一种基于RPA-侧流层析技术检测茄腐镰孢菌的引物和探针组合及其应用

    公开(公告)号:CN109825628A

    公开(公告)日:2019-05-31

    申请号:CN201910241240.3

    申请日:2019-03-28

    Abstract: 本发明公开了一种基于RPA-侧流层析技术检测茄腐镰孢菌的引物及探针组合及其应用。所述应用具体为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有茄腐镰孢菌;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有茄腐镰孢菌。本发明所使用的引物及探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在质控区有阳性对照,增加了检测的灵敏性,为茄腐镰孢菌的检测提供了新的技术平台,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对苗圃地或者发病植株中的茄腐镰孢菌进行检测。

    一种高通量检测8种疫霉菌的分子检测方法

    公开(公告)号:CN110079631B

    公开(公告)日:2022-11-15

    申请号:CN201910391877.0

    申请日:2019-05-10

    Abstract: 本发明公开了一种高通量检测8种疫霉菌的分子检测方法。在本发明中,将LAMP技术与96孔板结合建立了一种能够同时检测8种疫霉菌的高通量检测技术。针对8种疫霉菌(寄生疫霉Phytophthora parasitica、Phytophthora tentaculata、致病疫霉Phytophthora infestans、草莓疫霉Phytophthora fragariae、辣椒疫霉Phytophthora capsici、掘氏疫霉Phytophthora drechsleri、恶疫霉Phytophthora cactorum、大雄疫霉Phytophthora megasperma)的同一个靶标基因Ypt1建立了Ypt1‑LAMP检测引物、试剂盒和方法。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好,为疫霉菌的检测提供了高通量快速检测技术,对疫霉菌疫病防治和监测具有重要和深远意义。

    一种层出镰孢菌的特异性检测靶标FPRO_09882及其应用

    公开(公告)号:CN114032331B

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202111517635.5

    申请日:2021-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)的检测新靶标FPRO_09882及其检测引物、检测试剂盒和检测方法,该检测靶标FPRO_09882的蛋白序列如SEQ ID NO:1所示,编码该蛋白的DNA序列如SEQ ID NO:2所示。同时,本发明还公开了特异性检测靶标FPRO_09882的RPA检测技术的特异性引物及探针组合,其正向引物序列如SEQ ID NO:3所示,反向引物序列如SEQ ID NO:4所示,探针序列如SEQ ID NO:5所示。本发明发现了层出镰孢菌新的检测靶标,为层出镰孢菌的检测提供了新的检测途径,同时基于该靶标开发的RPA‑LFD检测引物和探针,能够实现层出镰孢菌的特异性检测,灵敏度高。

    一种丁香疫霉的特异性检测靶标Psyri_s00018g00015.1及其应用

    公开(公告)号:CN114015804B

    公开(公告)日:2022-07-12

    申请号:CN202111517439.8

    申请日:2021-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种丁香疫霉(Phytophthora syringae)的检测新靶标Psyri_s00018g00015.1及其检测引物、检测试剂盒和检测方法,该检测靶标Psyri_s00018g00015.1的蛋白序列如SEQ ID NO:1所示,编码该蛋白的DNA序列如SEQ ID NO:2所示。同时,本发明还公开了特异性检测靶标Psyri_s00018g00015.1的RPA检测技术的特异性引物及探针组合,其正向引物序列如SEQ ID NO:3所示,反向引物序列如SEQ ID NO:4所示,探针序列如SEQ ID NO:5所示。本发明发现了丁香疫霉新的检测靶标,为丁香疫霉的检测提供了新的检测途径,同时基于该靶标开发的RPA‑LFD检测引物和探针,能够实现丁香疫霉的特异性检测,灵敏度高。

    柑橘病原菌丁香疫霉的特异性检测靶标Psyri_s00001g00016.1及应用

    公开(公告)号:CN114277174A

    公开(公告)日:2022-04-05

    申请号:CN202111624935.3

    申请日:2021-12-28

    Abstract: 本发明公开了一种柑橘疫病的病原菌丁香疫霉(Phytophthora syringae)的特异性检测靶标Psyri_s00001g00016.1,该检测靶标Psyri_s00001g00016.1的DNA序列如SEQ ID NO:1所示,CDS序列如SEQ ID NO:1所示,蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。同时,还公开了特异性检测靶标Psyri_s00001g00016.1的引物组合,其正向引物序列如SEQ ID NO:3所示,反向引物序列如SEQ ID NO:4所示。本发明所发掘的检测靶标和其设计的引物组合用于普通PCR,其特异性强,灵敏度高,证明Psyri_s00001g00016.1适合作为柑橘疫病的病原菌丁香疫霉(P.syringae)的检测靶标,本发明发掘的新靶标和基于该靶标建立的检测方法对于港口的进境植物上携带的P.syringae实现即检即防,保护我国生态安全具有重要作用。

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