一种基于大肠杆菌表达系统的重组pBpp蛋白制备方法

    公开(公告)号:CN106893733A

    公开(公告)日:2017-06-27

    申请号:CN201710138073.0

    申请日:2017-03-09

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: C12N15/70 C07K14/461

    Abstract: 本发明提供了一种基于大肠杆菌表达系统的重组pBpp蛋白制备方法,该技术方案以斑马鱼粪便菌群DNA为模板,扩增得到pBpp表达基因,再利用pET28c质粒为载体,先于大肠杆菌TOP10中扩增质粒,而后转化入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达。在此基础上,本发明针对重组菌株的特性设计了适宜的蛋白表达及诱导条件,对于胞内表达的pBpp蛋白,本发明对菌体进行超声破碎后,先利用镍珠结合游离的蛋白,再进行蛋白洗脱,最后分别利用PBS和甘油进行透析,从而实现了pBpp蛋白的有效纯化。实验发现,本发明所制备的pBpp蛋白可确切诱导胰腺中β细胞的增殖,从而对因胰岛β细胞损伤所导致的糖尿病起到治疗效果。

    一种呼吸道合胞病毒单克隆抗体制备的方法

    公开(公告)号:CN106676113A

    公开(公告)日:2017-05-17

    申请号:CN201710086771.0

    申请日:2017-02-17

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 本发明提供了一种呼吸道合胞病毒单克隆抗体制备方法,该技术方案从近期感染呼吸道合胞病毒又康复者的外周血分离记忆性B细胞,进一步确定表达抗体的重链可变区和轻链可变区基因,利用鼠伤寒感受态细胞VNP20009直接转染293T细胞并使其在体外表达呼吸道合胞病毒单抗,经鉴定后评价其对呼吸道合胞病毒的中和能力和杀伤能力,从而筛选出高效、可规模化生产的呼吸道合胞病毒单克隆抗体。本发明直接以鼠伤寒感受态细胞VNP2009转染293T细胞,与传统方法相比不仅节省了时间而且还可避免使用大量的转染试剂。由于外源性质粒向表达系统的转染是单克隆抗体体外表达的关键环节,因此本发明对该技术的产业化应用提供了有力的支撑。

    一种益生菌空气弥散制剂的制备方法

    公开(公告)号:CN106265761A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201610809429.4

    申请日:2016-09-08

    Applicant: 南昌大学

    CPC classification number: A61K35/744 A61K9/007 A61K35/745

    Abstract: 一种益生菌空气弥散制剂的制备方法,是将耐氧的益生菌做成冻干粉制剂,之后将其置于空气给风系统出口处,使其混匀弥散在空气中。空气中的益生菌随着人的呼吸和饮食进入呼吸系统或者消化系统,进而激活并调节人体口腔、胃肠道微生态菌群的平衡,起到预防和治疗各种由菌群失调造成的疾病。本发明可以人为增加刚出生的婴儿或者医院里的病人接触益生菌的几率,增强婴幼儿和病人免疫力,减少过敏、免疫低下及其它疾病。本发明的益生菌可随空气接触人体各个部位,无需要传统的给药途径对人体没有副作用绿色,安全。

    一种天然口腔细菌移植在口腔疾病治疗中的应用

    公开(公告)号:CN105193859A

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201510619689.0

    申请日:2015-09-25

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 一种天然口腔细菌移植在口腔疾病治疗中的应用,是通过采集经过多项条件筛选的健康人群口腔内细菌样品,将通过离心获得的益生菌制成喷剂,用于口腔疾病的治疗。本发明采用细菌间的拮抗作用替代抗生素及其他药物,通过恢复口腔微生态平衡来达到治疗和预防口腔疾病的效果;同时,因为原始的口腔细菌样品,含有多种无法培养的有益细菌,菌群丰富,更有利于口腔微生态的多样化;而且喷剂的治疗形式简单、安全,适用于各类口腔疾病患者,能起到预防和治疗如牙髓炎、牙尖周炎、牙龈炎、牙周炎、急性坏死性溃疡性牙周炎、口腔炎等口腔疾病的作用。

    一种天然粪便菌群移植在肠道疾病治疗中的应用

    公开(公告)号:CN105193858A

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201510619679.7

    申请日:2015-09-25

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 一种天然粪便菌群移植在肠道疾病治疗中的应用,是收集经过多项条件筛选后的健康人群的粪便,通过匀浆、悬浮、稀释、过滤、离心等步骤收集肠道混合益生菌群,采用胃镜、肠镜、鼻-空肠管、造瘘口、灌肠等途径进行肠道混合益生菌群的移植,恢复肠道内的菌群平衡,达到治疗肠道疾病的效果。本发明是采用以菌治菌的方法,通过维持人体肠道菌群的稳定,实现无耐药性、无毒副作用的微生态疗法,并以粪菌胶囊或菌液的形式进行治疗,针对腹泻、难辨梭状芽胞杆菌感染、克罗恩病等具有良好的治疗效果。

    一种人工培养口腔细菌移植在口腔疾病治疗中的应用

    公开(公告)号:CN105193857A

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201510619648.1

    申请日:2015-09-25

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 一种人工培养口腔细菌移植在口腔疾病治疗中的应用,其特征是通过采集经过多项条件筛选的健康人群口腔内细菌样品,如至少近3-6个月内没有使用过抗生素、无口腔疾病、没有不良生活习惯等多项筛选条件;采用平板分离技术,分别在厌氧和需氧的条件下培养,挑选可培养的口腔内益生菌群;获得的益生菌制成喷剂,用于口腔疾病的治疗。该发明采用细菌间的拮抗作用替代抗生素及其他药物,通过恢复口腔微生态平衡来达到治疗和预防口腔疾病的效果;且喷剂的治疗形式简单、安全,适用于各类口腔疾病患者,能起到预防和治疗如牙髓炎、牙尖周炎、牙龈炎、牙周炎、急性坏死性溃疡性牙周炎、口腔炎等口腔疾病的作用。

    一种植物乳酸杆菌ATCC8014与杜仲叶发酵饮料的制备方法

    公开(公告)号:CN104921237A

    公开(公告)日:2015-09-23

    申请号:CN201510073232.4

    申请日:2015-02-12

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 一种植物乳酸杆菌ATCC 8014与杜仲叶发酵饮料的制备方法,是利用新鲜杜仲叶原汁与植物乳酸杆菌ATCC 8014共发酵,通过将杜仲叶原汁按不同比例稀释,在调试完毕的稀释比例下,同时加入不同比例白砂糖,探究不同比例下杜仲叶益生菌发酵液的风味。由实验人员参与品尝,并对发酵液进行评价,获取最佳的发酵条件。本发明利用益生菌的分解与益生能力,使杜仲叶中营养物质分解成更易吸收的物质。

    纳米磁珠法筛选呼吸道合胞病毒记忆性B细胞的方法

    公开(公告)号:CN104560873A

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:CN201410726313.5

    申请日:2014-12-04

    Applicant: 南昌大学

    Abstract: 纳米磁珠法筛选呼吸道合胞病毒记忆性B细胞的方法,是采用特异性抗原与抗体相结合的理论,通过呼吸道合胞病毒抗原蛋白GD和FD耦联纳米磁珠,然后将分离得到的人外周血单核细胞加入到已经制备好的含纳米磁珠管中,由于人外周血单核细胞中的针对呼吸道合胞病毒的记忆性B细胞表面有IgM和IgD,耦联在纳米磁珠的呼吸道合胞病毒抗原蛋白GD和FD能特异地结合IgM和IgD,从而将针对呼吸道合胞病毒的记忆性B细胞从人外周血单核细胞中分离出来。本发明的优点是:纳米磁珠筛选呼吸道合胞病毒的记忆性B细胞的方法操作简单,分离快速、高效,灵敏度高,适用于针对任何病毒的记忆性B细胞的快速分离,此外,也可全面监测RSV感染者。

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