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公开(公告)号：CN115820518A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202210848577.2
申请日：2022-07-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效生产莽草酸的重组大肠杆菌及其应用，本发明的重组大肠杆菌，命名为大肠杆菌(Escherichia coli)FMME‑SA07。本发明首先通过敲除莽草酸激酶I和II的编码基因aroK和aroL获得了一株积累莽草酸的重组大肠杆菌。随后基于酶约束模型ec_iML1515筛选到大肠杆菌合成莽草酸的10个关键路径靶点，通过改造这些靶点重构大肠杆菌代谢路径以高产莽草酸。最后通过压力响应调控工程增强莽草酸生产强度；在发酵罐水平上发酵48h生产莽草酸126.4g/L。本发明发酵生产莽草酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN115717131A
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202211480005.X
申请日：2022-11-21
Abstract: 本发明公开了一种重组酪氨酸酶突变体及其应用，属于生物工程领域。本发明通过分子生物学手段从巨大芽孢杆菌基因组中获得酪氨酸酶BM Tyr，将重组酪氨酸酶BM Tyr的第218位、第215位、第209位的氨基酸中的一个或多个进行突变得到重组酪氨酸酶突变体。本发明重组酪氨酸酶BM Tyr突变体氧化表儿茶素没食子酸酯活性，相对于重组酪氨酸酶BM Tyr提高了1.14～6.26倍，且重组酪氨酸酶BM Tyr突变体表现出较高的表儿茶素没食子酸酯活性。采用本发明的方法，提高了单位催化剂的生产能力和催化剂的反应效率，降低了反应的成本，加快了酶转化法生产茶黄素‑3,3’‑双没食子酸的工业化进程。
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公开(公告)号：CN114015634B
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202111299764.1
申请日：2021-11-04
Applicant: 江南大学 , 淮北创新生物新材料有限责任公司
Abstract: 本发明涉及一种生物工程技术领域，尤其涉及一种高产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。其中，高产琥珀酸的重组大肠杆菌是将编码大肠杆菌中甲酸脱氢酶的基因fdhF替换为来自假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的外膜蛋白调节器OmpR。本发明采用CRISPR‑cas9基因编辑技术将宿主菌FMME‑N‑5中编码甲酸脱氢酶基因fdhF替换为假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并运用RBS序列和启动子策略上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的关键外膜蛋白调节器OmpR，所得到的重组大肠杆菌没有抗性，耐渗透压并可高效生产琥珀酸。
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公开(公告)号：CN114990013A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210574762.7
申请日：2022-05-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12P13/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一株固定CO2产L‑苏氨酸的大肠杆菌工程菌及应用，属于发酵领域。本发明筛选获得了一株具有L‑苏氨酸生产能力的大肠杆菌FMME‑AA5，在此基础上通过游离过表达甲酸脱氢酶、乙酰辅酶A合成酶、酰化乙醛脱氢酶、甲醛裂合酶、二羟基丙酮激酶和亚磷酸脱氢酶，获得菌株大肠杆菌E.coli FMME‑AA5‑A。将构建的大肠杆菌工程菌用于发酵生产L‑苏氨酸，以CO2和葡萄糖作为共底物厌氧发酵42h，L‑苏氨酸产量可达145.0g/L，葡萄糖得率相比原始菌株的0.58g/g可提高至0.65g/g。
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公开(公告)号：CN110551669B
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN201910836782.5
申请日：2019-09-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种近红外光控制的动态调控系统及其应用，具体公开了一种近红外光组合控制的涉及动态调控系统及其在乙偶姻生产中的应用，属于代谢工程技术领域。本发明通过分子生物学手段，选择了近红外光光敏蛋白。利用光敏蛋白特异性响应特定波长的光源特性和无需外源添加诱导剂的优势通过在工程大肠杆菌中引入靶向RpoS的动态调控基因线路，实现了在无机盐培养基中生产乙偶姻。通过本发明生产的乙偶姻产量可达66.8g/L，转化率达0.58g/g葡萄糖。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114214293A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111599580.7
申请日：2021-12-24
Applicant: 无锡阿科力科技股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌细胞色素P450环氧酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过对来源于恶臭假单胞菌的细胞色素P450环氧酶进行改造，克服了之前野生型的酶因为过氧化氢逸散和酸醇对质子转化率低而导致的催化效率低的局限，最终得到最佳突变体Q6(PpCytPA250V/T255E/S296V/A297P/P298N)，以此突变体为催化剂，以降冰片烯为底物，转化后10mL规模摇瓶产量为72.05g/L，摩尔产率为61.59％，单位菌体生产环氧降冰片烷的能力为3.6g/g，几乎不产生羟基化副产物。因此大大降低了之前的高菌体量以及繁复的后期分离纯化过程，为环氧降冰片烷的工业化生产和绿色生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN111876349B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202010698081.2
申请日：2020-07-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株产聚赖氨酸的白色链霉菌及其应用，属于微生物领域。白色链霉菌菌株(Streptomyces ghanaensis)，保藏编号CCTCC NO:M 2020214。本发明的白色链霉菌FMME‑545具有较好的传代稳定性，在传代12代之后，其ε‑聚赖氨酸的生产能力均能够稳定在一定水平；在摇瓶水平上发酵生产ε‑聚赖氨酸产量达2.5～3.0g/L，在发酵罐水平上发酵生产ε‑聚赖氨酸产量达35～40g/L。本发明的发酵生产ε‑聚赖氨酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN111100865B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202010013244.9
申请日：2020-01-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种提高酿酒酵母丁醇耐受能力的方法，本发明提供的工程菌pY26‑CERT不影响菌株的正常生产，并且可以耐受1％丁醇，能够使得在该浓度下的生物量较野生型菌株显著增加19.7％，并且使IPC、MIPC、M(IP)2C这三种主要的鞘脂组分分别较野生型提高了20％、65％、和56％，另外细胞膜的完整性较野生型菌株提高了27.8％。能够提高在生产过程中对高浓度丁醇的抗压能力，有利于提高发酵产品的产量，也能够节约丁醇在工业化生产中的生产成本，有利于丁醇工业化生产发展。
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公开(公告)号：CN114107156A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111433195.5
申请日：2021-11-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N9/06 , C12N9/02 , C12N9/88 , C12N15/53 , C12N15/60 , C12N15/70 , C12P7/44 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种高效生产戊二酸的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明通过分子生物学手段构建了一株双质粒重组菌，共表达芳香醛合酶基因AAS、胺氧化酶基因Mao以及醛脱氢酶基因Glox，将构建好的表达质粒导入大肠杆菌中构建得到重组细胞。再通过氨苄青霉素抗性和卡那霉素抗性组合平板筛选获得高效生产戊二酸的重组菌株。并通过优化底物浓度、菌体浓度，以及转化温度，实现了戊二酸的高效生产。在菌体浓度为30g/L、pH为8，并额外添加6mM NAD+的转化条件下反应30h，可将30g/L的L‑赖氨酸转化为19.65g的戊二酸，转化率可达到65.3％。
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公开(公告)号：CN114107153A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111423759.7
申请日：2021-11-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种生产己二酸的重组菌，表达调控细胞不对称分裂的靶点基因和调控己二酸生产的靶点基因，在此基础上，通过RBS序列调控不同基因片段的表达强度，实现定制化微生物群落，并且改善了己二酸生产性能。本发明的重组菌实现了从头合成己二酸，底物为脂肪酸，且该菌株在7.5L发酵罐发酵后，己二酸最高产量为5.2g/L。
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