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公开(公告)号：CN101006774A
公开(公告)日：2007-08-01
申请号：CN200710019346.6
申请日：2007-01-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及通过减少培养基中大量元素进行菊花离体保存的方法，专用于菊花种质资源离体保存。取菊花脚芽为外植体，以腋芽进行继代增殖。在1/2MS或1/2MS(1/2NH4+)或1/4MS，附加6－BA0.3mg/L和NAA0.1mg/L的培养基上进行保存，12个月后存活率均为100％，比正常MS培养基上的试管苗延长存活8个月。保存材料恢复生长正常，其后代经过氧化物酶(POD)及酯酶(EST)同工酶、ISSR分子标记检测未发生遗传变异。本发明首次利用减少培养基中大量元素保存菊花试管苗并对其后代进行遗传稳定性鉴定，不但保存1年后植株生长正常，而且保存材料的后代未发生遗传性变异。
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公开(公告)号：CN101002541A
公开(公告)日：2007-07-25
申请号：CN200710019345.1
申请日：2007-01-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种菊花种质资源离体保存的方法，专用于菊花种质资源离体保存。取菊花脚芽为外植体，以腋芽进行继代增殖。在分别附加了20～40mg·L－1脱落酸(ABA)的MS＋0.3mg·L－16－BA＋0.1mg·L－1NAA培养基中进行保存，10个月后存活率均为100％，比正常培养基上生长的试管苗延长存活6个月。保存材料恢复生长正常，其后代经过氧化物酶(POD)及酯酶(EST)同工酶、ISSR分子标记检测未发生遗传变异。本发明首次利用在培养基中添加脱落酸保存菊花试管苗并对其后代进行遗传稳定性鉴定，不但保存10个月后植株生长正常，而且保存材料的后代未发生遗传性变异。
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公开(公告)号：CN101368208B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200810156172.2
申请日：2008-09-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种地被菊株型匍匐性分子标记辅助选择方法，属于生物技术领域，用于地被菊株型匍匐性的分子标记辅助选择育种。用RAPD引物A-10，或者用SCAR引物，扩增地被菊或育种材料DNA，如果能够扩增出555bp的片段，均标志着地被菊匍匐基因的存在。本发明对以‘早意大利红’(P1)为母本、03(6)-12为父本(P2)杂交获得的152株F1分离群体为试材，构建株型匍匐/直立基因池进行RAPD及SCAR分子标记的筛选，可有效开展地被菊株型匍匐性的分子标记辅助育种，大大提高选择效率，从而加快育种进程。
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公开(公告)号：CN101451140A
公开(公告)日：2009-06-10
申请号：CN200910028638.5
申请日：2009-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种匍匐型地被菊遗传转化的方法，属于菊花分子育种领域。以菊花品种“钟山红枫”RNA为模板扩增合成DREBa基因，克隆到T－载体，双酶切获取的DREBa基因目的片段与pCAMBIA 1301连接，而后转化农杆菌，获得含有重组质粒pCAMBIA1301－DREBa的农杆菌菌液；无菌苗叶圆片用农杆菌液侵染10min，共培养3d、脱菌培养3d、筛选培养获得具潮霉素抗性的生根苗。经PCR检测证实外源基因已转入地被菊基因组DNA中。本发明首次针对匍匐型地被菊建立了其遗传转化体系，为地被菊分子育种工作提供了理论基础和实验依据，将有效推动其分子育种进程。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100484398C
公开(公告)日：2009-05-06
申请号：CN200710019346.6
申请日：2007-01-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及通过减少培养基中大量元素进行菊花离体保存的方法，专用于菊花种质资源离体保存。取菊花脚芽为外植体，以腋芽进行继代增殖。在1/2MS或1/2MS(1/2NH4+)或1/4MS，附加6-BA0.3mg/L和NAA0.1mg/L的培养基上进行保存，12个月后存活率均为100%，比正常MS培养基上的试管苗延长存活8个月。保存材料恢复生长正常，其后代经过氧化物酶(POD)及酯酶(EST)同工酶、ISSR分子标记检测未发生遗传变异。本发明首次利用减少培养基中大量元素保存菊花试管苗并对其后代进行遗传稳定性鉴定，不但保存1年后植株生长正常，而且保存材料的后代未发生遗传性变异。
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公开(公告)号：CN101002538A
公开(公告)日：2007-07-25
申请号：CN200710019365.9
申请日：2007-01-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明是一种用平阳霉素诱导菊花矮化育种的方法，属于菊花化学诱变育种领域。取脚芽为外植体，以腋芽进行继代培养。在附加1～8mg·L－1平阳霉素的MS培养基上进行诱变处理，20d后转接到不含诱变剂的MS培养基上。本发明将组织培养与化学诱变育种相结合，提高了体细胞无性系变异的发生频率，促进了突变育种的成功。与传统菊花杂交育种相比，周期短，工作量小；与转基因、原生质融合等生物技术相比，设备要求简单，操作简便、安全性高。本发明处理得到的菊花株高平均值约占未处理菊花株高77.5～88.3％。
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公开(公告)号：CN101451140B
公开(公告)日：2010-09-15
申请号：CN200910028638.5
申请日：2009-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种匍匐型地被菊遗传转化的方法，属于菊花分子育种领域。以菊花品种‘钟山红枫’RNA为模板扩增合成DREBa基因，克隆到T-载体，双酶切获取的DREBa基因目的片段与pCAMBIA 1301连接，而后转化农杆菌，获得含有重组质粒pCAMBIA1301-DREBa的农杆菌菌液；无菌苗叶圆片用农杆菌液侵染10min，共培养3d、脱菌培养3d、筛选培养获得具潮霉素抗性的生根苗。经PCR检测证实外源基因已转入地被菊基因组DNA中。本发明首次针对匍匐型地被菊建立了其遗传转化体系，为地被菊分子育种工作提供了理论基础和实验依据，将有效推动其分子育种进程。
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公开(公告)号：CN100574612C
公开(公告)日：2009-12-30
申请号：CN200710019345.1
申请日：2007-01-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种菊花种质资源离体保存的方法，专用于菊花种质资源离体保存。取菊花脚芽为外植体，以腋芽进行继代增殖。在分别附加了20～40mg.L-1脱落酸(ABA)的MS+0.3mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA培养基中进行保存，10个月后存活率均为100%，比正常培养基上生长的试管苗延长存活6个月。保存材料恢复生长正常，其后代经过氧化物酶(POD)及酯酶(EST)同工酶、ISSR分子标记检测未发生遗传变异。本发明首次利用在培养基中添加脱落酸保存菊花试管苗并对其后代进行遗传稳定性鉴定，不但保存10个月后植株生长正常，而且保存材料的后代未发生遗传性变异。
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公开(公告)号：CN101368208A
公开(公告)日：2009-02-18
申请号：CN200810156172.2
申请日：2008-09-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种地被菊株型匍匐性分子标记辅助选择方法，属于生物技术领域，用于地被菊株型匍匐性的分子标记辅助选择育种。用RAPD引物A－10，或者用SCAR引物，扩增地被菊或育种材料DNA，如果能够扩增出555bp的片段，均标志着地被菊匍匐基因的存在。本发明对以‘早意大利红’(P1)为母本、03(6)－12为父本(P2)杂交获得的152株F1分离群体为试材，构建株型匍匐/直立基因池进行RAPD及SCAR分子标记的筛选，可有效开展地被菊株型匍匐性的分子标记辅助育种，大大提高选择效率，从而加快育种进程。
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