公开(公告)号：CN114859045A

公开(公告)日：2022-08-05

申请号：CN202210410577.4

申请日：2022-04-19

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 姜毓君 ,  满朝新 ,  杨鑫焱 ,  庞立冬 ,  张宇

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/533 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明通过链霉亲和素磁珠（Streptavidin magnetic beads，SMBs）与生物素高亲和力制备适体功能化磁珠（SMBs‑Apt1‑cDNA1），用于富集和分离鼠伤寒沙门氏菌，释放信号探针cDNA1。同时，设计功能化核酸发夹探针（Hairpine probe，HP1）作为模板，用于制备强荧光DNA‑AgNCs。在反应体系中，释放的cDNA1与HP1的结合触发Exo III对HP1的循环酶切，从而实现检测信号放大。检测结果通过体系荧光强度变化而确定。本发明构建的一系列基于贵金属纳米簇的光学适体传感器满足多种场景对沙门氏菌的检测需求，不仅丰富了贵金属纳米簇的应用领域，同时为食源性致病菌的快速检测领域提供了新的思路。

公开(公告)号：CN114807312A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210253367.9

申请日：2022-03-15

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 姜毓君 ,  杨鑫焱 ,  满朝新 ,  王郑辉

IPC: C12Q1/6818 ,  C12Q1/689 ,  G01N33/569 ,  C12R1/19

Abstract: 一种基于核酸外切酶Ⅲ辅助扩增的可视化检测大肠杆菌O157:H7的方法，属于食品安全技术领域。为了解决利用传统微生物学等检测致病菌方法中存在操作复杂，时间长和仪器设备昂贵等问题，实现大肠杆菌O157:H7现场可视化检测，本发明先用磁珠富集菌，再进行核酸外切酶Ⅲ循环扩增，扩增出的单链DNA含有G‑triplex序列，与氯化血红素结合后，可催化TMB和H2O2变成蓝色。本发明可以快速高效的捕获大肠杆菌O157:H7，不涉及核酸提取复杂繁琐的过程，具有操作简单，检测时间较短，成本低廉等优点。为实现快速检测大肠杆菌O157:H7提供了参考。

公开(公告)号：CN113846173A

公开(公告)日：2021-12-28

申请号：CN202111021185.0

申请日：2021-09-01

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 满朝新 ,  姜毓君 ,  付世骞 ,  杨鑫焱 ,  秦雪 ,  宋丹靓敏

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 一种用于阪崎克罗诺杆菌检测的新靶标、引物组及其检测方法，属于食品安全技术领域。为解决阪崎克罗诺杆菌传统检测方法步骤繁琐、耗时长、检测效率低，核酸检测的相关基因数量少且特异性不强的问题，本发明提供了用于阪崎克罗诺杆菌检测的新靶标，利用该靶标设计LAMP引物，并以样本DNA作为底物进行LAMP扩增反应，同时在反应前向体系中添加HNB染料，在恒温条件下扩增一段时间后，通过肉眼观察颜色变化可以判断样本中是否有目标菌的存在，实现了扩增阪崎克罗诺杆菌的可视化快速检测，该检测方法具有较高的灵敏性、特异性和实用性，拥有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN113699258A

公开(公告)日：2021-11-26

申请号：CN202111018531.X

申请日：2021-08-31

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 满朝新 ,  姜毓君 ,  秦雪 ,  付世骞 ,  杨鑫焱

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/10 ,  C12N15/11 ,  C12R1/42 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种同时检测克罗诺杆菌和沙门氏菌的引物组合、试剂盒及其应用，属于食品安全技术领域。为了解决传统微生物学方法检测沙门氏菌和克罗诺杆菌中存在的问题，本发明提供一种基于LAMP反应的双重试纸条和引物组合如SEQ ID NO:1‑8所示，步骤为提取沙门氏菌和克罗诺杆菌DNA并经过LAMP反应扩增出大量目标产物，通过在稳定胶体金、金标抗体、复溶液和稀释液制备的基础上构建的双重试纸条对结果进行肉眼直接判读。本发明获得的双重试纸条具有制作简单、成本低廉以及检测灵敏等优点，可用于同时检测食品及食品加工过程中的沙门氏菌和克罗诺杆菌污染，尤其是婴幼儿配方乳粉中的致病菌污染。

公开(公告)号：CN113564268A

公开(公告)日：2021-10-29

申请号：CN202110774957.1

申请日：2021-07-07

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 姜毓君 ,  杨鑫焱 ,  宋丹靓敏

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/085

Abstract: 本发明一种乳粉加工环境中蜡样芽胞杆菌的溯源方法，属于食品安全技术领域。本发明提供的方法的具体步骤为：对婴幼儿配方乳粉原辅料、生产环境中和生产接触到的物质表面的细菌进行分离；对分离菌株进行DNA的提取；利用通用引物FA‑27F和RA‑1492R进行16S rRNA序列的PCR扩增后鉴定蜡样芽胞杆菌；利用引物panC‑F引物为和panC‑R引物进行panC基因的PCR扩增后鉴定蜡样芽胞杆菌；进行生理生化实验分析；对蜡样芽胞杆菌进行分型；利用SPSS软件的相关性分析完成对婴幼儿配方乳粉中蜡样芽胞杆菌的进行溯源分析。可为减少婴幼儿配方乳粉加工环境中的蜡样芽孢杆菌污染提供一定的理论基础。