一种F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒及其制备方法

    公开(公告)号:CN113005101A

    公开(公告)日:2021-06-22

    申请号:CN202110332197.9

    申请日:2021-03-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒及其制备方法,其载体骨架为野生型血清4型禽腺病毒SD株;本发明所述的一种基于CRISPR‑Cas9技术的F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒的构建及其应用,选择当下流行的血清4型禽腺病毒作为骨架,通过银染、质谱和免疫共沉淀等技术发现并鉴定FAdV‑4中F2基因与宿主蛋白互作的功能区,随后将功能区删除后成功获得了F2部分缺失型重组FAdV‑4病毒,在体内及体外实验结果均显示,FA4‑Del重组病毒毒力显著降低,能够为SPF鸡提供很好的免疫保护。

    一种检测鹅星状病毒抗体的ELISA试剂盒及制备方法

    公开(公告)号:CN108802382B

    公开(公告)日:2021-04-06

    申请号:CN201810641006.5

    申请日:2018-06-21

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种检测鹅星状病毒抗体的ELISA试剂盒及制备方法,包括酶标板、酶标二抗、鹅星状病毒阳性对照血清、鹅星状病毒阴性对照血清、稀释液、10×洗涤液、TMB底物溶液、终止液;该试剂盒中包被酶标板的抗原为鹅星状病毒Cap蛋白;鹅星状病毒为禽星状病毒3型。本发明以表达纯化新发生的鹅星状病毒(禽星状病毒3型)Cap蛋白为包被抗原,利用间接ELISA方法检测待检鹅血清样品,并组装成用于测定血清中星状病毒抗体的试剂盒。该试剂盒可用于近来发生鹅星状病毒感染血清学诊断以及抗体的水平的监测、流行病学调查等,为鹅星状病毒防制提供一种简便、快捷的方法。

    一种山羊痘病毒p32可溶性蛋白的制备方法

    公开(公告)号:CN109957575A

    公开(公告)日:2019-07-02

    申请号:CN201910278888.8

    申请日:2019-04-09

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种山羊痘病毒p32可溶性蛋白的制备方法,利用双酶切获得pGEX‑6p‑1线性化载体以及通过设计扩增山羊痘病毒p32基因片段的引物,利用T4连接酶连接,直接在体外快速重组,获得重组质粒pGEX‑6p‑1‑P32,并将其转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达、实现山羊痘病毒的p32蛋白与GST的融合可溶性表达,并获得纯化的可溶性蛋白GST‑P32;本发明设计的引物及基于T4连接酶的克隆策略,可快速构建山羊痘病毒p32基因的原核可溶性表达载体。本发明获得的山羊痘病毒p32可溶性表达及纯化的蛋白,可直接提供p32可溶性蛋白作为山羊痘病毒诊断抗原;作为免疫原获得抗p32蛋白多克隆抗体;为开展山羊痘病毒流行病学调查提供有效诊断试剂;并为进一步探究p32蛋白的生物学功能具有重要意义。

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