副鸡禽杆菌MLST分子分型的引物组及其应用

    公开(公告)号:CN117126952A

    公开(公告)日:2023-11-28

    申请号:CN202311067003.2

    申请日:2023-08-23

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于微生物分型技术领域,提供了一种副鸡禽杆菌MLST分子分型的引物组及其应用,首次建立了使用多位点序列分型系统(MLST)对副鸡禽杆菌进行分子分型的操作技术。本发明通过7个管家基因筛选、扩增、检测与测序,采用SnapGene软件对测序结果进行多序列比对与分析,获得菌株序列型(ST),绘制系统发育树和聚类分析。本分型技术所使用的7个管家基因组合、扩增引物均为首次采用,PCR反应体系和条件为自行优化。该技术流程可以用于副鸡禽杆菌MLST分型,揭示副鸡禽杆菌菌株间等位基因的多样性、溯源和流行病学监测。

    一种鉴别滑液囊支原体野毒株与疫苗株MS-H的实时荧光定量PCR试剂盒

    公开(公告)号:CN110699469B

    公开(公告)日:2022-08-09

    申请号:CN201911071771.9

    申请日:2019-11-05

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种区分滑液囊支原体野毒株和疫苗株MS‑H的实时荧光定量PCR试剂盒,试剂盒含有:序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示的PCR引物,序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的探针,所述探针的5’端分别标记有FAM和VIC报告基团,3’端均标记有MGB荧光淬灭基团。经过体外实验证明本发明的试剂盒敏感性高、特异型强、重复性好,能准确区分MS温度敏感型疫苗株(MS‑H株)和MS野毒株,既可用于对已经经过分离培养并纯化的MS分离株进行鉴别,也可用于免疫鸡群MS‑H疫苗株在鸡体内的复制效率评估与野毒感染的监测。

    一种副鸡禽杆菌的致弱突变株及其构建方法和应用及疫苗

    公开(公告)号:CN117736952A

    公开(公告)日:2024-03-22

    申请号:CN202311642681.7

    申请日:2023-12-04

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种副鸡禽杆菌的致弱突变株及其构建方法和应用及疫苗,其中,副鸡禽杆菌的致弱突变株命名为2016/HB64‑TB76,保藏编号为CCTCC NO:M 2023607。其构建方法包括以下步骤:将转座子Tn5‑kan与EZ‑Tn5转座酶配置成Tn5转座体;构建转座子Tn5随机突变库;对转座子Tn5随机突变库中的菌株进行生物被膜形成能力测定,筛选出生物被膜形成能力显著下降的突变株。本发明所获得的突变株的ApaH基因由于转座子Tn5的插入而导致失活,对血清A型副鸡禽杆菌具有80%的免疫保护率,可以作为副鸡禽杆菌减毒活疫苗的候选株,用于传染性鼻炎的防控。

    一种鉴别滑液囊支原体野毒株与疫苗株MS-H的实时荧光定量PCR试剂盒

    公开(公告)号:CN110699469A

    公开(公告)日:2020-01-17

    申请号:CN201911071771.9

    申请日:2019-11-05

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种区分滑液囊支原体野毒株和疫苗株MS-H的实时荧光定量PCR试剂盒,试剂盒含有:序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示的PCR引物,序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的探针,所述探针的5’端分别标记有FAM和VIC报告基团,3’端均标记有MGB荧光淬灭基团。经过体外实验证明本发明的试剂盒敏感性高、特异型强、重复性好,能准确区分MS温度敏感型疫苗株(MS-H株)和MS野毒株,既可用于对已经经过分离培养并纯化的MS分离株进行鉴别,也可用于免疫鸡群MS-H疫苗株在鸡体内的复制效率评估与野毒感染的监测。

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