公开(公告)号：CN102643774B

公开(公告)日：2014-04-09

申请号：CN201210143173.X

申请日：2012-05-10

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 姜岷 ,  刘嵘明 ,  梁丽亚 ,  吴明科 ,  曹伟佳 ,  马江锋 ,  陈可泉 ,  韦萍

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌（Escherichia coli）BA306，其保藏编号为CCTCC NO：M2012103。其构建过程主要包括失活或敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因和磷酸转运系统中的ptsG基因，并过量共表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶和烟酸磷酸核糖转移酶，使重组大肠杆菌能够高效利用葡萄糖、木糖、阿拉伯糖及果糖等单糖，同时高效利用各种比例混合糖以及纤维素水解液生长，大幅度提高了丁二酸的合成效率。其发酵方法采用两阶段发酵方式，有氧阶段提高生物量，厌氧阶段发酵产酸。

公开(公告)号：CN102399738B

公开(公告)日：2013-12-04

申请号：CN201110380396.3

申请日：2011-11-25

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 姜岷 ,  刘嵘明 ,  梁丽亚 ,  马江锋 ,  陈可泉 ,  韦萍

IPC: C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法，具体是一株高效利用木糖生长并产丁二酸重组菌株及其利用该菌株发酵生产丁二酸的方法。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌BA204，其保藏号登记号为CCTCC NO：M2011207。其构建过程主要包括失活或敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，并过量表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶，使重组大肠杆菌能够利用木糖代谢生长，大幅度提高了丁二酸的合成效率。其发酵方法采用两阶段发酵方式，有氧阶段提高生物量，厌氧阶段发酵产酸。

公开(公告)号：CN102936575A

公开(公告)日：2013-02-20

申请号：CN201210515218.1

申请日：2012-12-05

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 姜岷 ,  梁丽亚 ,  刘嵘明 ,  万青 ,  陈旭 ,  任心怡 ,  马江锋 ,  陈可泉 ,  韦萍 ,  欧阳平凯

IPC: C12N1/20 ,  C12P7/18 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一株大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）LL016，其保藏号为CCTCC NO：M 2012429。本发明还公开了上述大肠埃希氏菌LL016在利用合成培养基纯厌氧发酵生产丁二酸中的应用以及方法。该菌株可以在厌氧条件下，利用无机氮源和葡萄糖生长，并大量积累丁二酸，菌株LL016生长速率较快，且产酸量较高，具有重大的社会意义和经济价值。

公开(公告)号：CN102643770A

公开(公告)日：2012-08-22

申请号：CN201210138292.6

申请日：2012-05-07

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 姜岷 ,  张常青 ,  苟冬梅 ,  梅佳军 ,  刘嵘明 ,  马江锋 ,  吴明科 ,  曹伟佳

IPC: C12N1/20 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一株利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌，其分类命名为埃希氏菌属大肠埃希氏菌EscherichiacoliBER108，其保藏号登记号为：CCTCC NO.M2012068。本发明还公开了上述大肠杆菌在丁二酸发酵生产中的应用。本发明采用等离子体诱变大肠杆菌，利用合成培养基平板筛选出能够在厌氧条件下快速生长的菌株，该菌株可以在厌氧条件下，利用无机氮源和葡萄糖生长，并积累丁二酸。在摇瓶发酵中，以碱式碳酸镁作为PH调节剂，发酵72h，该菌株OD600达到了7.6，丁二酸产量达到11.2g/L，相对于出发菌株，丁二酸产量提高了近3倍。由于原始出发菌株在纯厌氧，合成培养基条件下，生长非常慢，产酸量也很低，因此该突变株BER108具有重大的社会意义和经济价值。

公开(公告)号：CN102533626A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201110413137.6

申请日：2011-12-13

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 姜岷 ,  梁丽亚 ,  刘嵘明 ,  苟冬梅 ,  张常青 ,  马江锋 ,  陈可泉 ,  韦萍 ,  欧阳平凯

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/09 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/1029 ,  C12N9/0006 ,  C12N9/1077 ,  C12N9/88 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19 ,  C12Y101/01027 ,  C12Y203/01054 ,  C12Y204/02011 ,  C12Y401/01031 ,  C12Y401/01049

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及利用葡萄糖产丁二酸的基因工程菌株及其发酵产酸方法。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌BA205，其保藏号登记号为CCTCCNO：M2011447。其构建过程主要以缺乏乳酸脱氢酶(LDH)基因，丙酮酸甲酸裂解酶(PFL)基因活性的菌株大肠杆菌为出发菌株，利用同源重组技术敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PPC)基因，并过量共表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶和烟酸磷酸核糖转移酶后，大幅度提高了丁二酸的合成效率。其发酵方法采用两阶段发酵方式，有氧阶段提高生物量，厌氧阶段发酵产酸。