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公开(公告)号：CN106568894A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610908029.9
申请日：2016-10-18
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: G01N33/0098 , G01N15/06 , G01N2015/0053 , G01N2015/0687 , G01N2015/0693
Abstract: 本发明公开了一种系统评价百合资源散粉特性的方法及其应用，涉及百合生殖生物学及杂交育种研究领域。该方法包括：(1)观察计数百合资源的单花花药数；(2)获取待测样品的花药，观察花药是否开裂；(3)统计花药的长度、宽度和厚度，计算出花药体积；(4)统计花药含粉量和单花含粉量；(5)根据花药含粉量和花药体积计算单位体积花药含粉量；(6)确定百合资源散粉盛期的表观花粉量以及花粉对花瓣的污染情况。本发明建立了一种系统评价百合资源散粉特性的方法，将为百合资源散粉特性评价、散粉量差异的生殖发育机制研究、以及无花粉污染百合新品种培育奠定重要基础。
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公开(公告)号：CN103882054B
公开(公告)日：2017-01-04
申请号：CN201410131935.3
申请日：2014-04-02
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种通过农杆菌注射渗透法将外源基因转入菊花或近缘种进行瞬时表达的方法，该外源基因为GUS基因，由携带35s启动子及终止子，小于10kb的过量表达载体质粒携带。主要步骤包括（1）植株的获得（2）植物表达载体pORER1-2×35s:gus的构建（3）侵染液制备（4）菊花叶片的制备（5）叶片转化（6）叶片转化后培养7）阳性转化叶片检测。本发明通过选择合适的外植体、以农杆菌菌株作为易感菌株，通过利福平和卡那霉素选择侵染菌体；同时，以P19与农杆菌混合培养制成侵染液，P19能有效抑制植物对外源导入载体表达的沉默效应，提高表达量，并且合理优化共培养条件，使该方法转化时间缩短至45天左右，转化效率达到60%以上。本发明方法为更有效地筛选和分析菊花基因功能、蛋白质定位及进一步获得稳定转化子提供了可能。
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公开(公告)号：CN103882054A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201410131935.3
申请日：2014-04-02
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种通过农杆菌注射渗透法将外源基因转入菊花或近缘种进行瞬时表达的方法，该外源基因为GUS基因，由携带35s启动子及终止子，小于10kb的过量表达载体质粒携带。主要步骤包括（1）植株的获得（2）植物表达载体pORER1-2×35s:gus的构建（3）侵染液制备（4）菊花叶片的制备（5）叶片转化（6）叶片转化后培养（7）阳性转化叶片检测。本发明通过选择合适的外植体、以农杆菌菌株作为易感菌株，通过利福平和卡那霉素选择侵染菌体；同时，以P19与农杆菌混合培养制成侵染液，P19能有效抑制植物对外源导入载体表达的沉默效应，提高表达量，并且合理优化共培养条件，使该方法转化时间缩短至45天左右，转化效率达到60%以上。本发明方法为更有效地筛选和分析菊花基因功能、蛋白质定位及进一步获得稳定转化子提供了可能。
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公开(公告)号：CN103828710A
公开(公告)日：2014-06-04
申请号：CN201410100386.3
申请日：2014-03-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明为一种高效率菊花杂交育种的方法，属于生物技术育种领域，本发明选择杂交后代种子，经75%乙醇消毒1min及5%次氯酸钠消毒50min后，播种于含15g·L-1蔗糖的MS培养基上，并结合组织培养技术，进一步扩繁和继代培养，获得大量的无菌苗。本方法切实提高了杂交种子发芽率和成苗率，并且对于部分存在杂交不亲和性的菊花品种，可将由少量的杂交后代种子获得的无菌苗于当年进行继代扩繁，以获得较大群体的株系，从而缩短育种周期，并进一步丰富了菊花育种手段。
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公开(公告)号：CN102660557B
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201210171527.1
申请日：2012-05-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了菊花水孔蛋白编码基因CmAQP及其植物表达载体和构建方法。本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-CmAQP是由CmAQP基因插入到克隆载体pMD19-T simple vector，经BamH I和Xba I双酶切后连接到载体pCAMBIA 1301的BamH I和Xba I位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化，CmAQP基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成CmAQP蛋白，从而提高拟南芥种子盐胁迫下的萌发率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102660557A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210171527.1
申请日：2012-05-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了菊花水孔蛋白编码基因CmAQP及其植物表达载体和构建方法。本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-CmAQP是由CmAQP基因插入到克隆载体pMD19-T simple vector，经BamH I和Xba I双酶切后连接到载体pCAMBIA 1301的BamH I和Xba I位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化，CmAQP基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成CmAQP蛋白，从而提高拟南芥种子盐胁迫下的萌发率。
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公开(公告)号：CN102106239B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010598839.1
申请日：2010-12-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 一种利用嫁接提高切花菊插穗产量和品质的方法，属于花卉种苗生产技术领域。步骤包括砧木的准备、接穗的准备、嫁接与管理和插穗的采集。与目前采用的以扦插苗为采穗母株相比，本发明利用嫁接苗作为采穗母株，生长势旺，可获得高产量和高品质的插穗。各采穗批次中黄蒿嫁接苗较扦插苗在插穗产量、平均长度、平均节数、平均粗度、平均鲜重和平均干重指标上均有提高。且插穗的扦插生根能力有所提高，最早生根天数及插穗生根苗的不定根数、根长、根粗、根系干重等指标均高于扦插苗。
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公开(公告)号：CN101520447B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910029626.4
申请日：2009-04-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/00
Abstract: 本发明利用人工接种单株隔离对菊花抗蚜虫性鉴定的方法，属于抗性育种领域。选择苗高约10cm植株移栽，用毛笔将蚜虫接到鉴定植株的茎端或未展开幼叶处，随即用圆筒罩于植株上，使植株和蚜虫处于可以正常生长繁殖的条件下。接种后3周观察统计植株上的蚜虫数量，根据蚜虫的繁殖倍率对不同菊花材料的抗蚜虫能力做出比较鉴定。本发明利用的原材料非常普通，简单易行，成本低廉，可操作性强，实用性突出；试验结果受环境或人为因素的影响小，使筛选出对蚜虫抗性强的种质资源进行菊花育种成为可能，同时可用于抗蚜虫育种后代材料的早期鉴定，大大缩短开展菊花抗蚜虫育种所需的时间，确保所育品种对蚜虫抗性的真实性、科学性和稳定性。
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公开(公告)号：CN101451140A
公开(公告)日：2009-06-10
申请号：CN200910028638.5
申请日：2009-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种匍匐型地被菊遗传转化的方法，属于菊花分子育种领域。以菊花品种“钟山红枫”RNA为模板扩增合成DREBa基因，克隆到T－载体，双酶切获取的DREBa基因目的片段与pCAMBIA 1301连接，而后转化农杆菌，获得含有重组质粒pCAMBIA1301－DREBa的农杆菌菌液；无菌苗叶圆片用农杆菌液侵染10min，共培养3d、脱菌培养3d、筛选培养获得具潮霉素抗性的生根苗。经PCR检测证实外源基因已转入地被菊基因组DNA中。本发明首次针对匍匐型地被菊建立了其遗传转化体系，为地被菊分子育种工作提供了理论基础和实验依据，将有效推动其分子育种进程。
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