一种基于OCTS技术的恶性胶质瘤CAR-T治疗载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN107267555B

    公开(公告)日:2020-03-20

    申请号:CN201710390650.5

    申请日:2017-05-27

    Abstract: 本发明公开了一种基于OCTS技术的恶性胶质瘤CAR‑T治疗载体,包括慢病毒骨架质粒、人EF1α启动子(SEQ ID NO.14)、OCTS嵌合受体结构域和PDL1单链抗体;OCTS嵌合受体结构域包括:CD8 leader嵌合受体信号肽(SEQ ID NO.15)、PDL1单链抗体轻链VL(SEQ ID NO.16)、PDL1单链抗体重链VH(SEQ ID NO.17)、EGFRvIII单链抗体轻链VL(SEQ ID NO.18)、EGFRvIII单链抗体重链VH(SEQ ID NO.19)、抗体内铰链Inner‑Linker(SEQ ID NO.20)、单链抗体间铰链Inter‑Linker(SEQ ID NO.21)、CD8 Hinge嵌合受体铰链(SEQ ID NO.22)、CD8 Transmembrane嵌合受体跨膜区(SEQ ID NO.23)、TCR嵌合受体T细胞激活域(SEQ ID NO.26)以及嵌合受体共刺激因子区域。此外,本发明还公开了该载体的构建方法及其在制备治疗恶性胶质瘤的药物中的应用。

    一种基于OCTS技术的胰腺癌、恶性间皮瘤CAR-T治疗载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN107299110B

    公开(公告)日:2019-11-22

    申请号:CN201710390649.2

    申请日:2017-05-27

    Abstract: 本发明公开了一种基于OCTS技术的胰腺癌、恶性间皮瘤CAR‑T治疗载体,包括慢病毒骨架质粒、人EF1α启动子(SEQ ID NO.14)、OCTS嵌合受体结构域和PDL1单链抗体;OCTS嵌合受体结构域包括:CD8 leader嵌合受体信号肽(SEQ ID NO.15)、PDL1单链抗体轻链VL(SEQ ID NO.16)、PDL1单链抗体重链VH(SEQ ID NO.17)、MESOTHELIN单链抗体轻链VL(SEQ ID NO.18)、MESOTHELIN单链抗体重链VH(SEQ ID NO.19)、抗体内铰链Inner‑Linker(SEQ ID NO.20)、单链抗体间铰链Inter‑Linker(SEQ ID NO.21)、CD8 Hinge嵌合受体铰链(SEQ ID NO.22)、CD8Transmembrane嵌合受体跨膜区(SEQ ID NO.23)、TCR嵌合受体T细胞激活域(SEQ ID NO.26)以及嵌合受体共刺激因子区域。此外,本发明还公开了该载体的构建方法及其在制备治疗胰腺癌、恶性间皮瘤的药物中的应用。

    一种用于体内示踪和人工清除CAR-T细胞的标签和应用

    公开(公告)号:CN107287207A

    公开(公告)日:2017-10-24

    申请号:CN201710648782.3

    申请日:2017-08-01

    Abstract: 本发明公开了一种用于体内示踪和人工清除CAR-T细胞的标签,包括:如SEQ ID NO.18所示序列的示踪铰链Trace-Linker1、如SEQ ID NO.19所示序列的示踪铰链Trace-Linker2、如SEQ ID NO.20所示序列的示踪铰链Trace-Linker3。此外,本发明还公开了包括上述标签的CAR-T治疗载体及其构建方法。此外,本发明还公开了该标签在制备CAR-T治疗载体和治疗三阴乳腺癌的药物中的应用。本发明标签使得CAR-T细胞在不影响肿瘤杀伤效果的前提下,能够对CAR-T细胞进行可控的体内示踪、体外分离、人工清除,能极大的提高CAR-T细胞治疗的安全性,能够为更深入的解析CAR-T细胞治疗的过程提供有力的工具。本发明载体可实现在人T淋巴细胞上表达CD117的靶向嵌合抗原受体,引导并激活T淋巴细胞对CD117阳性细胞的杀伤作用,在临床上可用于治疗三阴性乳腺癌。

    一种靶向CD22的复制缺陷性重组慢病毒CAR-T转基因载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105950662B

    公开(公告)日:2019-04-30

    申请号:CN201610326101.7

    申请日:2016-05-17

    Inventor: 祁伟 俞磊 林高武

    Abstract: 本发明公开了一种靶向CD22的复制缺陷性重组慢病毒的CAR‑T转基因载体,包括:用于质粒复制的原核复制子pUC Ori序列;用于目的菌株大量扩增的含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列;用于增强真核细胞内的复制的病毒复制子SV40Ori序列;用于慢病毒包装的慢病毒包装顺式元件;用于真核细胞表达绿色荧光的ZsGreen1绿色荧光蛋白;用于共同转录表达蛋白质的IRES核糖体结合序列;用于嵌合抗原受体基因的真核转录的人EF1α启动子;用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体;用于增强转基因的表达效率的eWPRE元件。此外,还公开了该载体的构建方法和应用。本发明能显著提高细胞因子的分泌、CAR‑T细胞的体外杀伤作用,临床治疗前体B细胞急性淋巴细胞白血病效果突出。

    一种基于OCTS技术的恶性胶质瘤CAR-T治疗载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN107267555A

    公开(公告)日:2017-10-20

    申请号:CN201710390650.5

    申请日:2017-05-27

    Abstract: 本发明公开了一种基于OCTS技术的恶性胶质瘤CAR-T治疗载体,包括慢病毒骨架质粒、人EF1α启动子(SEQ ID NO.14)、OCTS嵌合受体结构域和PDL1单链抗体;OCTS嵌合受体结构域包括:CD8 leader嵌合受体信号肽(SEQ ID NO.15)、PDL1单链抗体轻链VL(SEQ ID NO.16)、PDL1单链抗体重链VH(SEQ ID NO.17)、EGFRvIII单链抗体轻链VL(SEQ ID NO.18)、EGFRvIII单链抗体重链VH(SEQ ID NO.19)、抗体内铰链Inner-Linker(SEQ ID NO.20)、单链抗体间铰链Inter-Linker(SEQ ID NO.21)、CD8 Hinge嵌合受体铰链(SEQ ID NO.22)、CD8 Transmembrane嵌合受体跨膜区(SEQ ID NO.23)、TCR嵌合受体T细胞激活域(SEQ ID NO.26)以及嵌合受体共刺激因子区域。此外,本发明还公开了该载体的构建方法及其在制备治疗恶性胶质瘤的药物中的应用。

    一种靶向CD22的复制缺陷性重组慢病毒CAR-T转基因载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105950662A

    公开(公告)日:2016-09-21

    申请号:CN201610326101.7

    申请日:2016-05-17

    Inventor: 祁伟 俞磊 林高武

    CPC classification number: C12N15/86 A61K35/17 C12N2740/15043 C12N2800/107

    Abstract: 本发明公开了一种靶向CD22的复制缺陷性重组慢病毒的CAR‑T转基因载体,包括:用于质粒复制的原核复制子pUC Ori序列;用于目的菌株大量扩增的含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列;用于增强真核细胞内的复制的病毒复制子SV40Ori序列;用于慢病毒包装的慢病毒包装顺式元件;用于真核细胞表达绿色荧光的ZsGreen1绿色荧光蛋白;用于共同转录表达蛋白质的IRES核糖体结合序列;用于嵌合抗原受体基因的真核转录的人EF1α启动子;用于组成集识别、传递、启动于一体的二代CAR或三代CAR的嵌合抗原受体;用于增强转基因的表达效率的eWPRE元件。此外,还公开了该载体的构建方法和应用。本发明能显著提高细胞因子的分泌、CAR‑T细胞的体外杀伤作用,临床治疗前体B细胞急性淋巴细胞白血病效果突出。

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