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公开(公告)号：CN109136167B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN201810762876.8
申请日：2018-07-12
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了百合叶肉原生质体的制备方法，包括步骤：(1)取带有未开放花蕾的百合植株，进行暗处理；(2)取植株的叶片，清洗、消毒；(3)向叶肉材料中加入酶解溶液，于暗处真空抽提，然后暗处静置酶解数小时，得到含有叶肉原生质体的酶解液；(4)所得酶解液用W5溶液稀释，网筛过滤，所得滤液经低速离心，弃上清，用W5溶液重悬原生质体沉淀，低速离心，弃上清，重复洗一次；用MMG溶液重悬原生质体沉淀。本发明克服了百合叶肉原生质体分离效率低的问题，有效建立了百合叶肉原生质体制备的方法。
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公开(公告)号：CN113652390A
公开(公告)日：2021-11-16
申请号：CN202111108086.6
申请日：2021-09-22
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及植物原生质体技术领域，具体涉及一种紫薇原生质体的制备方法。本发明针对紫薇提供原生质体的制备方法，该方法以紫薇叶片为材料，将紫薇叶片去除下表皮，将去除下表皮的叶片在酶解液中酶解处理，得到酶解溶液，将所述酶解溶液经分离得到叶肉酶解产物，经洗涤后分离得到叶肉原生质体。该方法能够高效地从紫薇叶片中提取获得原生质体，制备的原生质体具有较高的完整性和活性，为紫薇的分子育种提供了基础。
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公开(公告)号：CN112075339A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011061629.9
申请日：2020-09-30
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种高效诱导多倍体花粉培育芍药多倍体的方法，包括如下步骤：1)确定诱导时期；2)秋水仙素溶液配置；3)注射秋水仙素溶液；4)花粉采收；5)多倍体花粉的鉴定；6)杂交授粉；7)种子采收与播种；8)多倍体子代鉴定。本发明方法简单易行，多倍体花粉诱导率高，达47.4％，与现有方法相比，本发明不需组培及无菌的操作环境，成本低，直接可获得多倍体种子，有效避免了多倍体离体诱导等技术过程中容易污染、操作条件严格、产生嵌合体和过程繁琐等问题，便于推广，可以作为芍药多倍体新种质创造的一种重要手段，应用前景十分可观。
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公开(公告)号：CN111937741A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN202010906119.0
申请日：2020-09-01
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了芙蓉菊与阔叶毛华菊的属间远缘杂种创制方法。所述方法包括：以菊科芙蓉菊属二倍体芙蓉菊为母本，菊科菊属六倍体阔叶毛华菊为父本，进行人工杂交。对幼胚进行离体培养，得到F1代植株。对F1代材料进行杂种形态学和细胞学鉴定，最终获得芙蓉菊和阔叶毛华菊的真杂种后代。本发明克服了芙蓉菊与阔叶毛华菊的属间远缘杂交障碍，获得了远缘杂种后代，创制了一批新种质。
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公开(公告)号：CN107561171B
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201710546859.6
申请日：2017-07-06
Applicant: 北京林业大学 , 江苏苏北花卉股份有限公司
Abstract: 本发明提供月季花瓣中类胡萝卜素的高效提取及测定方法，包括步骤：a制备类胡萝卜素标准品溶液；b制备类胡萝卜素待测样品溶液；c高效液相色谱分析；d液质联用分析，获得月季花瓣中类胡萝卜素的质谱信息；e根据保留时间、紫外可见吸收光谱图、质谱图、类胡萝卜素标准品和和文献资料对月季花瓣样品中类胡萝卜素的结构进行鉴定；f根据类胡萝卜素标准品的线性回归方程，对月季花瓣样品中的类胡萝卜素进行定量分析。本发明方法样品用量少、提取效率高、结果重复性好、数据准确可靠，是一种适合月季花瓣类胡萝卜素提取以及定性、定量分析的优良方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110698550A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201911096082.3
申请日：2019-11-11
Applicant: 北京林业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/11 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明涉及植物基因工程与分子生物学技术领域，具体涉及一种快速鉴定真梅/杏梅品系的分子检测方法。本发明提供梅花PmEIL蛋白，其序列如SEQ ID NO.1所示。PmEIL蛋白参与梅花响应季节性气候变化，在真梅和杏梅品系中受温度、日照等季节性气候变化的调控方式存在明显差异，可用于鉴定真梅/杏梅品系，实现在梅花的幼苗期快速、准确地鉴定梅花品系，缩短了育种周期，极大地减少了育种工作量。本发明还提供与PmEIL基因相关且与梅花茎色相关的SNP分子标记，为梅花茎色性状的鉴定和真梅/杏梅品系的鉴定提供了基础和分子工具。
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公开(公告)号：CN110499325A
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201910630368.9
申请日：2019-07-12
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供一种TRV-based病毒诱导的报春花属植物基因沉默的方法。包括：A、根据报春花属植物目标基因，设计引物并扩增出该目标基因的DNA片段；B、将DNA片段连接到pTRV2载体上，得到重组载体；C、将pTRV1、重组载体分别转化农杆菌，所得转化子共同侵染植株。本发明首次证明TRV可成功应用于小报春基因沉默和功能验证，为报春花属植物的基因功能验证奠定了基础。本发明方法简单、研究周期短、无需基因全长和转化体系，获得目的表型效率高，可实现大量基因的快速功能验证。与现有的VIGS体系相比，本发明表型持续时间长，且在植株的不同部位均出现表型变化，对报春花属异型自交不亲和的遗传学研究具有重要意义。
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公开(公告)号：CN108871842A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810353453.0
申请日：2018-04-19
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种芍药根茎组织的徒手切片方法及其应用，徒手切片方法包括，获取洁净新鲜的芍药根茎组织，脱水至含水率为5‑10％，用刀片对上述得到的根茎组织沿垂直于其纵轴方向切削，获得20‑30μm厚的切片，将上述切片置于无水乙醇中去除多余水分后，置于蒸馏水中完全展开即得；该切片方法的应用，将切片置于显微镜下进行观察，拍照，且拍照在切片完成后的15min内完成。本发明所提供的徒手切片方法操作简单，切片效率高，成本低廉，能彻底解决现有石蜡切片方法实验条件严苛、操作过程复杂、使用有毒试剂及实验投入的时间和经费较大等问题，所用工具简单易得，价格低廉，不使用有毒试剂，绿色环保，应用广泛，理论和实际意义重大。
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公开(公告)号：CN104542285B
公开(公告)日：2018-04-24
申请号：CN201410843997.7
申请日：2014-12-30
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种大花萱草叶片组织培养的方法，其具体步骤为，以大花萱草露地生长的幼嫩内层叶片为外植体，经过消毒处理，接种于诱导培养基中诱导形成愈伤组织，经愈伤组织分化增殖、芽诱导和生根诱导，形成大花萱草完整小苗，将大花萱草小苗移栽到基质中，长成正常的大花萱草植株。本发明应用萱草叶片进行组织培养，克服了萱草只能在花期采用花部器官进行组织培养扩繁的限制，可实现周年繁殖，有利于进行良种快繁，丰富园林应用中萱草的种类。
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公开(公告)号：CN107576552A
公开(公告)日：2018-01-12
申请号：CN201710756558.6
申请日：2017-08-29
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种观察月季黑斑病侵染过程的石蜡切片染色方法，在切片脱蜡至水后，先用1％结晶紫水溶液进行染色，再利用碘液进行媒染，最后用95％酒精进行脱色。选择上述两种染液和脱色方法，可将组织细胞染为蓝色，将菌丝染色为红色，为观察黑斑病病程发展过程的观察的提供了方法。而且本发明的方法通过改进的染色方法，大大缩短了利用石蜡切片观察月季黑斑病侵染叶片进程的染色时间，提高了试验效率。
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