一种副鸡嗜血杆菌荧光定量PCR检测方法

    公开(公告)号:CN105002284A

    公开(公告)日:2015-10-28

    申请号:CN201510459748.2

    申请日:2015-07-30

    CPC classification number: C12Q1/6851 C12Q2563/107 C12Q2545/114

    Abstract: 本发明公开了一种副鸡嗜血杆菌荧光定量PCR检测方法,选取具有高度特异性和保守性的hagA基因作为扩增靶基因,以SYBR Green I荧光染料为检测目标,通过荧光定量PCR反应条件的不断优化以及标准品的制备和标准曲线的建立,建立了SYBR Green I荧光染料与DNA嵌合的副鸡嗜血杆菌荧光定量PCR检测方法,可对副鸡嗜血杆菌hagA基因模板的DNA进行准确定量。本发明的方法具有特异性强、敏感性高、操作简单、检测快速、定量准确等优点,可用于副鸡嗜血杆菌的临床快速诊断,以及副鸡嗜血杆菌感染程度的定量分析,适合推广应用。

    一种含有益生菌的肉鸡用饲料添加剂

    公开(公告)号:CN103719592B

    公开(公告)日:2015-10-21

    申请号:CN201310681101.5

    申请日:2013-12-12

    Abstract: 本发明提供一种含有益生菌的肉鸡用饲料添加剂,包括益生菌发酵中草药混合物,以及苜蓿草、螺旋藻粉、磷酸氢钙、氨茶碱、氯化胆碱、赖氨酸、蛋氨酸、预混料,通过益生菌发酵中草药,能够把中草药中的有效成分充分提取出来,让肉鸡吸收起来更加容易,并且增强了饲料的口感,具有抗菌消炎、化痰止咳、提高免疫力的作用,不会影响肉鸡食欲,可保证肉鸡正常生长。

    樱桃谷鸭胚上皮细胞系及其建立方法

    公开(公告)号:CN103725644A

    公开(公告)日:2014-04-16

    申请号:CN201310334797.4

    申请日:2013-08-02

    Inventor: 王文秀 沈志强

    Abstract: 本发明“樱桃谷鸭胚上皮细胞系及其建立方法”属于细胞生物学领域。建立方法是无菌取9-12日龄的鸭胚组织,剪成组织块后,将其向下贴于培养孔的底部,然后加入培养液在二氧化碳培养箱中、37℃下进行贴板培养。本发明基于该方法得出了一株高活率、高纯度的樱桃谷鸭胚上皮细胞系株并进行了生物保藏,该细胞系与原代细胞相比,细胞形态以生理特性有明显差异,可以连续稳定传代,营养要求低,生长周期短,适合大规模培养为基因工程、细胞工程、免疫学和分子生物学等生命科学研究提供大量高品质的细胞材料;也可作为家禽体细胞克隆育种的供体细胞;还可作为鸭病毒分离和疫苗生产的主要原材料。

    一种猪细小病毒LAMP快速检测引物、检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN102808038A

    公开(公告)日:2012-12-05

    申请号:CN201110142726.5

    申请日:2011-05-30

    Inventor: 沈志强 曲光刚

    Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测猪细小病毒的检测试剂盒及检测方法。本发明含有10×Lamp buffer、Bst DNA聚合酶8U/μl、10mM dNTP、20-50μM内引物1、20-50μM内引物2、3-6μM外引物1、3-6μM外引物2、15-25μM LooP引物1、15-25μM LooP引物2和5M甜菜碱的反应液A和反应液B:1000×SYBR Green I。通过对照组织样品中DNA的提取、猪细小病毒的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测,从而检测出猪细小病毒。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、仪器昂贵和操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单,反应时间仅为43min,更加有利于推广和现场快速检测。

    一种B型猪肠道病毒及其应用

    公开(公告)号:CN110699328B

    公开(公告)日:2022-07-19

    申请号:CN201910772848.9

    申请日:2019-08-21

    Abstract: 本发明涉及微生物病毒领域,具体的说是一种B型猪肠道病毒及其应用,所述B型猪肠道病毒Porcine enterovirus B,PEV‑B,保藏号为:CGMCC No.10405,命名为Ch‑SDbz‑W2Y以及B型猪肠道病毒在卵黄抗体中的应用,B型猪肠道病毒Porcine enterovirus B,PEV‑B基因组全长序列7382bp,其中包含5'端的非编码区为812bp、3'端的非编码区为72bp;本发明提供的一种B型猪肠道病毒,经过筛选、分离的一株新猪源肠道病毒,该分离株的分离筛选为猪源肠道病毒的全基因组变异、重组监测提供生物信息,利用该毒株制备动物免疫血清,为蛋白变异提供新的生物信息,为后续猪源肠道病毒的研究提供依据,对后续的PEV‑B的遗传进化信息研究奠定基础,对掌握猪肠道病毒的重组、溯源,丰富病毒库具有重大意义。

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