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公开(公告)号：CN102426126B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110251106.5
申请日：2011-08-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N1/30
Abstract: 本发明公开了一种牛囊胚内细胞团细胞和滋养层细胞的差异染色方法，包括以下步骤：1)利用免疫染色方法，以抗CDX2单克隆抗体作为一抗，将其与特异表达在牛囊胚滋养层细胞的CDX2分子进行免疫结合；2)利用免疫染色方法，以红色荧光标记的能够与抗CDX2单克隆抗体结合的抗体作为二抗，对清洗后的结合有一抗的牛囊胚进行免疫染色；3)在免疫染色完成后，对牛囊胚进行整体的细胞核荧光染色，以形成差异染色。本发明在CDX2蛋白在滋养层细胞内特异性表达，而在内细胞团细胞上不表达的基础上，这样利用基于CDX2分子的红色免疫染色和DAPI细胞核蓝色染色来进行差异染色，准确率为100％，而且图片清晰漂亮。
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公开(公告)号：CN101851638A
公开(公告)日：2010-10-06
申请号：CN201010142997.6
申请日：2010-04-09
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/877 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种包含Ipr1巨噬细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞，构建了一种包含Ipr1巨噬细胞异性表达载体Psp-EGFP-Ipr1，以及基于该载体的包含包含Ipr1巨噬细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞系，利用该细胞系作为核供体细胞，为解决奶牛结核病的转基因奶牛提供坚实的基础。本发明通过电转染法将外源性表达载体Psp-EGFP-Ipr1导入牛胎儿成纤维细胞，荧光显微镜观察标记基因EGFP的表达情况，并经G418筛选获得阳性细胞，经PCR鉴定，证实目的基因Ipr1整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组；最后，将转染Ipr1基因的牛胎儿成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚。
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公开(公告)号：CN101851602A
公开(公告)日：2010-10-06
申请号：CN200910021760.X
申请日：2009-03-31
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 一种牛体细胞克隆胚胎培养液及其培养方法，该培养液包括市售牛体细胞克隆胚胎输卵管培养液(mSOF)，还包括激活素A，该激活素A的浓度是20～80ng/mL；其培养方法是用常规条件培养牛体细胞颗粒细胞单层3天，从第4天开始，向市售牛体细胞克隆胚胎输卵管培养液(mSOF)加入浓度为20～80ng/mL的激活素A，得到牛体细胞克隆胚胎培养液，再用该牛体细胞克隆胚胎培养液5天既得牛体细胞克隆胚胎。本发明提高了胚胎的8/16细胞率、囊胚率、孵化率，使得Na/K-ATPase、Glut-1、ActR II、Smad2等基因表达水平显著提高。特别适用于牛体细胞克隆领域的应用。
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公开(公告)号：CN119251869A
公开(公告)日：2025-01-03
申请号：CN202411294269.5
申请日：2024-09-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G06V40/10 , G06V10/26 , G06V10/42 , G06V10/44 , G06V10/82 , G06N3/0455 , G06N3/0499 , G06N3/08
Abstract: 本发明公开了一种单视角山羊体尺测量方法、系统、设备与介质，涉及计算机三维视觉点云技术领域，包括步骤：获取山羊点云数据；将山羊点云数据划分成一系列的点云块，并将部分点云块掩盖，获得待输入的单视角点云块；将单视角点云块与位置特征输入深度神经网络模型的特征编码器，学习特征的注意力权重，并通过前馈网络获得粗点特征以及关键点特征，通过单视角点云块的全局特征对三维点云进行建模，获得三维点云坐标，利用全局特征、关键点特征和粗点特征进行迭代优化，预测山羊的体尺参数。本发明模拟真实场景中单视角点云的采集，也对全局特征、部分点云的粗特征和关键点特征进行优化，避免了传统方法对山羊造成可能的伤害。
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公开(公告)号：CN117778468A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202410141735.X
申请日：2024-02-01
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/12 , A61P15/14 , A61P29/00 , A01K67/0275
Abstract: 本发明公开了一种提高奶山羊抗乳腺炎基因β防御素1表达的基因编辑方法，属于基因表达调控、基因编辑和抗病育种技术领域。本发明公开的一种提高奶山羊抗乳腺炎基因β防御素1表达的基因编辑方法，将Cas9‑SgRNA4和供体载体共转染宿主细胞。本发明公开的一种提高奶山羊抗乳腺炎基因β防御素1表达的基因编辑方法，泌乳时期条件下，可以提高乳腺内β防御素1的含量，从而对乳腺炎致病菌具有拮抗作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112930729A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110185725.2
申请日：2021-02-11
Applicant: 西北农林科技大学 , 北京光辉财智管理咨询有限公司 , 郓城县工力有限公司
IPC: A01B49/06
Abstract: 本发明涉及一种联合精密播种机，属于农业机械与智能装备领域。它包括悬挂机架，悬挂机架下方由前向后依次设置有反曲剁刀、旋耕刀、深松铲、施肥机构、镇压器，镇压器的后面依次设置有排种机构、镇压轮和耱；其中，悬挂机架上设置有刀库安装架，所述的装有反曲剁刀的反曲剁刀刀库和装有旋耕刀的旋耕刀刀库分别通过各自的轴安装在刀库安装架的下端，反曲剁刀刀库或旋耕刀刀库的轴上或轴外设置有三棱切刀。本发明通过农机农艺融合创新设计，一次作业可依次完成灭茬切土、旋耕整地、深松破底、精准施肥、平地压实、圆盘开沟、精密布种、覆土镇压、耱耢保墒等工序流程，从而达到精细耕作、精准施肥和精密播种的效果。
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公开(公告)号：CN107988257A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201711322629.8
申请日：2017-12-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/877 , C12N13/00
CPC classification number: C12N15/85 , C12N9/0004 , C12N13/00 , C12N15/8772 , C12N2830/006
Abstract: 本发明公开了一种基于供体细胞DNA甲基化水平的修饰提高山羊克隆效率的载体、细胞和方法。本发明提供的载体包括阻遏蛋白TetR表达载体和含有操纵基因TetO的双向表达载体，在融合前将两者共转染到供体细胞中。筛选阳性转染的细胞，药物诱导表达山羊TET3，将TET3诱导表达的阳性细胞作为最终供体细胞，再将其注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，挑选成功融合的山羊体细胞克隆胚培养。本发明可以有效的降低供体细胞的甲基化水平，纠正克隆胚胎中的异常高甲基化现象，从而显著提高后期山羊体细胞克隆胚胎的发育率和质量，可以高效地体外生产山羊体细胞克隆胚胎，胚胎移植后的克隆山羊的出生率也显著提高。
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公开(公告)号：CN103820494B
公开(公告)日：2016-03-02
申请号：CN201410073055.5
申请日：2014-02-28
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种可去除随机整合的位点特异性整合载体及其构建方法和应用，包括pUC ori、attB序列和多克隆位点MCS，在attB序列上下游分别设有第一loxP序列和第一rox序列，CMV启动子连接在第一loxP序列的上游，负筛选基因与第一rox序列相连接，负筛选基因下游还连接有内核糖体结合位点IRES2，IRES2下游为荧光标记基因，荧光标记基因下游为MCS，MCS上下游分别设有第二rox序列和第二loxP序列，并且分别与第一rox序列和第一loxP序列方向相同，MCS下游为正筛选元件。本发明为在细胞筛选中提供剔除随机整合重组细胞而直接筛选出假attP位点特异整合的重组细胞的新的应用。
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公开(公告)号：CN104726495A
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201510131862.2
申请日：2015-03-25
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种基于TALEN介导的基因打靶敲除山羊BLG的载体及重组细胞。本发明根据山羊β-乳球蛋白基因，设计并构建了针对其第一外显子的TALEN真核表达载体以及含有较短同源臂的BLG基因敲除载体，与以TALEN表达载体为模板体外转录的mRNAs共同转染山羊胎儿成纤维细胞，经药物筛选及鉴定后得到β-乳球蛋白基因敲除细胞。本发明利用TALEN技术大大提高了基因打靶效率，同时较短同源臂的利用可以更方便高效的进行中靶细胞的筛选，mRNAs的利用则避免了TALEN表达载体在基因组中的随机整合。
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公开(公告)号：CN103820494A
公开(公告)日：2014-05-28
申请号：CN201410073055.5
申请日：2014-02-28
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种可去除随机整合的位点特异性整合载体及其构建方法和应用，包括pUC？ori、attB序列和多克隆位点MCS，在attB序列上下游分别设有第一loxP序列和第一rox序列，CMV启动子连接在第一loxP序列的上游，负筛选基因与第一rox序列相连接，负筛选基因下游还连接有内核糖体结合位点IRES2，IRES2下游为荧光标记基因，荧光标记基因下游为MCS，MCS上下游分别设有第二rox序列和第二loxP序列，并且分别与第一rox序列和第一loxP序列方向相同，MCS下游为正筛选元件。本发明为在细胞筛选中提供剔除随机整合重组细胞而直接筛选出假attP位点特异整合的重组细胞的新的应用。
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