。

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