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公开(公告)号：CN117264861A
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202311261190.8
申请日：2023-09-27
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及微生物基因工程技术领域，尤其涉及一株共表达多元纤维素酶基因的枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用。本发明涉及的枯草芽孢杆菌C6‑AEA3分类为Bacillus subtilis，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为中国武汉武汉大学，保藏日期为2023年8月31日，保藏编号为CCTCC NO:M 20231579。本发明得到的枯草芽孢杆菌C6‑AEA3具有高纤维素酶活性，能高效降解秸秆饲料中的纤维素，为农作物秸秆生物降解提供有效的菌种资源。
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公开(公告)号：CN116463238A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202211451060.6
申请日：2022-11-18
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一株可降解纤维素的枯草芽孢杆菌，具有耐酸耐高温特点。该枯草芽孢杆菌命名为Bacillus subtilis C6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 20221488。该菌内切葡聚糖酶、β‑葡萄糖苷酶、滤纸酶、木聚糖酶和PASC酶等酶活性分别为4.06、1.97、0.74、17.61和4.12U/mL。酶活反应表现出耐高温和耐酸特点，在70℃条件下，内切葡聚糖酶和木聚糖酶分别保留98％和73％的最高酶活性；在pH3.5条件下，内切葡聚糖酶保留84％的最高酶活性，在pH4.5条件下，木聚糖酶保留70％的最高酶活性。实验证明，该可降解纤维素的枯草芽孢杆菌能显著破坏小麦秸秆的纤维结构，分别降低小麦秸秆的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量5.8％和11.3％，纤维素结晶度降低3.3％，可用于生物降解农作物秸秆和生物发酵饲料生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113373237A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110446733.8
申请日：2021-04-25
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种利用qPCR技术检测绵羊FecB基因多态性的引物组及其方法。所述的引物组由引物对1和引物对2组成，其中，引物对1的下游引物3’端和++型的基因位点相匹配；引物对2的下游引物的3’端和BB型的基因位点相匹配。将待测样品分别用引物对1和引物对2进行qPCR扩增，扩增结束后根据两个荧光信号达到阈值的顺序即可判断出FecB基因型。该方法与传统的PCR‑Sanger测序及Taqman探针方法检测相比，节省检测成本、缩短检测周期和提高检测精准性。本发明提供的方法能快速有效地检测出绵羊FecB的BB基因型，为从大群体中筛选出产羔率更高的FecB的BB基因型亲本提供了一种简便易行、廉价有效的方法。
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公开(公告)号：CN105112350B
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201510571587.6
申请日：2015-09-06
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种罗伊乳酸杆菌无抗性标记基因整合体系的建立方法及其应用，利用点突变技术获得罗伊乳酸杆菌pheS基因的点突变基因pheSM，并将其与红霉素抗性基因构建整合框架LR‑pheSM‑em‑RR，电转化至L.reuteri XNY感受态细胞，红霉素筛选获得pheSM基因重组乳酸杆菌L.reuteri XNYM；然后，构建插入基因整合框架，再将其电转化至pheSM基因重组罗伊乳酸杆菌感受态细胞，利用对‑氯‑苯丙氨酸抗性筛选即可获得无抗性标记的重组乳酸杆菌。本发明不将抗性基因引入宿主菌基因组中，避免抗性基因的生物安全隐患以及对上下游基因的极性作用；利用该体系可对宿主菌进行多次基因定点整合。
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公开(公告)号：CN106957858A
公开(公告)日：2017-07-18
申请号：CN201610854587.1
申请日：2016-09-23
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/85 , A01K67/0276 , A01K2217/075 , A01K2227/103 , C12N2800/106 , C12N2800/80
Abstract: 本发明提供了一种利用CRISPR/Cas9系统共同敲除绵羊MSTN、ASIP、BCO2基因的方法。本发明首先获得针对绵羊MSTN第二外显子和第三外显子的sgRNA识别区的两段DNA序列、针对绵羊ASIP第五外显子的sgRNA识别区的两段DNA序列、针对绵羊BCO2第二外显子的sgRNA识别区的两段DNA序列，分别设计并和成相应的sgRNA寡核苷酸序列；接着分别构建针对绵羊MSTN第二外显子和第三外显子、针对绵羊ASIP第五外显子、针对绵羊BCO2第二外显子，且含T7启动子的saRNA体外转录载体；利用Cas9和sgRNA的体外转录载体通过体外转录获得Cas9 mRNA和sgRNA，通过受精卵注射可用于生产MSTN、ASIP、BCO2共同敲除的转基因绵羊。
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公开(公告)号：CN106636212A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611005082.4
申请日：2016-11-15
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/877 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/8772 , A01K67/0276 , A01K2217/075 , A01K2227/102 , A01K2267/02 , C07K14/47 , C12N2800/80
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统生产GDF9基因编辑山羊的方法。本发明首先获得针对山羊GDF9第二外显子的sgRNA识别区的DNA序列；其次设计靶向DNA序列的sgRNA，构建针对GDF9第二外显子且含T7启动子的sgRNA体外转录载体；最后设计合成ssODN，利用Cas9和sgRNA的体外转录载体获得Cas9 mRNA、sgRNA，通过受精卵注射体外转录载体获得的Cas9 mRNA、sgRNA和合成的ssODN，即可用于生产GDF9基因PV397I点突变的基因编辑山羊。
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