一种地衣芽孢杆菌201及其应用

    公开(公告)号:CN101486978B

    公开(公告)日:2012-05-30

    申请号:CN200810183072.9

    申请日:2008-12-02

    Abstract: 本发明公开了一种地衣芽孢杆菌201,Bacillus licheniformis201,于2007年7月2日在湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号CCTCC NO:M207092。本发明同时公开了其制备方法和应用,地衣芽孢杆菌201的对香蕉枯萎病菌抑制作用强,抑菌谱广,对香蕉枯萎病菌,西瓜枯萎病菌,番茄枯萎病菌,香蕉炭疽病菌,胶胞炭疽菌,玉米弯孢叶斑病菌,棉花黄萎病菌,小麦赤霉病菌等多种病原真菌都具有拮抗作用,防效高,环境安全性好,具有良好的开发应用前景。

    一种枯草芽孢杆菌203及其应用

    公开(公告)号:CN101550402B

    公开(公告)日:2011-02-16

    申请号:CN200810183071.4

    申请日:2008-12-02

    Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌203,所述枯草芽孢杆菌203,Bacillus?subtilis?203,于2007年7月2日在湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCCNO:M207094。本发明同时公开了其制备方法以及应用,所述枯草芽孢杆菌203菌株经平板对峙、盆栽试验筛选获得,能够有效抑制香蕉枯萎病菌的生长,抑菌谱广,对棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、西瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、弯孢叶斑病菌或香蕉炭疽病菌等多种病原真菌都有拮抗作用,环境安全性好,具有良好的开发应用前景。

    香蕉枯萎病菌4号生理小种的检测引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN100588716C

    公开(公告)日:2010-02-10

    申请号:CN200610036319.5

    申请日:2006-07-03

    Inventor: 王振中 廖林凤

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,公开了一个植物病原真菌的检测引物及其检测方法。本发明采用特异引物RF4并优化反应条件,建立了香蕉枯萎病菌4号生理小种的PCR检测方法,该方法能够特异、灵敏、有效的检测香蕉枯萎病菌4号生理小种。利用该方法能够检测到相当于0.1μg的菌丝,并且从香蕉的根和茎中均能够检测到病原物。

    香蕉枯萎病菌4号生理小种的检测引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN101113467A

    公开(公告)日:2008-01-30

    申请号:CN200610036319.5

    申请日:2006-07-03

    Inventor: 王振中 廖林凤

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,公开了一个植物病原真菌的检测引物及其检测方法。本发明采用特异引物RF4并优化反应条件,建立了香蕉枯萎病菌4号生理小种的PCR检测方法,该方法能够特异、灵敏、有效的检测香蕉枯萎病菌4号生理小种。利用该方法能够检测到相当于0.1μg的菌丝,并且从香蕉的根和茎中均能够检测到病原物。

    一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法

    公开(公告)号:CN109536432B

    公开(公告)日:2022-05-31

    申请号:CN201811162769.8

    申请日:2018-09-30

    Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法,包括以下步骤:S1.稻瘟菌分生孢子的培养:将稻瘟菌菌丝接种至PDA培养基中进行培养;向培养基中加入无菌水,捣碎菌丝,转至西红柿燕麦培养基中,涂抹均匀,28℃下光照培养2~4d;将培养基表面菌丝打断,再加入无菌水,洗去培养基表面菌丝,28℃下光照培养2~4d进行产孢;加入无菌水进行冲洗,收集分生孢子,过滤后得到浓缩的稻瘟菌分生孢子悬浮液;S2.采用超滤法制备稻瘟菌分生孢子分泌蛋白。本发明通过优化稻瘟菌分生孢子的培养和分泌蛋白的诱导提取步骤,避免了复杂的样品前处理过程;并应用shotgun技术,高通量分析鉴定了稻瘟菌分泌蛋白;本发明对于探究稻瘟菌的致病机理有重要意义。

    MODIP基因在调控稻瘟菌生长发育与产孢中的应用

    公开(公告)号:CN112094852B

    公开(公告)日:2022-04-01

    申请号:CN202010935214.3

    申请日:2018-09-21

    Abstract: 本发明公开了MODIP基因在调控稻瘟菌生长发育与产孢中的应用。稻瘟菌MODIP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第127‑2547位所示,编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。稻瘟菌MODIP基因可用于调控稻瘟菌菌丝生长、分生孢子的产生以及对水稻的致病性。实验证明,稻瘟菌MODIP基因被潮霉素磷酸转移酶基因(hph)和荧光蛋白基因(SGFP)置换后,所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌丝生长速度和产孢量明显低于于野生型稻瘟菌;致病性实验表明,稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑;MODIP基因的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的MODIP基因及其应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。

    稻瘟菌基因MoRMD1在调控稻瘟菌致病力中的应用

    公开(公告)号:CN110183521B

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN201910433251.1

    申请日:2019-05-23

    Abstract: 本发明公开一种稻瘟菌基因MoRMD1在调控稻瘟菌致病力中的应用,属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体,将其导入稻瘟菌原生质体;利用同源重组方法将该基因MoRMD1从稻瘟菌中敲除,获得敲除突变体ΔMoRMD1;所得到的稻瘟菌敲除突变体在附着胞形成方面存在缺陷,并且MoRMD1对维持细胞壁的完整性有重要作用。致病性试验表明,MoRMD1的缺失显著降低了稻瘟菌的毒力,在水稻叶片上不能形成明显病斑。本发明证实MoRMD1是稻瘟菌附着胞形成、维持细胞壁完整性和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明稻瘟菌的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。

    一种香蕉枯萎病菌1号小种原生质体的制备与再生方法

    公开(公告)号:CN110184199B

    公开(公告)日:2021-04-23

    申请号:CN201910433431.X

    申请日:2019-05-23

    Abstract: 本发明公开一种香蕉枯萎病菌1号小种原生质体的制备与再生方法。该方法包括Foc1分生孢子悬浮液的制备、Foc1菌丝体的收集、菌丝体细胞壁的酶解、Foc1原生质体的收集、Foc1原生质体的再生等步骤。本发明通过所述方法酶解菌丝细胞,所获原生质体的制备数最高达到6.0×108个/mL,所得原生质体大小均一,形态饱满,近似圆形。本发明采用含有200g/L葡萄糖的CM固体培养基作为再生培养基,提高了Foc1原生质体的再生率,最高为28.6%,明显高于现有的香蕉枯萎病菌原生质体的再生方法,为后续原生质体转化技术研究香蕉病菌致病分子机制提供了良好的基础。本发明方法制备过程简单、高效,便于操作。

    基因FoPDCD5在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用

    公开(公告)号:CN110669773B

    公开(公告)日:2021-03-26

    申请号:CN201910986131.4

    申请日:2019-10-17

    Abstract: 本发明公开一种基因FoPDCD5在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用,属于植物基因工程领域。本发明利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除,获得敲除突变体ΔFopdcd5;通过构建基因回补载体,将其导入ΔFopdcd5原生质体;利用随机插入的方法将该基因回补到敲除突变体中,获得回补突变体ΔFopdcd5‑com。致病性测定表明,敲除突变体ΔFopdcd5的致病性显著降低;回补突变体ΔFopdcd5‑com的致病性则恢复到野生型水平。本发明证实FoPDCD5是香蕉枯萎病菌分生孢子产生、应对氧化胁迫和致病性所必需的。有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。

    一种适于双向电泳的水稻叶片质膜磷酸化蛋白的提取方法

    公开(公告)号:CN109136166A

    公开(公告)日:2019-01-04

    申请号:CN201810759252.0

    申请日:2018-07-11

    CPC classification number: C12N5/04 C07K14/415

    Abstract: 本发明属于蛋白质组学技术领域,具体首次公开了一种适于双向电泳的水稻叶片质膜磷酸化蛋白的提取方法,包括水稻叶片粗质膜的提取、水稻叶片质膜的纯化及水稻叶片质膜磷酸化蛋白质的富集等步骤。本发明所述提取方法操作简单、提取效率高、成本低,所获的水稻叶片质膜纯度可达93%以上,从质膜蛋白质中富集的质膜磷酸化蛋白质得率为3.33~3.89%。该方法适合于质膜磷酸化蛋白提取困难、干扰杂质多的植物材料;同时所得质膜磷酸化蛋白杂质和干扰物较少,可满足双向电泳的要求,所获双向电泳图谱背景清晰、蛋白质点分布均匀、纵向拖尾和水平横纹现象较少,且具有良好的重复性;该方法适用于单子叶植物质膜磷酸化蛋白质组的制备与分析。

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