一种东星斑卵原细胞的分离纯化方法及其鉴定和应用

    公开(公告)号:CN113774014B

    公开(公告)日:2023-08-08

    申请号:CN202110993847.4

    申请日:2021-08-27

    Abstract: 本发明提供一种东星斑卵原细胞的分离纯化方法及其鉴定和应用,采用本发明的分离纯化方法,可从卵原细胞占比为10%左右的卵巢细胞悬液中,分离纯化得到占比在85.6~90.3%的卵原细胞;而且该方法对细胞的损伤小,获得的细胞活力高,操作过程,简单方便,所用仪器普遍,易于推广和应用;东星斑卵原细胞的鉴定方法,采用杂交显示技术,使用Nanos2探针标记卵原细胞,可快速识别东星斑卵原细胞;本发明的东星斑卵原细胞的分离纯化方法为东星斑生殖发育研究以及后期借助生殖细胞移植技术应用卵原干细胞来扩增东星斑雄性个体提供了技术保障。

    许氏平鲉肌卫星细胞原位杂交探针引物、探针及定位方法

    公开(公告)号:CN111118003B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN202010051160.4

    申请日:2020-01-17

    Abstract: 本发明涉及一种许氏平鲉肌卫星细胞原位杂交探针引物、探针及定位方法,属于分子生物学领域,探针模板的引物序列如SEQ.NO 1和SEQ.NO 2,探针序列如SEQ.NO 3所示。本发明还提供了利用所述探针进行原位杂交定位许氏平鲉肌卫星细胞的方法。本发明通过Pax7基因的骨骼肌组织原位杂交对许氏平鲉肌卫星细胞进行定位,为探索肌卫星细胞的更新和激活分子机理研究提供理论和技术支持,将有助于进一步研究许氏平鲉肌肉生长分化规律;另外该发明在其它鱼类肌肉组织原位杂交进行基因定位和功能研究方面有一定的应用前景。

    一种东星斑卵原细胞的分离纯化方法及其鉴定和应用

    公开(公告)号:CN113774014A

    公开(公告)日:2021-12-10

    申请号:CN202110993847.4

    申请日:2021-08-27

    Abstract: 本发明提供一种东星斑卵原细胞的分离纯化方法及其鉴定和应用,采用本发明的分离纯化方法,可从卵原细胞占比为10%左右的卵巢细胞悬液中,分离纯化得到占比在85.6~90.3%的卵原细胞;而且该方法对细胞的损伤小,获得的细胞活力高,操作过程,简单方便,所用仪器普遍,易于推广和应用;东星斑卵原细胞的鉴定方法,采用杂交显示技术,使用Nanos2探针标记卵原细胞,可快速识别东星斑卵原细胞;本发明的东星斑卵原细胞的分离纯化方法为东星斑生殖发育研究以及后期借助生殖细胞移植技术应用卵原干细胞来扩增东星斑雄性个体提供了技术保障。

    许氏平鲉肌卫星细胞原位杂交探针引物、探针及定位方法

    公开(公告)号:CN111118003A

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN202010051160.4

    申请日:2020-01-17

    Abstract: 本发明涉及一种许氏平鲉肌卫星细胞原位杂交探针引物、探针及定位方法,属于分子生物学领域,探针模板的引物序列如SEQ.NO 1和SEQ.NO 2,探针序列如SEQ.NO 3所示。本发明还提供了利用所述探针进行原位杂交定位许氏平鲉肌卫星细胞的方法。本发明通过Pax7基因的骨骼肌组织原位杂交对许氏平鲉肌卫星细胞进行定位,为探索肌卫星细胞的更新和激活分子机理研究提供理论和技术支持,将有助于进一步研究许氏平鲉肌肉生长分化规律;另外该发明在其它鱼类肌肉组织原位杂交进行基因定位和功能研究方面有一定的应用前景。

    一种豹纹鳃棘鲈来源FGF2蛋白的制备方法与应用

    公开(公告)号:CN117050156A

    公开(公告)日:2023-11-14

    申请号:CN202310991057.1

    申请日:2023-08-08

    Abstract: 本发明提供一种豹纹鳃棘鲈来源FGF2蛋白的制备方法与应用,包括以下步骤:(1)获取豹纹鳃棘鲈FGF2基因的蛋白质编码区克隆片段,将所述片段插入表达载体,制得重组表达载体;(2)将步骤(1)中重组表达载体转化到大肠杆菌中,将大肠杆菌菌液转接培养,选取含有重组质粒的大肠杆菌菌液转接培养至OD600为0.5~0.7,加入IPTG诱导表达,培养后离心收集菌体并破碎,取上清液,得到含豹纹鳃棘鲈FGF2表达产物样品;(3)将步骤(2)含豹纹鳃棘鲈FGF2表达产物样品进行纯化,脱盐,得到豹纹鳃棘鲈来源FGF2蛋白。采用本发明方法制备的豹纹鳃棘鲈来源FGF2蛋白,产量高、生物活性高、对豹纹鳃棘鲈生殖干细胞体外增殖具有促进作用。

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