一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法

    公开(公告)号:CN110196219A

    公开(公告)日:2019-09-03

    申请号:CN201910405117.0

    申请日:2019-05-16

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法,包括如下步骤:(1)细菌培养,所述的细菌为鸡白痢沙门菌S06004和S06004ΔspiC;(2)鸡的免疫及采样;(3)靶细胞—巨噬细胞的制备;(4)效应细胞—鸡脾脏CD8+T细胞的制备:包括鸡脾脏淋巴细胞悬液的制备步骤和磁珠分选鸡脾脏CD8+T细胞的步骤;(5)CTL特异性杀伤巨噬细胞。相对于现有技术,本发明具有如下有益效果:本发明贴壁获得的巨噬细胞(靶细胞)纯度较高,且鸡脾脏CD8+T细胞分选效果明显,分离时间短;以沙门菌宿主细胞—巨噬细胞作为靶细胞,可更精确反映宿主对沙门菌的清除能力;将流式细胞术用于鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用,可在单细胞水平检测鸡脾脏CD8+T细胞的CTL效应。

    一株广谱高效的沙门菌噬菌体及其应用

    公开(公告)号:CN118374459A

    公开(公告)日:2024-07-23

    申请号:CN202410535980.9

    申请日:2024-04-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一株广谱沙门菌噬菌体(Salmonella sp.phage)YZ26及其应用,所述噬菌体分离于扬州屠宰场猪粪便中,该噬菌体可裂解鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、鸡白痢沙门菌、印第安纳沙门菌、山夫顿堡沙门菌等多种血清型沙门菌,以及志贺菌、大肠杆菌等非沙门菌。该噬菌体能有效抑制鼠伤寒沙门菌的增殖。同时,该噬菌体在pH2~13和30~70℃条件下能保持较好的稳定性。通过噬菌体全基因组序列分析发现,该噬菌体YZ26基因组全长47548bp,不携带任何毒力或抗生素耐药基因,可以安全地应用于食品中沙门菌的防控。

    一种快速鉴定和定量肠炎沙门菌的探针法双重荧光定量PCR引物组及试剂盒

    公开(公告)号:CN113755617A

    公开(公告)日:2021-12-07

    申请号:CN202111204657.6

    申请日:2021-10-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术检测领域,具体涉及一种快速鉴定和定量肠炎沙门菌的探针法双重荧光定量PCR引物组及试剂盒,所述PCR引物组中包括用于分别检测lygD基因和invA基因的引物对,进一步的,所述PCR引物组中包括1)第一引物对:包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的上游引物与核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的下游引物;2)第一探针引物:核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;3)第二引物对:包括核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示的上游引物与核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示的下游引物;4)第二探针引物:核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。所述试剂盒中包括所述引物组。本发明的试剂盒能快速高通量鉴定和定量肠炎沙门菌,可替代传统沙门菌血清学分型和生化鉴定等复杂程序。

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