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公开(公告)号：CN105198978A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201510612796.0
申请日：2015-09-24
Applicant: 中国海洋大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12N1/21 , A23K1/16 , A61K38/17 , A61P15/00 , A23K1/18 , C12R1/19
Abstract: 本发明的目的是提供一种牙鲆神经肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1；本发明克隆得到牙鲆神经肽的编码序列，并建立和筛选出能有效地进行神经肽重组表达的载体及工程菌，实现了牙鲆神经肽在原核生物体内的融合表达，与传统的多肽合成方法及从天然资源提取多肽的方法相比，本发明的制备方法使得神经肽大批量、低成本的规模化生产成为可能。本发明得到的工程菌可以直接作为饲料添加剂使用，并利用鱼类自身的肠激酶作用释放神经肽发挥其功能，因此可应用于海洋养殖鱼类、养殖禽畜类的饲料添加剂和兽药，解决了养殖业长期存在的难以安全有效地人工控制养殖品种性成熟过程的问题，并以高科技带动了养殖业及养殖饲料工业的行业技术进步。
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公开(公告)号：CN104328116A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410623763.1
申请日：2014-11-06
Applicant: 中国海洋大学
Abstract: 发明的目的是提供一种与牙鲆耐热性相关的SNP位点，所述的SNP位点是核酸序列为SEQ ID NO:1的HSP70基因的第47/48位，其碱基为AA或A/DEL；第65位，其碱基为T或C；第185位，其碱基为C或T；第260位，其碱基为C或T；第305位，其碱基为T或A；第600位，其碱基为T或C；第815位，其碱基为C或T；本发明的SNP位点用于牙鲆耐热性个体/家系的筛选。本方法选用热休克蛋白基因HSP70，通过分子标记的方法筛选耐热家系，在分子水平上评估各家系的遗传特性，能清晰的鉴别出其基因组的突变位点，并结合加热实验，分析突变位点和耐热的相关性，对耐热的分子机制做出合理的判断，相对于传统的选育方法目的性更强，成本较低，能明显缩短选育时间。
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公开(公告)号：CN102251024B
公开(公告)日：2013-01-09
申请号：CN201110100728.8
申请日：2011-04-21
Applicant: 中国海洋大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种激光显微切割染色体标本制作液及其应用，所述的标本制作液包含有甲醇、冰醋酸和氯仿，其体积比为5～10∶1～3∶1～3，优选比例为8∶1∶1。本发明的染色体标本制作液用于制备激光显微切割染色体标本。本发明的染色体标本制作液制备的激光显微切割染色体标本，各条染色体均分散得很好，方便后续的显微切割操作。同时本发明的制备方法简单实用，易于操作，方便普通技术人员的使用。
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公开(公告)号：CN105385681B
公开(公告)日：2018-07-17
申请号：CN201511008017.2
申请日：2015-12-29
Applicant: 中国海洋大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种适应于鲆鲽鱼类血液RNA提取的裂解液,由盐酸胍、异硫氰酸胍、甲基溴化铵、十二烷基硫酸钠、水饱和酚、三(2‑羧乙基)膦、8－羟基喹啉、枸橼酸钠、乙二胺四乙酸、甘油、乙酸钠、氯化钠和DEPC水按照比例配制而成。使用本发明裂解液提取的鲆鲽鱼类血液RNA浓度高、完整性好、OD260/OD280比值均在2.0以上，OD260/OD230比值均在2.2以上，裂解液在室温下具有良好的稳定性。应用本发明所提供的裂解液提取的鲆鲽鱼类血液RNA，可以完全满足下游鱼类分子生物学及鱼类免疫学各项实验的质量要求。
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公开(公告)号：CN106399314A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610879180.4
申请日：2016-10-08
Applicant: 中国海洋大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85
CPC classification number: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N2800/106 , C12N2840/80
Abstract: 本发明提供一种在牙鲆原始生殖细胞中调节基因表达的3′UTR区序列，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1；该3′UTR区序列用于调控基因在牙鲆原始生殖细胞中进行表达。本发明的3′UTR区序列为牙鲆鱼特有的序列，可以用于鲆鲽鱼、斑马鱼等鱼类生殖系细胞的示踪以及在鱼类生殖系细胞中外源基因特异表达的定位；本发明为牙鲆等鱼类原始生殖细胞的识别、标记、跟踪、分离奠定了基础，同时为开展鱼类的性别分化机制以及生殖系细胞发生发育研究提供了技术方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104372022A
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201410624598.1
申请日：2014-11-06
Applicant: 中国海洋大学
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明提供一种牙鲆精子介导转基因过程中保持精子活力的方法，是利用脂质体将外源DNA包裹起来形成两者的复合物，然后将精子12000rpm高速离心15min，去除精清，再将复合物与精子共同孵育，从而用于精子介导的转基因实验和生产中。脂质体与外源质粒形成复合物的N/P参数为5，形成脂质体-DNA复合物的时间为15min，外源质粒的浓度为100ng/μl，每10μl精子与10μg外源质粒混合，混合的时间在10min至50min。通过与质粒直接与精子混合作为比较，本发明的优点为，利用脂质体将外源质粒包裹起来，有效避免外源质粒对精子的损伤，利用细胞转化的原理，即脂质体和精子质膜间的静电作用，提高外源基因的导入率，操作简便，处理时间的跨度广，便于实际操作。
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公开(公告)号：CN102219845B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110100736.2
申请日：2011-04-21
Applicant: 中国海洋大学
Abstract: 本发明涉及一种半滑舌鳎hepcidin抗菌肽，该抗菌肽的序列为SEQ IDNO：3。本发明的半滑舌鳎hepcidin抗菌肽的前体肽和成熟肽均可以是通过化学合成、基因重组表达获得的产物。本发明获得的半滑舌鳎抗菌肽hepcidin经原核表达后得到的重组蛋白具有明显的抑制金黄色葡萄球菌、鳗弧菌、迟缓爱德华氏菌生长的作用，相对于其他抗菌肽，本发明的抗菌肽对海洋病原菌的抑制作用更为明显，可应用于水产养殖业。因此，本发明的半滑舌鳎抗菌肽可应用于制备抗病菌类产品，抗病菌类产品包括饲料添加剂、兽药、防腐剂、医药产品如抗菌药物等。
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公开(公告)号：CN102219845A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110100736.2
申请日：2011-04-21
Applicant: 中国海洋大学
Abstract: 本发明涉及一种半滑舌鳎hepcidin抗菌肽，该抗菌肽的序列为SEQ IDNO：3。本发明的半滑舌鳎hepcidin抗菌肽的前体肽和成熟肽均可以是通过化学合成、基因重组表达获得的产物。本发明获得的半滑舌鳎抗菌肽hepcidin经原核表达后得到的重组蛋白具有明显的抑制金黄色葡萄球菌、鳗弧菌、迟缓爱德华氏菌生长的作用，相对于其他抗菌肽，本发明的抗菌肽对海洋病原菌的抑制作用更为明显，可应用于水产养殖业。因此，本发明的半滑舌鳎抗菌肽可应用于制备抗病菌类产品，抗病菌类产品包括饲料添加剂、兽药、防腐剂、医药产品如抗菌药物等。
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公开(公告)号：CN102181554A
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN201110100873.6
申请日：2011-04-21
Applicant: 中国海洋大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种半滑舌鳎雌性特异的基因组DNA片段及其应用。半滑舌鳎雌性特异的基因组DNA片段，其特征在于所述的DNA片段为：(a)具有序列为SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2的DNA片段；(b)分别与(a)中所述DNA片段经过一个或多个核苷酸的取代、缺失或添加而形成的DNA片段，且为半滑舌鳎雌性特异的基因组DNA序列。本发明获得的半滑舌鳎雌性特异性的DNA片段作为分子标记能够有效的辨别半滑舌鳎的雌性个体，并且本发明的方法可以一次性鉴定大量个体，鉴定时间不超过90分钟，适合大规模地进行半滑舌鳎的遗传性别鉴定，能够在半滑舌鳎工厂化养殖中进行大规模的推广。
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公开(公告)号：CN108823289B
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN201810589606.1
申请日：2018-06-08
Applicant: 中国海洋大学
IPC: C12Q1/6841
Abstract: 本发明公开了一种不依赖荧光检测杂交信号的鱼类染色体原位杂交液，由去离子甲酰胺，2xSSC缓冲液,聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯,酵母总RNA，封闭试剂，乙二胺四乙酸,硫酸葡聚糖，柠檬酸三钠，磷酸氢二钠,焦碳酸二乙酯处理后的水，变性后的探针与去离子甲酰胺混合液按一定比例配置成的。应用本发明的杂交液可以使染色体原位杂交技术不依赖于荧光检测，使用普通显微镜就可以观察到荧光信号,而且试剂配制和存放便捷，杂交结果观察、拍照方便，杂交材料可以长期存放，实验过程更加简单易于操作，极大的扩大了鱼类染色体原位杂交的应用范围。
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