公开(公告)号：CN112877348B

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN202110024959.9

申请日：2021-01-08

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 盖新娜 ,  周信荣 ,  戴云 ,  周磊 ,  韩军 ,  张永宁 ,  张桂红 ,  杨汉春

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/01 ,  G01N33/543 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒CD2v胞外域重组蛋白，并进一步公开其用于构建ELISA的应用，以及其制备的用于检测非洲猪瘟病毒的ELISA检测试剂盒。本发明方案基于目前在中国流行的毒株特点，构建了原核表达的CD2v胞外域重组蛋白，所述重组蛋白具有高获得量、高纯度、良好的反应原性，可诱导机体产生中和抗体，可进一步基于该重组蛋白构建检测非洲猪瘟病毒的ELISA试剂盒，所述试剂盒具有高度特异性、敏感性和可重复性，可作为一种可靠的检测方法用于非洲猪瘟病毒抗体的监测或病毒的鉴别。

公开(公告)号：CN110438236B

公开(公告)日：2020-12-04

申请号：CN201910486051.2

申请日：2019-06-05

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘剑锋 ,  张蕾 ,  郑先瑞 ,  周磊 ,  傅金銮

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种与猪乳头内陷相关的SNP标记及其应用，所述SNP分子标记包括以下至少一个位点：(1)位于猪13号染色体上的MIR138基因，GenBank序列号：NC_010455.5所示序列的27449811bp处，该SNP位点为rs81256086，碱基变化为T/C；(2)位于猪13号染色体上的ANO10基因，GenBank序列号：NC_010455.5所示序列的26877847bp处，该SNP位点为rs327526761，碱基变化为A/G。上述SNP标记可以应用于检测猪乳头是否内陷和辅助猪育种。

公开(公告)号：CN118600014B

公开(公告)日：2025-03-21

申请号：CN202310759309.8

申请日：2023-06-26

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘剑锋 ,  毛瑞涵 ,  杜恒 ,  周磊

IPC: C12Q1/6888 ,  C40B40/06 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及分子标记技术领域，具体公开了一种猪全基因组低密度5K SNP芯片及其应用。本发明所提供的猪全基因组低密度5K SNP芯片中包括用于猪基因分型的SNP分子标记组合，所述SNP分子标记组合由5603个SNP分子标记组成，所述SNP分子标记如表1所示。本发明的提供的SNP芯片或分子标记组合可应用于猪全基因组育种值评估、聚类分析、分子标记辅助育种等多个领域，大幅降低育种成本。

公开(公告)号：CN119249086A

公开(公告)日：2025-01-03

申请号：CN202411774537.3

申请日：2024-12-05

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 刘剑锋 ,  周磊 ,  李思雨 ,  刘振 ,  卓越 ,  杜恒

IPC: G06F18/15 ,  G06Q50/02 ,  G06F18/2431 ,  G06F18/27

Abstract: 本发明公开了一种种猪生长性能数据的质控与填充方法及系统，涉及种猪数据处理领域，方法步骤包括：采集种猪生长性能数据并进行预处理，种猪生长性能数据包括体重数据和采食量数据；利用回归分析方法，结合Tukey权重函数以及稳健回归方法，对处理后的体重数据进行质控；根据缺失数据的类型，采用线性插值法和拟合二项式回归法对处理后的体重数据进行填充；基于处理后的采食量数据识别若干种异常采食行为类型，将出现异常类型的采食量设为空缺，然后使用线性混合模型对无异常数据进行校正，基于栏位、体重、日增重和异常类型频率，通过Loess局部加权回归法填充缺失的采食量数据。

公开(公告)号：CN116694789B

公开(公告)日：2024-06-14

申请号：CN202310559526.2

申请日：2023-05-18

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 郭鑫 ,  康浩然 ,  张永宁 ,  杨汉春 ,  盖新娜 ,  周磊 ,  韩军

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明提供一种检测猪格拉瑟氏菌的RAA引物对和探针组合及试剂盒，可以简单、快速、灵敏、特异性检测使猪格拉瑟氏菌。所提供的RAA引物对和探针，其中引物对中上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1，下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:2，所述的探针的核苷酸序列为SEQ ID NO:3。本发明所提供的基于上述引物对和探针用于检测猪格拉瑟氏菌的RAA试剂盒，只需在42℃恒温条件下反应30min即可完成，整个反应过程对仪器设备要求低，耗时短，操作简单，结果可实现肉眼可视化，更适用于基层现场诊断和即时检测，真正意义上实现了便携式快速核酸检测，可为格拉瑟氏病的快速诊断、实时监测防控提供技术支持。

公开(公告)号：CN113969267B

公开(公告)日：2024-02-27

申请号：CN202111369459.5

申请日：2021-11-15

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩军 ,  高鹏 ,  杨汉春 ,  刘园园 ,  张永宁 ,  周磊 ,  盖新娜 ,  郭鑫

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/86 ,  C07K14/005 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及病毒基因工程技术领域，具体地，涉及一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1β‑VS19GG，并进一步公开其构建方法与应用。本发明所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1β‑VS19GG，利用反向遗传操作技术，通过将高致病性PRRSV毒株JXwn06在非结构蛋白nsp1β的第19位缬氨酸和20位丝氨酸均突变为甘氨酸，进而构建得到所需突变病毒。所述突变病毒不仅遗传性状稳定，并且由于关键氨基酸位点的突变明显改变了亲本毒株诱导炎症反应的能力，使得所述突变病毒感染宿主细胞诱导强烈炎症反应，可以作为疫苗研发的候选毒株，为设计增强细胞免疫疫苗提供新的思路。

公开(公告)号：CN113583980B

公开(公告)日：2023-12-12

申请号：CN202110989500.2

申请日：2021-08-26

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 杨汉春 ,  刘园园 ,  韩军 ,  郭鑫 ,  周磊 ,  盖新娜 ,  张永宁

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/40 ,  C12N15/85 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于病毒基因工程技术领域，具体涉及一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1α‑G90A，并进一步公开其应用。本发明所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1α‑G90A，通过将高致病性的PRRSV毒株JXwn06非结构蛋白nsp1α的第90位氨基酸由甘氨酸突变为丙氨酸获得突变病毒，获取了诱导降解其靶细胞‑猪肺泡巨噬细胞(PAMs)PAMs细胞表面SLA‑I分子功能受损的突变毒株。该突变病毒感染宿主细胞后，可诱导降解靶细胞表面SLA‑I分子的功能严重受损，且该突变病毒遗传性质表现稳定，可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株，用于预防猪繁殖与呼吸综合征，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN117159708A

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN202210581036.8

申请日：2022-05-25

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 周磊 ,  王扬 ,  杨汉春 ,  盖新娜 ,  韩军 ,  张永宁 ,  郭鑫

IPC: A61K45/00 ,  A61K31/4709 ,  A61K31/496 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  C12Q1/70

Abstract: 本发明涉及病毒抑制剂技术领域，尤其涉及靶向3CLpro的化合物在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用。本发明以3CLpro作为靶点，综合筛选针对猪繁殖与呼吸综合征病毒和冠状病毒的多种化合物，发现靶向3CLpro的化合物具备不同程度的猪繁殖与呼吸综合征病毒和冠状病毒的抑制效果，尤其是西咪匹韦、LLY‑507和盐酸氟哌噻吨，这三种化合物均具有显著的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性，并且除了靶向3CLpro之外，LLY‑507和盐酸氟哌噻吨可能还作用于细胞上的其他靶点来抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒的复制。本发明提供的三种化合物在抗PRRSV药物的开发上具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN114778852B

公开(公告)日：2023-09-01

申请号：CN202210447079.7

申请日：2022-04-26

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩军 ,  赵全红 ,  孔璨 ,  杨汉春 ,  周磊 ,  盖新娜 ,  张永宁 ,  郭鑫

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543 ,  C12N15/70 ,  C12N15/57 ,  C12N9/50

Abstract: 本发明公开了一种检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法，该方法针对PRRSV JXwn06PLP2(46～323)基因序列设计特异性引物，构建原核表达质粒pET28a(+)‑PLP2‑StrepⅡ，在E.coli BL21中实现了高效可溶性表达。经过亲和层析柱与Superdex75分子筛纯化，获得了高纯度PLP2重组蛋白，将其作为包被抗原，建立了检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法。本发明发现PLP2可作为一种新的PRRSV诊断抗原，应用其建立的抗体检测方法重复性和特异性好，能够在PRRSV感染仔猪后第3～5天检测到PLP2抗体，可用于PRRS抗体检测和早期诊断。

公开(公告)号：CN116656615A

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202310175226.4

申请日：2023-02-28

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩军 ,  杨汉春 ,  高鹏 ,  周磊 ,  张永宁 ,  盖新娜 ,  郭鑫 ,  陈艳红

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/86 ,  C12N15/65 ,  C12N7/01 ,  C12R1/91 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了支持非洲猪瘟病毒体外高效增殖的野猪肺细胞系WSL‑R4及其建立方法，属于非洲猪瘟病毒技术领域。本发明采用有限稀释法对野猪肺细胞进行亚克隆，最终获得一株能够支持非洲猪瘟病毒高效复制单细胞克隆株WSL‑R4，该细胞株性能稳定，能够支持非洲猪瘟病毒野毒株及缺失毒株复制，病毒滴度最高可达106TCID50/mL，在非洲猪瘟病毒基础研究与疫苗生产中具有很好的应用价值。