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公开(公告)号:CN117825704A
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202410020201.1
申请日:2024-01-07
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/535 , C07K14/075 , C12N15/70 , C12N5/20 , C12N15/34 , C07K16/08
Abstract: 本发明涉及一种基于Fiber‑2蛋白和抗Fiber‑2蛋白单克隆抗体的检测鸭3型腺病毒抗体的竞争ELISA方法,首次使用单克隆抗体进行鸭3型腺病毒抗体的检测,与间接ELISA技术相比,本发明的特异性高,能够有效提高检测的准确性,且不依赖于商品化的酶标二抗,可以应用于不同物种(鸡、鸭和鹅)血清中鸭3型腺病毒抗体检测,是一种简便、快速、稳定、特异的检测鸭3型腺病毒抗体的ELISA方法。使用本发明只需采集鸭群的血清,即可快速准确地检测血清中是否含有鸭3型腺病毒抗体,本发明适合应用于基层鸭群的大批量检测。本发明为鸭3型腺病毒的感染检测以及免疫效果监测提供了技术支持,具有一定的市场应用价值。
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公开(公告)号:CN113981137B
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202110084845.3
申请日:2021-01-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用。所述荧光定量PCR试剂盒中含有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物,荧光定量PCR反应试剂,以及标准品和和对照品。本发明的荧光定量PCR试剂盒可以对非洲猪瘟病毒进行检测,该试剂盒的特异性强,只与非洲猪瘟病毒特异性结合,与其他猪源病毒没有交叉反应;而且检测的灵敏度高,在标准品为1×101~1×108拷贝范围内都有极好的线性关系,可以高效检测非洲猪瘟病毒病猪棉拭子以及无临床症状的病毒携带猪,提高了检测效率。
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公开(公告)号:CN110483637B
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN201910659588.4
申请日:2019-07-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C07K16/40 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/16 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体、编码基因及其应用,属于生物医学技术领域。抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体特异性地识别禽流感病毒神经氨酸酶蛋白N2,具有抑制神经氨酸酶活性和中和病毒能力。本发明还克隆了抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体的轻、重链可变区基因序列和氨基酸序列,确认了基因序列和氨基酸序列的唯一性。本发明涉及的单克隆抗体、可变区基因及氨基酸序列可用于N2的禽流感病毒的诊断和治疗药物研发等,具有广泛的临床应用价值。
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公开(公告)号:CN114134124A
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202111318523.7
申请日:2021-11-09
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/45 , C12N15/44 , C12N15/40 , C12N15/869 , A61K39/12 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供一种重组火鸡疱疹病毒及其制备方法和应用,具体提供了一种重组火鸡疱疹病毒,在火鸡疱疹病毒基因组的HVT005区和HVT006区之间的间隔区中插入外源基因,所述外源基因选自来自鸡新城疫病毒、禽流感病毒或禽传染性囊病病毒的基因;所述火鸡疱疹病毒基因组的HVT005区和HVT006区之间的间隔区为火鸡疱疹基因组的8867nt‑9319nt之间,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明首次发现HVT005‑HVT006间隔区可作HVT外源基因插入的位点。利用CRISPR/Cas9技术在HVT基因组HVT005‑HVT006间隔区插入外源基因,可作为鸡新城疫预防和禽流感预防的疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN113214365A
公开(公告)日:2021-08-06
申请号:CN202110516677.0
申请日:2021-05-12
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种基于多肽的检测鸡传染性贫血病病毒抗体的ELISA试剂盒,一种基于CIAV经典毒株CUX‑1中的VP1序列,利用PROTEAN软件分析,选取同源性、抗原性和亲水性较高的一段多肽序列,前端加保护性氨基酸C进行多肽抗原合成,其氨基酸序列为CRLRRRYKFRHRRRQRYRRRAF。一种基于CIAV‑VP1一段多肽的检测鸡传染性贫血病病毒抗体的间接ELISA试剂盒,所述试剂盒由特异性抗原多肽中的一段多肽片段的酶标板。通过本发明,所提供的抗原多肽反应性较好。
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公开(公告)号:CN113005101A
公开(公告)日:2021-06-22
申请号:CN202110332197.9
申请日:2021-03-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒及其制备方法,其载体骨架为野生型血清4型禽腺病毒SD株;本发明所述的一种基于CRISPR‑Cas9技术的F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒的构建及其应用,选择当下流行的血清4型禽腺病毒作为骨架,通过银染、质谱和免疫共沉淀等技术发现并鉴定FAdV‑4中F2基因与宿主蛋白互作的功能区,随后将功能区删除后成功获得了F2部分缺失型重组FAdV‑4病毒,在体内及体外实验结果均显示,FA4‑Del重组病毒毒力显著降低,能够为SPF鸡提供很好的免疫保护。
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公开(公告)号:CN112048006B
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN202010937821.3
申请日:2020-09-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种IBV特异性中和表位抗原多肽,所述多肽为环状多肽,所述多肽的氨基酸序列为CSCPYVSYGRFCIQPDGSIKQC。本发明还公开了一种IBV特异性抗体及其制备方法。本发明还公开了一种替代中和效力测定的ELISA方法。本发明还公开了一种ELISA检测试剂盒,本发明应用建立的pELISA方法检测IBV抗体,并发现其与抗IBV中和抗体呈正相关,本发明可以用于IBV疫苗免疫效果的评价,IBV感染鸡的抗体水平测定,从而有益于鸡群健康管理等。
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公开(公告)号:CN108802382B
公开(公告)日:2021-04-06
申请号:CN201810641006.5
申请日:2018-06-21
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/535
Abstract: 本发明涉及一种检测鹅星状病毒抗体的ELISA试剂盒及制备方法,包括酶标板、酶标二抗、鹅星状病毒阳性对照血清、鹅星状病毒阴性对照血清、稀释液、10×洗涤液、TMB底物溶液、终止液;该试剂盒中包被酶标板的抗原为鹅星状病毒Cap蛋白;鹅星状病毒为禽星状病毒3型。本发明以表达纯化新发生的鹅星状病毒(禽星状病毒3型)Cap蛋白为包被抗原,利用间接ELISA方法检测待检鹅血清样品,并组装成用于测定血清中星状病毒抗体的试剂盒。该试剂盒可用于近来发生鹅星状病毒感染血清学诊断以及抗体的水平的监测、流行病学调查等,为鹅星状病毒防制提供一种简便、快捷的方法。
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公开(公告)号:CN108752434B
公开(公告)日:2020-07-21
申请号:CN201810724849.1
申请日:2018-07-04
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/075 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种抗原多肽,属于生物技术检测技术领域。本发明提供的抗原多肽能够检测血清中的非结构蛋白22K抗体,进而能够检测FAdV‑4病毒感染,而且能够区别自然感染以及灭活疫苗免疫鸡群。
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公开(公告)号:CN109957575A
公开(公告)日:2019-07-02
申请号:CN201910278888.8
申请日:2019-04-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种山羊痘病毒p32可溶性蛋白的制备方法,利用双酶切获得pGEX‑6p‑1线性化载体以及通过设计扩增山羊痘病毒p32基因片段的引物,利用T4连接酶连接,直接在体外快速重组,获得重组质粒pGEX‑6p‑1‑P32,并将其转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达、实现山羊痘病毒的p32蛋白与GST的融合可溶性表达,并获得纯化的可溶性蛋白GST‑P32;本发明设计的引物及基于T4连接酶的克隆策略,可快速构建山羊痘病毒p32基因的原核可溶性表达载体。本发明获得的山羊痘病毒p32可溶性表达及纯化的蛋白,可直接提供p32可溶性蛋白作为山羊痘病毒诊断抗原;作为免疫原获得抗p32蛋白多克隆抗体;为开展山羊痘病毒流行病学调查提供有效诊断试剂;并为进一步探究p32蛋白的生物学功能具有重要意义。
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