公开(公告)号：CN106755408A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611200502.4

申请日：2016-12-22

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张德强 ,  宋跃朋 ,  次东

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明提供了一种植物等位基因不平衡表达检测方法，包括以下步骤：1)比较候选基因序列，筛选标记等位基因的SNPs位点；2)根据筛选到的SNPs位点设计qPCR特异引物和简并引物；3)用qPCR特异引物和简并引物分别对待测样本的cDNA进行PCR扩增，获得扩增产物；4)若扩增产物的熔解曲线为单峰，根据PCR扩增的Ct值计算待测样本等位基因表达特异性；所述qPCR特异引物包括正向引物和反向引物，对引物3'末端与SNP位点3'末端互补的核苷酸进行LNA修饰。所述方法增加了检测结果的精确性和可靠性，并且简化了实验配套条件，显著地降低了实验成本。

公开(公告)号：CN104293893A

公开(公告)日：2015-01-21

申请号：CN201310298785.0

申请日：2013-07-16

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张德强 ,  马开峰 ,  宋跃朋

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6858 ,  C12Q2525/191 ,  C12Q2521/301 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明公开了一种采用MSAP技术检测林木木质部DNA甲基化的方法及试剂盒。其中，该方法包括以下步骤：S1，提取林木木质部DNA；S2，分别用EcoRI/HpaII、EcoRI/MspI两组酶对林木木质部DNA进行酶切；S3，分别对酶切得到的产物连接上限制性内切酶的接头；S4，以接头为模板设计的预扩增引物进行PCR预扩增，得PCR预扩增产物；S5，将PCR预扩增产物稀释后，加入带有选择性碱基的筛选引物进行PCR扩增；S6，电泳检测PCR扩增产物，统计并分析DNA条带。应用本发明的技术方案，能够为表观遗传变异研究提供有力的技术支持，为目标的林木分子标记辅助育种提供新的候选标记位点。