一种鉴别滑液囊支原体野毒株与疫苗株MS-H的实时荧光定量PCR试剂盒

    公开(公告)号:CN110699469A

    公开(公告)日:2020-01-17

    申请号:CN201911071771.9

    申请日:2019-11-05

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种区分滑液囊支原体野毒株和疫苗株MS-H的实时荧光定量PCR试剂盒,试剂盒含有:序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示的PCR引物,序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的探针,所述探针的5’端分别标记有FAM和VIC报告基团,3’端均标记有MGB荧光淬灭基团。经过体外实验证明本发明的试剂盒敏感性高、特异型强、重复性好,能准确区分MS温度敏感型疫苗株(MS-H株)和MS野毒株,既可用于对已经经过分离培养并纯化的MS分离株进行鉴别,也可用于免疫鸡群MS-H疫苗株在鸡体内的复制效率评估与野毒感染的监测。

    猪德尔塔冠状病毒N蛋白的双抗体夹心ELISA抗原检测试剂盒

    公开(公告)号:CN110361542A

    公开(公告)日:2019-10-22

    申请号:CN201910674711.X

    申请日:2019-07-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术检测领域,具体涉及一种针对猪德尔塔冠状病毒N蛋白的双抗体夹心ELISA抗原检测试剂盒。该试剂盒包被有单克隆抗体PDCoV-N-1A2的酶标板、阳性和阴性对照、HRP标记的检测抗体PDCoV-N-5C5、样品稀释液、显色液以及洗涤液。其中所述抗体PDCoV-N-1A2和PDCoV-N-5C5分别由杂交瘤细胞株PDCoV-N-1A2和PDCoV-N-1A2分泌。本发明的试剂盒以1A2为捕获抗体、以杂交5C5(HRP偶联)为检测抗体建立的双抗体夹心ELSIA方法可特异性的检测PDCoV N蛋白,为PDCoV感染的临床诊断和流行病学调查提供了一种新的检测手段。

    一种热稳定的基因VIII型新城疫弱毒株外源基因表达载体

    公开(公告)号:CN109295095A

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201811244137.6

    申请日:2018-10-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及兽医病毒分子生物学领域,公开了一种热稳定的基因Ⅷ型新城疫弱毒株外源基因表达载体,所述表达载体是新城疫病毒NDV-rAHR09-GFP-1,它的保藏号为CCTCC NO:V201844。研究表明,NDV-rAHR09-GFP-1在自然条件下具有良好的热稳定性,56℃、90min仍保持血凝活性和感染能力,能稳定表达GFP基因。

    用于鉴别不同血清型传染性支气管炎病毒活疫苗的半套式RT-PCR分型引物及试剂盒

    公开(公告)号:CN108866242A

    公开(公告)日:2018-11-23

    申请号:CN201810972679.9

    申请日:2018-08-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,具体涉及鸡传染性支气管炎病毒活疫苗的RT‑PCR分型检测引物及试剂盒。本发明所述的分型检测引物由序列如SEQ ID NO.1-2所示的通用引物和序列如SEQ ID NO.3-6所示的血清型特异性引物组成。本发明还公开了包含上述分型检测引物的试剂盒。利用本发明的引物和试剂盒,采用半套式RT‑PCR方法鉴别M型、4/91型、LDT3‑A型和QX型血清型传染性支气管炎病毒活疫苗,与常规PCR方法相比,具有更强的特异性和敏感性;还具有快速、高效、低成本的特点,可在5~6h内完成样品的检测,克服了传统血清中和试验的方法耗时较长的缺点,且该方法适合大批量样品的检测与分析。

    禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV-HA病毒株及构建方法

    公开(公告)号:CN101575616B

    公开(公告)日:2011-08-31

    申请号:CN200710133953.5

    申请日:2007-10-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及家禽用禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV-HA病毒株及构建方法。本发明采用反转录-聚合酶链反应或聚合酶链反应扩增H5亚型禽流感病毒SY株血凝素基因、网状内皮增生症病毒LTR、筛选标志基因lac/smGFP和马立克氏病毒Rispens CVI 988疫苗株基因组外源基因并将其克隆到质粒载体中,得到重组质粒pHA、pLTR、ploxP-lac/smGFP-loxP、pUP和pDOWN,将转移载体pMHA质粒DNA与从马立克氏病毒Rispens CVI 988疫苗株感染细胞提取的DNA共转染鸡胚成纤维细胞,同源重组将外源基因插入到马立克氏病毒RispensCVI 988疫苗株基因组,得到带筛选标志基因的重组病毒rMDV-HA/GFP;由cre酶介导的loxP位点间序列重组去除rMDV-HA/GFP的筛选标志基因lac/smGFP,纯化后得到rMDV-HA病毒株。成本低、无污染、免疫期长,可作为禽流感和马立克氏病二联活疫苗病毒株。

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