一种农杆菌介导的甘蓝型油菜遗传转化方法

    公开(公告)号:CN103966258B

    公开(公告)日:2016-05-18

    申请号:CN201410177616.6

    申请日:2014-04-29

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导的甘监型油菜遗传转化方法,包括以下步骤:取甘蓝型油菜幼苗的下胚轴,以下胚轴的下端为外植体进行预培养,诱导产生愈伤组织;利用携带目的基因的农杆菌侵染愈伤化的外植体,然后进行共培养;共培养后的外植体在含选择剂的分化培养基上诱导生成抗性不定芽;进行生根培养,获得抗性苗。本发明因以甘蓝型油菜下胚轴的下端为外植体,且使用了最适于甘蓝型油菜遗传转化的生长条件,特别是共培养基中的pH值和两种高低浓度草甘膦分化筛选方式,成功获得了抗草甘膦的转基因植株,并与现有技术相比具有更高的抗性苗分化率,建立了一个高效的抗草甘膦的甘蓝型油菜再生体系,为研究甘蓝型油菜农杆菌介导的转基因技术奠定基础。

    一种农杆菌介导的甘蓝型油菜遗传转化方法

    公开(公告)号:CN103966258A

    公开(公告)日:2014-08-06

    申请号:CN201410177616.6

    申请日:2014-04-29

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导的甘监型油菜遗传转化方法,包括以下步骤:取甘蓝型油菜幼苗的下胚轴,以下胚轴的下端为外植体进行预培养,诱导产生愈伤组织;利用携带目的基因的农杆菌侵染愈伤化的外植体,然后进行共培养;共培养后的外植体在含选择剂的分化培养基上诱导生成抗性不定芽;进行生根培养,获得抗性苗。本发明因以甘蓝型油菜下胚轴的下端为外植体,且使用了最适于甘蓝型油菜遗传转化的生长条件,特别是共培养基中的pH值和两种高低浓度草甘膦分化筛选方式,成功获得了抗草甘膦的转基因植株,并与现有技术相比具有更高的抗性苗分化率,建立了一个高效的抗草甘膦的甘蓝型油菜再生体系,为研究甘蓝型油菜农杆菌介导的转基因技术奠定基础。

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