一种许氏平鲉精巢细胞系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN119220487A

    公开(公告)日:2024-12-31

    申请号:CN202411746773.4

    申请日:2024-12-02

    Abstract: 本发明公开了一种许氏平鲉精巢细胞系及其构建方法和应用,属于海洋鱼类细胞培养技术领域。对许氏平鲉幼鱼精巢组织进行原代培养和传代培养,从而建立了能够长期体外持续传代的许氏平鲉精巢细胞系。本发明建立的许氏平鲉精巢细胞系呈成纤维状,生长曲线良好,具有较强的增殖能力。其显著表达基质细胞标记基因timp2,慢病毒载体可转染该细胞系,后续可应用于性腺发育相关功能基因的研究。目前,该细胞系已在体外持续传代60余代,且能够进行冷冻保存,复苏存活率高。该细胞系的建立对于鱼类性腺发育基因的研究提供了稳定且优良的实验材料。

    许氏平鲉肌卫星细胞原位杂交探针引物、探针及定位方法

    公开(公告)号:CN111118003A

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN202010051160.4

    申请日:2020-01-17

    Abstract: 本发明涉及一种许氏平鲉肌卫星细胞原位杂交探针引物、探针及定位方法,属于分子生物学领域,探针模板的引物序列如SEQ.NO 1和SEQ.NO 2,探针序列如SEQ.NO 3所示。本发明还提供了利用所述探针进行原位杂交定位许氏平鲉肌卫星细胞的方法。本发明通过Pax7基因的骨骼肌组织原位杂交对许氏平鲉肌卫星细胞进行定位,为探索肌卫星细胞的更新和激活分子机理研究提供理论和技术支持,将有助于进一步研究许氏平鲉肌肉生长分化规律;另外该发明在其它鱼类肌肉组织原位杂交进行基因定位和功能研究方面有一定的应用前景。

    一种用于鲆鲽鱼类血液RNA提取的裂解液

    公开(公告)号:CN105385681B

    公开(公告)日:2018-07-17

    申请号:CN201511008017.2

    申请日:2015-12-29

    Abstract: 本发明公开了一种适应于鲆鲽鱼类血液RNA提取的裂解液,由盐酸胍、异硫氰酸胍、甲基溴化铵、十二烷基硫酸钠、水饱和酚、三(2‑羧乙基)膦、8-羟基喹啉、枸橼酸钠、乙二胺四乙酸、甘油、乙酸钠、氯化钠和DEPC水按照比例配制而成。使用本发明裂解液提取的鲆鲽鱼类血液RNA浓度高、完整性好、OD260/OD280比值均在2.0以上,OD260/OD230比值均在2.2以上,裂解液在室温下具有良好的稳定性。应用本发明所提供的裂解液提取的鲆鲽鱼类血液RNA,可以完全满足下游鱼类分子生物学及鱼类免疫学各项实验的质量要求。

    一种牙鲆精子介导转基因过程中保持精子活力的方法

    公开(公告)号:CN104372022A

    公开(公告)日:2015-02-25

    申请号:CN201410624598.1

    申请日:2014-11-06

    Abstract: 本发明提供一种牙鲆精子介导转基因过程中保持精子活力的方法,是利用脂质体将外源DNA包裹起来形成两者的复合物,然后将精子12000rpm高速离心15min,去除精清,再将复合物与精子共同孵育,从而用于精子介导的转基因实验和生产中。脂质体与外源质粒形成复合物的N/P参数为5,形成脂质体-DNA复合物的时间为15min,外源质粒的浓度为100ng/μl,每10μl精子与10μg外源质粒混合,混合的时间在10min至50min。通过与质粒直接与精子混合作为比较,本发明的优点为,利用脂质体将外源质粒包裹起来,有效避免外源质粒对精子的损伤,利用细胞转化的原理,即脂质体和精子质膜间的静电作用,提高外源基因的导入率,操作简便,处理时间的跨度广,便于实际操作。

    半滑舌鳎hepcidin抗菌肽
    40.
    发明授权

    公开(公告)号:CN102219845B

    公开(公告)日:2013-04-10

    申请号:CN201110100736.2

    申请日:2011-04-21

    Abstract: 本发明涉及一种半滑舌鳎hepcidin抗菌肽,该抗菌肽的序列为SEQ IDNO:3。本发明的半滑舌鳎hepcidin抗菌肽的前体肽和成熟肽均可以是通过化学合成、基因重组表达获得的产物。本发明获得的半滑舌鳎抗菌肽hepcidin经原核表达后得到的重组蛋白具有明显的抑制金黄色葡萄球菌、鳗弧菌、迟缓爱德华氏菌生长的作用,相对于其他抗菌肽,本发明的抗菌肽对海洋病原菌的抑制作用更为明显,可应用于水产养殖业。因此,本发明的半滑舌鳎抗菌肽可应用于制备抗病菌类产品,抗病菌类产品包括饲料添加剂、兽药、防腐剂、医药产品如抗菌药物等。

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