一种利用短单链DNA抑制昆虫基因表达的方法

    公开(公告)号:CN107287244B

    公开(公告)日:2020-02-07

    申请号:CN201710578618.X

    申请日:2017-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种利用短单链DNA抑制昆虫基因表达的方法,依次包括下述步骤:1)确定昆虫靶标基因,PCR扩增获得其DNA序列并测序;2)根据步骤1)得到的DNA序列设计短单链DNA片段;3)将步骤2)得到的短单链DNA片段稀释后利用微量注射的方法注射入昆虫体内;4)对步骤3)的昆虫的靶标基因的表达进行RT‑qPCR的检测,确定其靶标基因的相对表达水平。

    一种组培用油菜种子的灭菌方法

    公开(公告)号:CN109220788A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201810874260.X

    申请日:2018-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种组培用油菜种子的灭菌方法,先将种子放在水中浸泡1 h,去除浮在水面上的种子,自来水冲洗2遍,转移至超净工作台内,75%酒精处理消毒1 min,用3%NaClO灭菌种子15min(期间保持晃动转态),再用无菌水冲洗5-6次,最后将种子转移至无菌滤纸上晾干即可。其中,3%NaClO是从0%-30%NaClO灭菌种子效果中筛选出的最佳灭菌浓度,灭菌15min是用最佳浓度3%NaClO灭菌种子10min-30min中筛选到的最佳灭菌时间。本发明可以获得最多的健康苗用于转基因油菜的生产,从而提高油菜基因转化的成功率。

    一种利用短单链DNA抑制昆虫基因表达的方法

    公开(公告)号:CN107287244A

    公开(公告)日:2017-10-24

    申请号:CN201710578618.X

    申请日:2017-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种利用短单链DNA抑制昆虫基因表达的方法,依次包括下述步骤:1)确定昆虫靶标基因,PCR扩增获得其DNA序列并测序;2)根据步骤1)得到的DNA序列设计短单链DNA片段;3)将步骤2)得到的短单链DNA片段稀释后利用微量注射的方法注射入昆虫体内;4)对步骤3)的昆虫的靶标基因的表达进行RT-qPCR的检测,确定其靶标基因的相对表达水平。

    一种人工大量饲养光滑巨螯螨的方法

    公开(公告)号:CN104798732A

    公开(公告)日:2015-07-29

    申请号:CN201510235343.0

    申请日:2015-05-11

    Abstract: 本发明涉及一种人工大量饲养光滑巨螯螨的方法,是在温度18-30℃,相对湿度65-100%,无光照的环境下,利用粪蚊、蕈蚊、蚤蝇等双翅目害虫人工饲养捕食螨的方法。具体操作首先是将地下球茎、根茎作物作为双翅目害虫的食物,切块放入饲养容器内;接入双翅目害虫,经7-14d的繁殖,再接入光滑巨螯螨;饲养每间隔14-21d后更换底部被取食的残渣并添加新鲜的地下球茎、根茎作物,饲养14-49d后,达到光滑巨螯螨的大量饲养。本发明提供一种简易、高效、实用的方法生产光滑巨螯螨,本方法饲养方法还可应用到其他巨螯螨科Macrochelidae以及厉螨科Laelapidae等捕食性螨类的饲养。

    一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂及其配制方法

    公开(公告)号:CN103271034B

    公开(公告)日:2014-04-30

    申请号:CN201310225737.9

    申请日:2013-06-07

    Abstract: 本发明公开了一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂及其配制方法,以液体石蜡为溶剂,将100μl/ml的苯甲醛、法呢烯、苯乙腈、顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、桉树脑和壬醛进行相同比例混合而成。该引诱剂是从植物挥发性物质中筛选出来的特异性组分,具有选择性高、针对性强的特点。通过使用该引诱剂,使小菜蛾绒茧蜂提早进入目标防治田内,并进入搜索状态,不往外逃散,增强其寄主搜索和攻击效率,提高其寄生率,对于提高小菜蛾绒茧蜂的控害作用,改善菜田害虫治理等具有重要意义。

    一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂及其配制方法

    公开(公告)号:CN103271034A

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201310225737.9

    申请日:2013-06-07

    Abstract: 本发明公开了一种小菜蛾绒茧蜂的引诱剂及其配制方法,以液体石蜡为溶剂,将100μl/ml的苯甲醛、法呢烯、苯乙腈、顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、桉树脑和壬醛进行相同比例混合而成。该引诱剂是从植物挥发性物质中筛选出来的特异性组分,具有选择性高、针对性强的特点。通过使用该引诱剂,使小菜蛾绒茧蜂提早进入目标防治田内,并进入搜索状态,不往外逃散,增强其寄主搜索和攻击效率,提高其寄生率,对于提高小菜蛾绒茧蜂的控害作用,改善菜田害虫治理等具有重要意义。

    一种中肠细菌介导的小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的RNAi方法及其应用

    公开(公告)号:CN117106815A

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202311072514.3

    申请日:2023-08-24

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种中肠细菌介导的小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的RNAi方法。所述RNAi方法为:构建表达小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的dsRNA的质粒,转入中肠细菌的RNaseIII缺陷突变体中,得到表达小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的dsRNA的工程菌;将表达小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的dsRNA的工程菌饲喂小菜蛾,可抑制小菜蛾体内精氨酸激酶基因PxAK的表达,导致小菜蛾生长发育受阻并产生致死效应。本发明为小菜蛾的防控提供新途径,也为RNAi理论和技术在害虫防控方面提供借鉴。

    昆虫趋光或是光选择行为反应装置及其工作方法

    公开(公告)号:CN111066737A

    公开(公告)日:2020-04-28

    申请号:CN202010110633.3

    申请日:2020-02-24

    Abstract: 本发明昆虫趋光或是光选择行为反应装置及其工作方法,该装置包括相邻并排设置的第一反应室和第二反应室,以及贴近第一反应室、第二反应室中间设置的栖息室,所述第一反应室和第二反应室除相互邻接共用的壁面外其它各个壁面均由透明板制成,所述栖息室除与第一反应室、第二反应室邻接的壁面外其它各个壁面均由不透光板制成,所述第一反应室与第二反应室相互邻接所共用的壁面为不透光板,第一反应室、第二反应室与栖息室邻接壁面的板能够往外侧抽拉,具体可根据需要选择透明板或是不透光板,所述栖息室远离第一反应室、第二反应室的壁面的不透光板能够往外侧抽拉,所述第一反应室和第二反应室的透明壁面的外旁侧设有可更换的光源。本发明有利于判断不同昆虫对不同光的敏感度。

    沉默小菜蛾整合素β1亚基基因Pxβ的RNAi载体及其应用

    公开(公告)号:CN110511957A

    公开(公告)日:2019-11-29

    申请号:CN201910803541.0

    申请日:2019-08-28

    Abstract: 本发明属于农业生物技术领域,涉及沉默小菜蛾整合素β1亚基基因Pxβ的RNAi载体及其应用。选取小菜蛾整合素β1亚基基因Pxβ中497 bp的保守序列片段为靶标序列,利用Gateway技术将该靶标序列片段以正反两个方向插入植物表达载体pHellsgate-4中,构建表达靶标序列dsRNA结构的植物表达RNAi载体;通过农杆菌介导转化法,将该载体插入植物的基因组,获得表达靶标序列dsRNA结构的转基因植株。接虫试验表明转基因植株使小菜蛾靶标基因Pxβ的转录水平下调了44.7%-49.8%,同时也显著地降低小菜蛾化蛹率,减轻了蛹重,从而导致死亡率升高15.0%,为小菜蛾的防治提供了一种新方法。

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