一种发育可控的家蚕的构建方法及发育控制方法

    公开(公告)号:CN101418302A

    公开(公告)日:2009-04-29

    申请号:CN200810243141.0

    申请日:2008-12-09

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种构建发育可控的家蚕的方法以及发育控制方法,以转座子piggyBAC因子为基础载体,通过基因工程操作构建带有家蚕热激蛋白基因启动子控制egt基因表达盒的重组转基因载体,与辅助质粒作混合,导入初产卵,孵化后的蚁蚕通过常规筛选获得带有荧光蛋白报告基因的家蚕,检测到egt基因,育种制成转基因家蚕;育种制成的转基因家蚕经热诱导(41~43℃,0.5~2小时)可控制蚕的发育;本发明方法实现了利用家蚕杆状病毒egt基因控制蚕的发育,增加了家蚕饲育、蚕茧收购和缫丝工艺的灵活性,具有重要的实施价值。

    家蚕丝腺生物工厂的建立方法及其制药用途

    公开(公告)号:CN101270367A

    公开(公告)日:2008-09-24

    申请号:CN200810025300.X

    申请日:2008-04-30

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种构建家蚕丝腺生物工厂的方法,以转座子piggyBAC因子为基础载体,通过基因工程操作构建带有家蚕丝蛋白特异性启动子控制外源基因表达盒、增强子活性的元件、抗生素抗性基因和荧光蛋白报告基因的重组转基因载体,与辅助质粒作混合,导入初产卵,孵化后的蚁蚕连续添食特定抗生素至4龄眠,获得抗特定抗生素、带有荧光蛋白报告基因的家蚕,检测到目的基因,育种制成转基因家蚕。利用该转基因家蚕的丝腺组织可获得药用蛋白药物。本发明方法实现转基因家蚕丝腺工厂制备药用蛋白药物,生产成本低,不涉及具有潜在危害的杆状病毒,安全性高,具有重要的实施价值。

    对血液型脓病具有高抗性的转基因家蚕制作方法

    公开(公告)号:CN101270365A

    公开(公告)日:2008-09-24

    申请号:CN200810024110.6

    申请日:2008-04-30

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了提高对血液型脓病抗性的转基因家蚕制作方法,通过基因工程操作构建同时携带家蚕核型多角体病毒的ie-1基因的dsRNA表达盒和lef-1基因的dsRNA表达盒的、具有新霉素抗性基因Neo和荧光蛋白报告基因的、以piggyBAC转座子为基础的转基因载体,在辅助质粒作用下导入初产卵,获得的转基因家蚕对血液型脓病的抗性有显著提高。本发明通过转基因与RNAi技术的结合,实现了定向提高家蚕对血液型脓病的抗性,同时优化了转基因家蚕的筛选过程。

    人表皮生长因子核酸序列及其应用

    公开(公告)号:CN100362103C

    公开(公告)日:2008-01-16

    申请号:CN200410065878.X

    申请日:2004-12-21

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种人表皮生长因子核酸序列,以及在大肠杆菌和家蚕中表达。根据人表皮生长因子的氨基酸序列,按照家蚕密码子偏爱性,并参照大肠杆菌优选密码子设计并人工合成了新的HCEGF核酸序列,该序列能够在大肠杆菌和家蚕体内高效表达人表皮生长因子。在大肠杆菌中表达量可达菌体总蛋白的30%以上,在家蚕中可达到28.4μg/ml蛹血淋巴。此合成序列不同于人表皮生长因子基因序列,但所表达的产物同天然人表皮生长因子的表达产物完全相同,因而具有天然人表皮生长因子的全部特性。

    制备转基因家蚕的方法及其制药用途

    公开(公告)号:CN1670215A

    公开(公告)日:2005-09-21

    申请号:CN200510037759.8

    申请日:2005-01-31

    Abstract: 本发明公开了一种制备带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的转基因家蚕的方法,通过基因工程操作将家蚕核型多角体病毒基因启动子控制下的人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因克隆进以转座子piggyBAC因子为基础的带有报告基因的载体,构建重组转基因载体,在辅助质粒作用下,用精子介导法获得带有报告基因的家蚕,并检测到人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因,育种制成所述转基因家蚕。利用该转基因家蚕的幼虫或蛹或蛾经冷冻干燥后可获得生白细胞药物。本发明方法实现转基因家蚕制备生白细胞药物,生产成本低,不涉及具有潜在危害的病毒基因组,安全性高,药物效果尤其是口服效果良好,具有十分重大的实施价值。

    一种基于家蚕质型多角体病毒的CPVs杀虫剂及其制备与应用

    公开(公告)号:CN119592624A

    公开(公告)日:2025-03-11

    申请号:CN202411673885.1

    申请日:2024-11-21

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于家蚕质型多角体病毒的CPVs杀虫剂及其制备与应用,将分别带有BmCPV的S1至S9片段全长cDNA的重组质粒pT‑S1、pT‑S2、pT‑S3、pT‑S4、pT‑S5、pT‑S6、pT‑S7、pT‑S8、pT‑S9和带有Bt基因与BmCPV S10片段上多角体蛋白ORF融合的DNA序列的质粒pT‑S10‑Bt通过酶切线性化,获得pT‑S1至pT‑S9以及pT‑S10‑Bt的线性化质粒,再转染获得重组病毒BmCPV‑Bt,然后制备杀虫剂。当BmCPV‑Bt被昆虫摄入后,多角体‑Bt融合蛋白在昆虫的碱性消化道中溶解,释放具有毒力的活性肽引起昆虫快速死亡。本发明公开的技术方案能为农林害虫的防治提供一种新型的、绿色环保的生物杀虫剂。

    一种含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白复合丝的制备方法

    公开(公告)号:CN114685687B

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202210481243.6

    申请日:2022-05-05

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白复合丝的制备方法,将重组病毒接种5龄家蚕幼虫,桑叶添食后收集蚕丝,得到含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白复合丝;所述重组病毒含有表达金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的序列;重组病毒AcNPV‑FibH‑MaSp‑g接种5龄家蚕幼虫,用浸渍或喷洒过抗生素药液的凉干后的新鲜桑叶饲养,后用新鲜桑叶饲养至熟蚕;用浸渍或喷洒过蜕皮激素药液的新鲜桑叶饲喂熟蚕;或直接用蜕皮激素药液体喷熟蚕,将熟蚕移至簇具,营茧,采茧,经过缫丝获含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的复合丝。利用本发明可获取含有金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白的蚕丝,以满足制备各种生物材料对丝蛋白的多样性的需求。

    一种含多种蜘蛛腺丝蛋白的高强度蚕丝及其制备方法

    公开(公告)号:CN114957485B

    公开(公告)日:2023-11-10

    申请号:CN202210482497.X

    申请日:2022-05-05

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种含多种蜘蛛腺丝蛋白的高强度蚕丝及其制备方法,得到的蚕丝含金丝织网蜘蛛大壶状腺丝蛋白MaSp‑g和MaSp‑c。现有技术通过家蚕转基因的方法将蜘蛛丝蛋白基因导入家蚕基因组,须经过较复杂的程序进行转基因家蚕的筛选鉴定,进一步通过杂交筛选获得转基因纯系,历时近2年,且多为表达一种蜘蛛丝蛋白基因;本发明可以在较短的时间获取重组病毒,并通过该病毒接种5龄家蚕能在一周左右获得含有多种蜘蛛丝蛋白的嵌合蚕丝,其断裂强度达到1116.55MPa,丝长达到纯蚕丝丝长的65%,既解决了现有技术仅能用于实用性差的多化性品种的问题,又克服了现有技术复合丝长较纯蚕丝丝长明显下降的缺陷。

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