一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法

    公开(公告)号:CN110196219A

    公开(公告)日:2019-09-03

    申请号:CN201910405117.0

    申请日:2019-05-16

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法,包括如下步骤:(1)细菌培养,所述的细菌为鸡白痢沙门菌S06004和S06004ΔspiC;(2)鸡的免疫及采样;(3)靶细胞—巨噬细胞的制备;(4)效应细胞—鸡脾脏CD8+T细胞的制备:包括鸡脾脏淋巴细胞悬液的制备步骤和磁珠分选鸡脾脏CD8+T细胞的步骤;(5)CTL特异性杀伤巨噬细胞。相对于现有技术,本发明具有如下有益效果:本发明贴壁获得的巨噬细胞(靶细胞)纯度较高,且鸡脾脏CD8+T细胞分选效果明显,分离时间短;以沙门菌宿主细胞—巨噬细胞作为靶细胞,可更精确反映宿主对沙门菌的清除能力;将流式细胞术用于鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用,可在单细胞水平检测鸡脾脏CD8+T细胞的CTL效应。

    一种区分单核细胞增生李斯特菌和/或伊氏李斯特菌感染的ELISA试剂盒、制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN119438592A

    公开(公告)日:2025-02-14

    申请号:CN202310966150.7

    申请日:2023-08-02

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于区分宿主感染单核细胞增生李斯特菌和/或伊氏李斯特菌的间接ELISA检测试剂盒。包被抗原分别为重组的单核细胞增生李斯特菌表面蛋白ActA、血清型4h单核细胞增生李斯特菌和伊氏李斯特菌共有的外膜蛋白SmcL、以及伊氏李斯特菌特有的外膜蛋白I‑inlH,基于对这3种抗原分别建立了间接ELISA方法,通过对这三种检测方法的联用,能有效监测临床血清样品中ActA抗体、SmcL抗体和I‑inlH抗体水平,实现对单核细胞增生李斯特菌和/或伊氏李斯特菌引起的李斯特菌病的检测。该试剂盒灵敏度较高、特异性强、稳定性好,为李斯特菌病的流行病学调查和诊断提供了一种有效的方法。

    一种利用表面等离子体共振技术检测沙门菌的方法

    公开(公告)号:CN116990263A

    公开(公告)日:2023-11-03

    申请号:CN202310895215.3

    申请日:2023-07-20

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种利用表面等离子体共振技术检测沙门菌,包括如下步骤:(1)芯片的制备,所述的芯片为CM5芯片;(2)细菌培养,所述的细菌为肠炎沙门菌C50041;(3)细菌与抗体孵育,所述的抗体为沙门菌PagN(3B3)蛋白抗体;(4)游离抗体分离;(5)表面等离子体共振技术检测。相对于现有技术,本发明具有如下有益效果:本发明可以半定量检测样品中的沙门菌;将单克隆抗体作为检测靶标,本发明具有优良特异性;将表面等离子体共振技术应用于沙门菌检测,可以缩短检测时间;对再生条件进行了优化,可以确保检测的重复性。

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