虾白斑综合症病毒病检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN101418351B

    公开(公告)日:2011-08-31

    申请号:CN200810243139.3

    申请日:2008-12-09

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 一种虾白斑综合症病毒病检测试剂盒及检测方法,该试剂盒由一套引物、DNA提取缓冲液、DNA聚合酶、环介导等温扩增反应液、阳性对照、阴性对照、甜菜碱和dNTP组成;采用本发明可以检测出待检测虾是否感染虾白斑综合症病毒;本发明利用Bst DNA酶的链置换特性,设计4条引物,识别靶序列的6个区域,在等温条件下生成大量的茎环样结构,在定性检测时不需任何特殊设备。因此具有特异性、灵敏度高和检测时间比普通PCR短的特点。

    制备转基因家蚕的方法及其制药用途

    公开(公告)号:CN1320120C

    公开(公告)日:2007-06-06

    申请号:CN200510037759.8

    申请日:2005-01-31

    Abstract: 本发明公开了一种制备带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的转基因家蚕的方法,通过基因工程操作将家蚕核型多角体病毒基因启动子控制下的人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因克隆进以转座子piggyBAC因子为基础的带有报告基因的载体,构建重组转基因载体,在轴助质粒作用下,用精子介导法获得带有报告基因的家蚕,并检测到人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因,育种制成所述转基因家蚕。利用该转基因家蚕的幼虫或蛹或蛾经冷冻干燥后可获得生白细胞药物。本发明方法实现转基因家蚕制备生白细胞药物,生产成本低,不涉及具有潜在危害的病毒基因组,安全性高,药物效果尤其是口服效果良好,具有十分重大的实施价值。

    人表皮生长因子核酸序列及其应用

    公开(公告)号:CN1644691A

    公开(公告)日:2005-07-27

    申请号:CN200410065878.X

    申请日:2004-12-21

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种人表皮生长因子核酸序列,以及在大肠杆菌和家蚕中表达。根据人表皮生长因子的氨基酸序列,按照家蚕密码子偏爱性,并参照大肠杆菌优选密码子设计并人工合成了新的HCEGF核酸序列,该序列能够在大肠杆菌和家蚕体内高效表达人表皮生长因子。在大肠杆菌中表达量可达菌体总蛋白的30%以上,在家蚕中可达到28.4μg/ml蛹血淋巴。此合成序列不同于人表皮生长因子基因序列,但所表达的产物同天然人表皮生长因子的表达产物完全相同,因而具有天然人表皮生长因子的全部特性。

    人表皮生长因子核酸序列及其应用

    公开(公告)号:CN100362103C

    公开(公告)日:2008-01-16

    申请号:CN200410065878.X

    申请日:2004-12-21

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种人表皮生长因子核酸序列,以及在大肠杆菌和家蚕中表达。根据人表皮生长因子的氨基酸序列,按照家蚕密码子偏爱性,并参照大肠杆菌优选密码子设计并人工合成了新的HCEGF核酸序列,该序列能够在大肠杆菌和家蚕体内高效表达人表皮生长因子。在大肠杆菌中表达量可达菌体总蛋白的30%以上,在家蚕中可达到28.4μg/ml蛹血淋巴。此合成序列不同于人表皮生长因子基因序列,但所表达的产物同天然人表皮生长因子的表达产物完全相同,因而具有天然人表皮生长因子的全部特性。

    制备转基因家蚕的方法及其制药用途

    公开(公告)号:CN1670215A

    公开(公告)日:2005-09-21

    申请号:CN200510037759.8

    申请日:2005-01-31

    Abstract: 本发明公开了一种制备带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的转基因家蚕的方法,通过基因工程操作将家蚕核型多角体病毒基因启动子控制下的人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因克隆进以转座子piggyBAC因子为基础的带有报告基因的载体,构建重组转基因载体,在辅助质粒作用下,用精子介导法获得带有报告基因的家蚕,并检测到人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因,育种制成所述转基因家蚕。利用该转基因家蚕的幼虫或蛹或蛾经冷冻干燥后可获得生白细胞药物。本发明方法实现转基因家蚕制备生白细胞药物,生产成本低,不涉及具有潜在危害的病毒基因组,安全性高,药物效果尤其是口服效果良好,具有十分重大的实施价值。

    改造重组家蚕核型多角体病毒的基因工程载体的构建方法

    公开(公告)号:CN100371449C

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:CN200510037703.2

    申请日:2005-01-25

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种改造重组家蚕核型多角体病毒的基因工程载体构建方法,其步骤包括PCR分别克隆病毒的ChiA片段和CP片段;将该二片段同时克隆进细菌质粒,构建中间质粒;将带有家蚕核型多角体病毒完整多角体蛋白基因编码区以及启动子的片段克隆进中间质粒内,获得改造的常规重组家蚕核型多角体病毒的基因工程载体。该载体与多角体蛋白基因被外源基因取代的重组家蚕核型多角体病毒DNA共转染家蚕细胞,可获得同时失活了几丁酶、半胱氨酸蛋白酶二基因的、可形成多角体的新重组病毒。新重组病毒在细胞和家蚕中表达外源基因的水平有明显提高,明显减少病毒感染后期由细菌所引起的继发感染,并可通过食下高效感染家蚕。

    改造重组家蚕核型多角体病毒的基因工程载体的构建方法

    公开(公告)号:CN1673379A

    公开(公告)日:2005-09-28

    申请号:CN200510037703.2

    申请日:2005-01-25

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种改造重组家蚕核型多角体病毒的基因工程载体构建方法,其步骤包括PCR分别克隆病毒的ChiA片段和CP片段;将该二片段同时克隆进细菌质粒,构建中间质粒;将带有家蚕核型多角体病毒完整多角体蛋白基因编码区以及启动子的片段克隆进中间质粒内,获得改造的常规重组家蚕核型多角体病毒的基因工程载体。该载体与多角体蛋白基因被外源基因取代的重组家蚕核型多角体病毒DNA共转染家蚕细胞,可获得同时失活了几丁酶、半胱氨酸蛋白酶二基因的、可形成多角体的新重组病毒。新重组病毒在细胞和家蚕中表达外源基因的水平有明显提高,明显减少病毒感染后期由细菌所引起的继发感染,并可通过食下高效感染家蚕。

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