一种农杆菌介导的甘蓝型油菜遗传转化方法

    公开(公告)号:CN103966258B

    公开(公告)日:2016-05-18

    申请号:CN201410177616.6

    申请日:2014-04-29

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导的甘监型油菜遗传转化方法,包括以下步骤:取甘蓝型油菜幼苗的下胚轴,以下胚轴的下端为外植体进行预培养,诱导产生愈伤组织;利用携带目的基因的农杆菌侵染愈伤化的外植体,然后进行共培养;共培养后的外植体在含选择剂的分化培养基上诱导生成抗性不定芽;进行生根培养,获得抗性苗。本发明因以甘蓝型油菜下胚轴的下端为外植体,且使用了最适于甘蓝型油菜遗传转化的生长条件,特别是共培养基中的pH值和两种高低浓度草甘膦分化筛选方式,成功获得了抗草甘膦的转基因植株,并与现有技术相比具有更高的抗性苗分化率,建立了一个高效的抗草甘膦的甘蓝型油菜再生体系,为研究甘蓝型油菜农杆菌介导的转基因技术奠定基础。

    一种芸薹属异源六倍体的SSR分子标记方法及其引物

    公开(公告)号:CN104059971B

    公开(公告)日:2015-09-16

    申请号:CN201410258363.5

    申请日:2014-06-11

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种芸薹属异源六倍体的SSR分子标记方法及其引物。芸薹属异源六倍体的SSR分子标记方法包括:取芸薹属异源六倍体亲本进行杂交,对获得的子代进行小孢子培养,获得DH群体;提取芸薹属异源六倍体亲本及DH群体的基因组DNA,以各基因组DNA为模板,利用引物进行PCR扩增;根据PCR扩增结果构建芸薹属异源六倍体的遗传图谱;所述引物包括217对,其碱基序列分别如SEQ ID No.1/2~433/434所示本发明构建了第一个芸薹属异源六倍体的遗传图谱,为进一步进行QTL定位以及分子标记辅助育种提供依据。

    一种农杆菌介导的甘蓝型油菜遗传转化方法

    公开(公告)号:CN103966258A

    公开(公告)日:2014-08-06

    申请号:CN201410177616.6

    申请日:2014-04-29

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导的甘监型油菜遗传转化方法,包括以下步骤:取甘蓝型油菜幼苗的下胚轴,以下胚轴的下端为外植体进行预培养,诱导产生愈伤组织;利用携带目的基因的农杆菌侵染愈伤化的外植体,然后进行共培养;共培养后的外植体在含选择剂的分化培养基上诱导生成抗性不定芽;进行生根培养,获得抗性苗。本发明因以甘蓝型油菜下胚轴的下端为外植体,且使用了最适于甘蓝型油菜遗传转化的生长条件,特别是共培养基中的pH值和两种高低浓度草甘膦分化筛选方式,成功获得了抗草甘膦的转基因植株,并与现有技术相比具有更高的抗性苗分化率,建立了一个高效的抗草甘膦的甘蓝型油菜再生体系,为研究甘蓝型油菜农杆菌介导的转基因技术奠定基础。

    一种利用PEG作为渗透调节剂的小孢子培养方法

    公开(公告)号:CN102524070B

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN201110460151.1

    申请日:2011-12-31

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用PEG作为渗透调节剂的小孢子培养方法,包括:取甘蓝型油菜的花序作为小孢子培养的供体植株,取供体植株上的花蕾,灭菌后加入NLN-13液体培养基,制成悬浮液,过滤所得滤液经离心得到沉淀;依次加入含PEG6000的NLN液体培养基、秋水仙碱溶液和活性炭混合液,得到小孢子悬浮液;经热激处理或直接培养,得到子叶期胚状体;接种至分化培养基中直至分化,再生成芽;切取再生芽接种至生根培养基上生根培养,经炼苗和移栽,得到再生植株;取再生植株的嫩叶检测各再生植株倍性。该方法得到的小孢子质量、再生率和加倍率都得到了很大的提高。

    一种青花菜小孢子再生植株的培养方法

    公开(公告)号:CN102239803B

    公开(公告)日:2012-11-07

    申请号:CN201110112536.9

    申请日:2011-05-03

    Abstract: 本发明公开了一种青花菜小孢子再生植株的培养方法,包括:取青花菜和油菜的花序,直接或诱导后取花序上的花蕾,灭菌后加入NLN-13诱导培养基,制成悬浮液,过滤所得滤液经离心得到沉淀;依次加入NLN-13诱导培养基和活性炭混合液,得到小孢子悬浮液;经热激处理后培养,得到子叶期胚状体;接种至胚状体分化培养基中直至分化,再生成芽;切取再生芽接种至生根培养基上生根培养,经炼苗和移栽,得到再生植株;取再生植株的嫩叶检测各再生植株倍性,并从再生植株群体中鉴定出油菜再生苗和青花菜再生苗。该方法将易出胚的油菜与难出胚的青花菜品种混合培养,以易出胚的材料带动难出胚的材料出胚,提高青花菜的出胚率。

    一种羽衣甘蓝小孢子再生植株的培养方法

    公开(公告)号:CN102228003B

    公开(公告)日:2012-11-07

    申请号:CN201110112693.X

    申请日:2011-05-03

    Abstract: 本发明公开了一种羽衣甘蓝小孢子再生植株的培养方法,包括:取羽衣甘蓝和油菜的花序,直接或诱导后取花序上的花蕾,灭菌后加入NLN-13诱导培养基,制成悬浮液,过滤所得滤液经离心得到沉淀;依次加入NLN-13诱导培养基和活性炭混合液,得到小孢子悬浮液;经热激处理后培养,得到子叶期胚状体;接种至胚状体分化培养基中直至分化,再生成芽;切取再生芽接种至生根培养基上生根培养,经炼苗和移栽,得到再生植株;取再生植株的嫩叶检测各再生植株倍性,并从再生植株群体中鉴定出油菜再生苗和羽衣甘蓝再生苗。该方法将易出胚的油菜与难出胚的羽衣甘蓝品种混合培养,以易出胚的材料带动难出胚的材料出胚,提高羽衣甘蓝的出胚率。

    一种青花菜小孢子再生植株的培养方法

    公开(公告)号:CN102239803A

    公开(公告)日:2011-11-16

    申请号:CN201110112536.9

    申请日:2011-05-03

    Abstract: 本发明公开了一种青花菜小孢子再生植株的培养方法,包括:取青花菜和油菜的花序,直接或诱导后取花序上的花蕾,灭菌后加入NLN-13诱导培养基,制成悬浮液,过滤所得滤液经离心得到沉淀;依次加入NLN-13诱导培养基和活性炭混合液,得到小孢子悬浮液;经热激处理后培养,得到子叶期胚状体;接种至胚状体分化培养基中直至分化,再生成芽;切取再生芽接种至生根培养基上生根培养,经炼苗和移栽,得到再生植株;取再生植株的嫩叶检测各再生植株倍性,并从再生植株群体中鉴定出油菜再生苗和青花菜再生苗。该方法将易出胚的油菜与难出胚的青花菜品种混合培养,以易出胚的材料带动难出胚的材料出胚,提高青花菜的出胚率。

    一种蔺草的离体组织培养方法

    公开(公告)号:CN101569288B

    公开(公告)日:2011-03-30

    申请号:CN200910099340.3

    申请日:2009-06-08

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种蔺草的离体组织培养方法,包括:取无菌外植体,接种在愈伤培养基中诱导出愈伤组织,在于愈伤扩繁培养基中扩繁,先将扩繁得到的愈伤组织接种在分化培养基I的培养基中,然后转移到分化培养基II中再生,将再生植株转移到再生扩繁培养基中扩繁,扩繁后转移到1/2MS生根培养基诱导生根。本发明蔺草的离体组织培养方法,采用二步法对培养基进行更新,以及合适剂量的激素,如合适剂量的BA、生长素(IAA)和细胞分裂素(BA+KT),实现了蔺草离体组织培养中植株的高效再生,该方法操作简单、易于控制植株再生成功率高,为蔺草品种改良和生物技术育种奠定了良好的基础。

    一种用于油菜苗期的水培装置

    公开(公告)号:CN219741470U

    公开(公告)日:2023-09-26

    申请号:CN202320655067.3

    申请日:2023-03-29

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本实用新型属于油菜水培箱技术领域,尤其为一种用于油菜苗期的水培装置,包括用于放置水培营养液的水培箱组件,所述水培箱组件的顶部卡合连接有用于放置油菜幼苗的栽培组件,所述栽培组件包括用于对油菜幼苗进行固定的顶层栽培限位纱布、对油菜幼苗位置进行限位的底层栽培限位纱布、四组起到连接作用的伸缩连接壁;能够为油菜幼苗提供发芽期与苗期成长一体式的水培箱,从而能够避免发芽期油菜苗在发芽过程中经因掀盖不及时,茎部生长过快,导致的不利于移苗的问题,同时,能够使得在幼苗脱离发芽期进入苗期的过程中,通过对菱形伸缩架牵引的方式完成两个相邻的苗期油菜之间的间距调整,为油菜在生长的不同阶段均可提供充足的生长空间。

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