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公开(公告)号：CN107058329A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201610719675.0
申请日：2016-08-24
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种特异性结合新城疫病毒的核酸适配体及其筛选方法和应用。所述核酸适配体是利用SELEX技术筛选获得的特异性适配体B53。具体地，是在体外构建合成随机单链DNA文库和引物，以原核表达的新城疫HN蛋白和新城疫病毒GM株为靶分子，经过筛选、PCR扩增、正向和反向筛选，将筛选得到的特异性结合新城疫病毒GM株的单链DNA文库进行克隆测序，得到特异性适配体B53。该适配体B53具有抑制病毒复制、病毒血凝活性和形成蚀斑的能力，能够特异性识别新城疫病毒HN蛋白和新城疫病毒GM株，而对禽流感病毒、传染性法氏囊病毒和SPF鸡胚尿囊液无反应性，可用于检测新城疫病毒。
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公开(公告)号：CN101220375B
公开(公告)日：2011-07-27
申请号：CN200710062632.0
申请日：2007-01-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/863 , A61K31/7088 , A61K48/00
Abstract: 本发明提供了一种鸡痘病毒双基因表达载体，其具有SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列，包括启动子P7.5、LacZ基因、位于LacZ基因上的多克隆位点、稀有酶切位点Not1、鸡痘病毒DNA同源臂TK1和TK2、KanR抗性标记基因、复制起点(ori)，以及连接区段。本发明构建的双基因表达载体，最大限度地减少了载体长度，从而可以容纳更大的外源基因；增加了可用酶切位点数量，方便克隆不同的外源基因；对插入位点Not1处的启动子不作限定，可以自由选择与外源基因搭配的启动子，从而提高了表达效率，并且，采用反式表达的方法，从而提高了外源基因的表达效率。
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公开(公告)号：CN101220374A
公开(公告)日：2008-07-16
申请号：CN200710062631.6
申请日：2007-01-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/863 , A61K48/00 , A61K31/7088
Abstract: 本发明提供了一种鸡痘病毒双基因表达载体，其具有SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列，包括启动子P7.5、LacZ基因、位于LacZ基因上的多克隆位点、稀有酶切位点Not1、鸡痘病毒DNA同源臂F11L1和F11L2、AmpR抗性标记基因、复制起点(ori)。本发明构建的双基因表达载体，最大限度地减少了载体长度，从而可以容纳更大的外源基因；增加了可用酶切位点数量，方便克隆不同的外源基因；对插入位点Not1处的启动子不作限定，可以自由选择与外源基因搭配的启动子，从而提高了表达效率，并且，采用反式表达的方法，从而提高了外源基因的表达效率。
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公开(公告)号：CN114703191A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210409294.8
申请日：2022-04-19
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及基于CRSIPR技术构建RICTOR基因敲除细胞株的方法及其应用，属于生物技术领域，所述方法包括：首先设计用于RICTOR基因敲除的sgRNA，合成sgRNA‑RICTOR‑F和sgRNA‑RICTOR‑R两种引物序列；将合成的两条核苷酸链经退火形成双链，并与载体质粒连接，验证正确后获得重组真核表达质粒；将经构建的重组真核表达质粒转染DF‑1细胞，经筛选、验证，获得RICTOR基因敲除细胞株。该基因敲除细胞株DF‑1ΔRICTOR与DF‑1正常细胞株在细胞活性上没有显著的差异，且传代稳定，RICTOR基因mRNA转录水平几乎接近于0，敲低效果显著。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107034232B
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN201710265057.8
申请日：2017-04-21
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种自噬相关基因ATG16L1增强新城疫病毒复制的方法和应用，属于基因表达生物技术领域。本发明所述高效复制新城疫病毒载体为将自噬相关基因ATG16L1构建到真核表达载体pEGFP‑N1中，获得重组鸡ATG16L1的真核表达载体pEGFP‑N1‑gaATG16L1质粒。本发明成功构建重组鸡ATG16L1的真核表达质粒，不仅可以保证在显微镜下能清晰明确看到转染效果，而且ATG16L1能够加强新城疫病毒在细胞上的繁殖效率。实现了新城疫病毒的高效复制。
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公开(公告)号：CN110846426A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911282829.4
申请日：2019-12-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速检测鸡白痢沙门菌的荧光PCR引物组，包括：qpcr-F：5′-CGAACCTGCAACAGCTTTAATAGAAAGC-3′；qpcr-R：5′-CTCGTATTTGGTGGCAGTGATGTTC-3′；Probe：5′-TATTAGAGTCTAG-Eclipse-3′；引物组针对鸡白痢沙门菌rfbs基因。相应的，本发明还提供了基于上述引物组的试剂盒。本发明的引物组和试剂盒具有特异性强和灵敏度高的优点。
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公开(公告)号：CN107034232A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201710265057.8
申请日：2017-04-21
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12N15/85 , C07K14/47 , C12N15/65 , C12N2510/02
Abstract: 本发明公开了一种自噬相关基因ATG16L1增强新城疫病毒复制的方法和应用，属于基因表达生物技术领域。本发明所述高效复制新城疫病毒载体为将自噬相关基因ATG16L1构建到真核表达载体pEGFP‑N1中，获得重组鸡ATG16L1的真核表达载体pEGFP‑N1‑gaATG16L1质粒。本发明成功构建重组鸡ATG16L1的真核表达质粒，不仅可以保证在显微镜下能清晰明确看到转染效果，而且ATG16L1能够加强新城疫病毒在细胞上的繁殖效率。实现了新城疫病毒的高效复制。
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公开(公告)号：CN101586168A
公开(公告)日：2009-11-25
申请号：CN200910040395.7
申请日：2009-06-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种J亚群禽白血病病毒基因检测用引物组、检测方法和快速检测试剂盒，该引物组由外引物F3、外引物B3、内引物FIP和内引物BIP这四条引物组成，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～4所示，其中，R为G或A，Y为T、U或C。本发明采用上述引物组，在优化的最佳体系下对待测样品DNA进行环介导等温扩增反应，阳性反应在琼脂糖凝胶电泳中显示梯状带，同时在反应产物中加入显色剂，阳性反应会发生明显的颜色变化。本发明的引物组和试剂盒均可高效高特异性地检测J亚群禽白血病病毒基因，在不足1h即可完成扩增反应，检测成本低、耗时短、产率高，特异性高，且阴阳性结果显色差异显著，验证率高，更加明显可靠。
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公开(公告)号：CN101220375A
公开(公告)日：2008-07-16
申请号：CN200710062632.0
申请日：2007-01-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/863 , A61K31/7088 , A61K48/00
Abstract: 本发明提供了一种鸡痘病毒双基因表达载体，其具有SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列，包括启动子P7.5、LacZ基因、位于LacZ基因上的多克隆位点、稀有酶切位点Not 1、鸡痘病毒DNA同源臂TK1和TK2、KanR抗性标记基因、复制起点(ori)，以及连接区段。本发明构建的双基因表达载体，最大限度地减少了载体长度，从而可以容纳更大的外源基因；增加了可用酶切位点数量，方便克隆不同的外源基因；对插入位点Not1处的启动子不作限定，可以自由选择与外源基因搭配的启动子，从而提高了表达效率，并且，采用反式表达的方法，从而提高了外源基因的表达效率。
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