公开(公告)号：CN112239738B

公开(公告)日：2022-11-25

申请号：CN202011181369.9

申请日：2020-10-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  唐文秀 ,  徐祖伟 ,  罗秋玲 ,  陈修来 ,  高聪 ,  刘佳

IPC: C12N1/20 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一株产琥珀酸的大肠杆菌及其应用，属于微生物技术领域。本发明提供一株大肠杆菌，命名为大肠杆菌(Escherichia coli)FMME‑N‑5，于2020年8月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉，保藏编号为CCTCC NO:M 2020454。本发明的大肠杆菌FMME‑N‑5在厌氧摇瓶水平上发酵52 h，生产琥珀酸产量达56.77 g/L，在发酵罐水平上发酵96h，琥珀酸产量达105.2 g/L；本发明发酵生产琥珀酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。

公开(公告)号：CN114015634B

公开(公告)日：2022-12-02

申请号：CN202111299764.1

申请日：2021-11-04

Applicant: 江南大学 ,  淮北创新生物新材料有限责任公司

Inventor： 刘立明 ,  罗旭 ,  王学明 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  唐文秀 ,  徐祖伟 ,  高聪 ,  郭亮 ,  胡贵鹏 ,  宋伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/90 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种生物工程技术领域，尤其涉及一种高产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。其中，高产琥珀酸的重组大肠杆菌是将编码大肠杆菌中甲酸脱氢酶的基因fdhF替换为来自假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的外膜蛋白调节器OmpR。本发明采用CRISPR‑cas9基因编辑技术将宿主菌FMME‑N‑5中编码甲酸脱氢酶基因fdhF替换为假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并运用RBS序列和启动子策略上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的关键外膜蛋白调节器OmpR，所得到的重组大肠杆菌没有抗性，耐渗透压并可高效生产琥珀酸。

公开(公告)号：CN111876349B

公开(公告)日：2022-03-18

申请号：CN202010698081.2

申请日：2020-07-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  殷楠楠 ,  徐祖伟 ,  陈修来 ,  高聪 ,  罗秋玲 ,  刘佳

IPC: C12N1/20 ,  C12P13/02 ,  C12R1/465

Abstract: 本发明公开了一株产聚赖氨酸的白色链霉菌及其应用，属于微生物领域。白色链霉菌菌株(Streptomyces ghanaensis)，保藏编号CCTCC NO:M 2020214。本发明的白色链霉菌FMME‑545具有较好的传代稳定性，在传代12代之后，其ε‑聚赖氨酸的生产能力均能够稳定在一定水平；在摇瓶水平上发酵生产ε‑聚赖氨酸产量达2.5～3.0g/L，在发酵罐水平上发酵生产ε‑聚赖氨酸产量达35～40g/L。本发明的发酵生产ε‑聚赖氨酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。

公开(公告)号：CN114015634A

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN202111299764.1

申请日：2021-11-04

Applicant: 江南大学 ,  淮北创新生物新材料有限责任公司

Inventor： 刘立明 ,  罗旭 ,  王学明 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  唐文秀 ,  徐祖伟 ,  高聪 ,  郭亮 ,  胡贵鹏 ,  宋伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/90 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种生物工程技术领域，尤其涉及一种高产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。其中，高产琥珀酸的重组大肠杆菌是将编码大肠杆菌中甲酸脱氢酶的基因fdhF替换为来自假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的外膜蛋白调节器OmpR。本发明采用CRISPR‑cas9基因编辑技术将宿主菌FMME‑N‑5中编码甲酸脱氢酶基因fdhF替换为假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并运用RBS序列和启动子策略上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的关键外膜蛋白调节器OmpR，所得到的重组大肠杆菌没有抗性，耐渗透压并可高效生产琥珀酸。

公开(公告)号：CN112239738A

公开(公告)日：2021-01-19

申请号：CN202011181369.9

申请日：2020-10-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  唐文秀 ,  徐祖伟 ,  罗秋玲 ,  陈修来 ,  高聪 ,  刘佳

IPC: C12N1/20 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一株产琥珀酸的大肠杆菌及其应用，属于微生物技术领域。本发明提供一株大肠杆菌，命名为大肠杆菌(Escherichia coli)FMME‑N‑5，于2020年8月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:M 2020454。本发明的大肠杆菌FMME‑N‑5在厌氧摇瓶水平上发酵52h，生产琥珀酸产量达56.77g/L，在发酵罐水平上发酵96h，琥珀酸产量达105.2g/L，之前选育菌株FMME‑SuAP菌株罐上发酵55h，琥珀酸产量80g/L，但是因不能耐受高浓度产物，延长发酵时间，琥珀酸产量不再增加；而本发明诱变选育菌株FMME‑N‑5对产物丁二酸钠的耐受性提高，最终琥珀酸产量提高至105.2g/L；本发明发酵生产琥珀酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。

公开(公告)号：CN111876349A

公开(公告)日：2020-11-03

申请号：CN202010698081.2

申请日：2020-07-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  殷楠楠 ,  徐祖伟 ,  陈修来 ,  高聪 ,  罗秋玲 ,  刘佳

IPC: C12N1/20 ,  C12P13/02 ,  C12R1/465

Abstract: 本发明公开了一株产聚赖氨酸的白色链霉菌及其应用，属于微生物领域。白色链霉菌菌株(Streptomyces ghanaensis)，保藏编号CCTCC NO:M 2020214。本发明的白色链霉菌FMME-545具有较好的传代稳定性，在传代12代之后，其ε-聚赖氨酸的生产能力均能够稳定在一定水平；在摇瓶水平上发酵生产ε-聚赖氨酸产量达2.5～3.0g/L，在发酵罐水平上发酵生产ε-聚赖氨酸产量达35～40g/L。本发明的发酵生产ε-聚赖氨酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。