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公开(公告)号:CN118620860A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410723929.0
申请日:2024-06-05
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在不对称合成普拉替尼药物中间体中的应用,该ω‑转氨酶突变体由野生型ω‑转氨酶通过以下任意一种突变方式得到的:第62位色氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为异亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为甲硫氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高,具有实现(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺绿色合成路线工业化的应用前景。
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公开(公告)号:CN116840197A
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202210287918.3
申请日:2022-03-23
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明提供了一种2’‑O‑甲基转移酶活性检测方法、试剂盒及应用。本发明的2’‑O‑甲基转移酶活性检测方法,利用S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸水解酶、腺苷脱氨酶将生成的S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸不可逆地转化为同型半胱氨酸;硫醇特异性荧光分子探针结合同型半胱氨酸后形成的化合物采用特异性结合硫醇基而发射荧光的分子探针来直接测定反应中产生的同型半胱氨酸含量,然后计算出相应的S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸含量,以此测定2’‑O‑甲基转移酶活性;本发明的检测方法具有操作简便,检测快速,准确度高,可实现高通量、自动化检测,无放射性污染等突出优势。
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公开(公告)号:CN115725525A
公开(公告)日:2023-03-03
申请号:CN202210736333.5
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:S38R;S38R和G34D;S38R和Y128R;S38R和Q332K;S38R、G34D和Y128R;S38R、Y128R和Q332K;S38R、G34D和Q332K;S38R、G34D、Y128R和Q332K。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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公开(公告)号:CN112359032B
公开(公告)日:2022-06-21
申请号:CN202011250781.1
申请日:2020-11-11
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种突变型酯酶及其应用、重组载体及其制备方法和应用、重组工程菌及其应用。该突变型酯酶包括:(a)、由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的多肽;或(b)、与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90%同源性的多肽。上述突变型酯酶的热稳定性较好。
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公开(公告)号:CN113249349B
公开(公告)日:2022-01-25
申请号:CN202110690363.2
申请日:2021-06-22
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种突变型醇脱氢酶、重组载体及其制备方法和应用,所述突变型醇脱氢酶是在SEQ ID No.2所示的氨基酸序列上进行突变,突变位点选自T105N、G137S、A165E、S180D中的一种或一种以上的组合。本发明的突变型醇脱氢酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型醇脱氢酶相比,本发明的单点突变体和组合突变体的酶活力均得到了提高;尤其是组合突变体,其活性提高了6倍,表现出单点突变体叠加效果;本发明的突变型醇脱氢酶具有优良的催化活性,能够用于催化醛/酮化合物还原,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN112626044A
公开(公告)日:2021-04-09
申请号:CN202011624067.4
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为如下(a)或(b):(a)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸,且与该序列具有90%以上同源性;或(b)至少取代、缺失或添加天然的精氨酸氧化酶的氨基酸序列的一个氨基酸,且与该序列具有相同的功能。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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公开(公告)号:CN110982801B
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN201911377567.X
申请日:2019-12-27
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种转氨酶突变体及其构建方法和应用。本发明提供的转氨酶突变体包括在野生型转氨酶(WP_0532423951.1)氨基酸序列的第259位、第431位、第264位、第269位及第381位进行单点突变和组合突变的多种突变体,与野生型转氨酶(WP_0532423951.1)相比,该突变体在55℃下半衰期更长,最优组合突变体的半衰期大约是野生型转氨酶(WP_0532423951.1)的5倍,热稳定性更好,适于在较高的温度下催化合成手性胺。通过本发明所提供的构建方法得到的转氨酶突变体在较高的温度下催化合成手性胺时表现出优良的立体选择性和催化活性,具有较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN111117979A
公开(公告)日:2020-05-08
申请号:CN202010036428.7
申请日:2020-01-14
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种转氨酶突变体、酶制剂、重组载体、重组细胞及其制备方法和应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列由野生型转氨酶的氨基酸序列发生突变得到,野生型转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,发生突变的氨基酸位点包括第226位氨基酸位点、第281位氨基酸位点、第312位氨基酸位点及第406位氨基酸位点中的至少一个。上述转氨酶突变体的酶活较高。
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公开(公告)号:CN120005845A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510481713.2
申请日:2025-04-17
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的辣根过氧化物酶突变体其构建方法及应用,该辣根过氧化物酶突变体通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型辣根过氧化物酶氨基酸序列的第40位组氨酸突变为色氨酸得到。本发明通过定点突变技术将来源于辣根植物的辣根过氧化物酶(PDB:1HCH)氨基酸序列的第40位组氨酸突变为色氨酸,获得的突变体(H40W)催化过氧化氢和ADHP生成试卤灵的活性显著高于野生型,可以看出,本发明公开的辣根过氧化物酶催化ADHP活性高,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN118726295A
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410723933.7
申请日:2024-06-05
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的ω‑转氨酶突变体、其构建方法及应用,该ω‑转氨酶突变体是通过将野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列按如下任意一种突变方式得到的:第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为异亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为甲硫氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高、反应条件温和、工艺简单、绿色环保,具有良好的应用前景。
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