一种工程菌及其在酪醇生产中的应用

    公开(公告)号:CN109370967B

    公开(公告)日:2021-11-23

    申请号:CN201811234765.6

    申请日:2018-10-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种工程菌及其在酪醇生产中的应用,属于生物工程技术领域。本发明的基因工程菌导入了L‑α‑氨基酸转氨酶、L‑谷氨酸脱氢酶、α‑酮酸脱羧酶、醇脱氢酶,可应用于生物合成酪醇。本发明还公开了重组大肠杆菌基因重组菌的构建方法和应用,进一步地,通过敲除或强化表达大肠杆菌基因组上的相将关基因促进底物的转运及减少产物的分解,提高了重组菌的生产效率。利用本发明的重组菌转化生产酪醇的方法,具有操作简单,成本低,产物合成效率高的特点,具有良好的产业化前景。

    一种工程菌及其在生产丙酮酸中的应用

    公开(公告)号:CN108949656B

    公开(公告)日:2021-03-26

    申请号:CN201810352732.5

    申请日:2018-04-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种工程菌及其在生产丙酮酸中的应用,属于生物工程技术领域。本发明的重组大肠杆菌同时表达了外源L‑乳酸脱氢酶和NADH氧化酶,并在宿主大肠杆菌的基础上敲除了丙酮酸吸收基因,进一步还强化表达了乳酸转运基因、丙酮酸转运基因、NAD合成基因。本发明在在改造大肠杆菌转运及辅酶合成体系的基础上,构建了双酶共表达的工程菌,实现了丙酮酸的高效生产并减少杂质生成。

    整合有氨基酸氧化酶和葡萄糖脱氢酶的大肠杆菌

    公开(公告)号:CN112111442A

    公开(公告)日:2020-12-22

    申请号:CN202011036896.0

    申请日:2020-09-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了整合有氨基酸氧化酶和葡萄糖脱氢酶的大肠杆菌,属于生物工程技术领域。本发明采用合成生物学技术手段多位点多拷贝的将L‑氨基酸氧化酶和葡萄糖脱氢酶基因整合到大肠杆菌染色体,使大肠杆菌具有更好的生长特性,高密度培养的菌株比原始菌株最终量可提高30%以上。将所述工程菌应用于丹参素的生产,丹参素产量可达87.46mM,同时还能够很好地生产羟基酪醇,羟基酪醇产量可达54.43mM。

    一种工程菌及其在生产α-酮戊二酸中的应用

    公开(公告)号:CN108949654B

    公开(公告)日:2020-12-01

    申请号:CN201810352696.2

    申请日:2018-04-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种工程菌及其在生产α‑酮戊二酸中的应用,属于生物工程技术领域。本发明的能低成本生产纯α‑酮戊二酸的重组大肠杆菌,同时表达了外源L‑谷氨酸脱氢酶和NADH氧化酶,并在宿主大肠杆菌的基础上敲除了α‑酮戊二酸吸收基因;进一步地,还强化表达了谷氨酸转运基因、α‑酮戊二酸转运基因、NAD合成基因的一种或者多种。本发明的重组菌用于生产α‑酮戊二酸,过程简单、杂质少,具有重要的工业应用价值。

    一种生物法合成亚精胺的方法

    公开(公告)号:CN111996220A

    公开(公告)日:2020-11-27

    申请号:CN201910447125.1

    申请日:2019-05-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种生物法合成亚精胺的方法,属于生物工程技术领域。本发明构建了基因工程菌,能够以高丝氨酸和腐胺(丁二胺)为底物合成亚精胺。具体地,利用高丝氨酸脱氢酶将高丝氨酸脱氢生成天冬半醛和NADH,羧基亚精胺脱氢酶以NADH为辅酶将天冬半醛和腐胺合成为羧基亚精胺,并实现辅酶再生生成NAD,最后,羧基亚精胺脱羧酶将羧基亚精胺脱羧生成亚精胺。本发明提供的生物合成亚精胺的方法,生产过程简单且原料易得成本低,具有良好的工业化应用前景。

    一种可催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体

    公开(公告)号:CN109456952B

    公开(公告)日:2020-08-04

    申请号:CN201811449197.1

    申请日:2018-11-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种可催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成L,159位置处的Y突变成F,252位置处的T突变成A,得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32L/Y159F/T252A催化效率Kcat/Km为0.75min‑1·mM‑1,催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时,突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为78.95%。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。

    一种催化效率提高的ω-转氨酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN109486785B

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN201811450486.3

    申请日:2018-11-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变,即将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成L,得到了一种催化效率得到提高的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32L催化效率Kcat/Km提高了21.84倍,催化(R)‑phenethylamine生成acetophenone时,突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了7.72倍。本发明得到的突变体比天然ω‑转氨酶更适用于在工业上的应用。

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