一种利用短单链DNA抑制昆虫基因表达的方法

    公开(公告)号:CN107287244B

    公开(公告)日:2020-02-07

    申请号:CN201710578618.X

    申请日:2017-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种利用短单链DNA抑制昆虫基因表达的方法,依次包括下述步骤:1)确定昆虫靶标基因,PCR扩增获得其DNA序列并测序;2)根据步骤1)得到的DNA序列设计短单链DNA片段;3)将步骤2)得到的短单链DNA片段稀释后利用微量注射的方法注射入昆虫体内;4)对步骤3)的昆虫的靶标基因的表达进行RT‑qPCR的检测,确定其靶标基因的相对表达水平。

    一种组培用油菜种子的灭菌方法

    公开(公告)号:CN109220788A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201810874260.X

    申请日:2018-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种组培用油菜种子的灭菌方法,先将种子放在水中浸泡1 h,去除浮在水面上的种子,自来水冲洗2遍,转移至超净工作台内,75%酒精处理消毒1 min,用3%NaClO灭菌种子15min(期间保持晃动转态),再用无菌水冲洗5-6次,最后将种子转移至无菌滤纸上晾干即可。其中,3%NaClO是从0%-30%NaClO灭菌种子效果中筛选出的最佳灭菌浓度,灭菌15min是用最佳浓度3%NaClO灭菌种子10min-30min中筛选到的最佳灭菌时间。本发明可以获得最多的健康苗用于转基因油菜的生产,从而提高油菜基因转化的成功率。

    一种利用短单链DNA抑制昆虫基因表达的方法

    公开(公告)号:CN107287244A

    公开(公告)日:2017-10-24

    申请号:CN201710578618.X

    申请日:2017-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种利用短单链DNA抑制昆虫基因表达的方法,依次包括下述步骤:1)确定昆虫靶标基因,PCR扩增获得其DNA序列并测序;2)根据步骤1)得到的DNA序列设计短单链DNA片段;3)将步骤2)得到的短单链DNA片段稀释后利用微量注射的方法注射入昆虫体内;4)对步骤3)的昆虫的靶标基因的表达进行RT-qPCR的检测,确定其靶标基因的相对表达水平。

    一种利用与RNAi工程菌混配提高Bt杀虫活性的方法

    公开(公告)号:CN111793639B

    公开(公告)日:2022-05-24

    申请号:CN202010626736.5

    申请日:2020-07-02

    Abstract: 本发明属于农业生物技术领域,涉及一种利用与RNAi工程菌混配提高Bt杀虫活性的方法,选取能够干扰小菜蛾精氨酸激酶基因的苏云金芽孢杆菌工程菌8010AKi和BMB171AKi,将工程菌分别与苏云金芽孢杆菌8010按比例混合后,喂饲小菜蛾。试验表明当8010与8010AKi以9:1的比例,与BMB171AKi以7:3的比例混合喂饲小菜蛾,均能显著提高苏云金芽孢杆菌8010对小菜蛾的致死率,小菜蛾的死亡率分别达到了68.9%和73.1%,说明按一定比例的混配确实能提高Bt的杀虫活性,这为今后应用Bt生物农药制剂拓展了方向,同时也为应用RNAi工程菌提供了新思路。

    一种促进油菜生根的培养基

    公开(公告)号:CN108834901A

    公开(公告)日:2018-11-20

    申请号:CN201810874255.9

    申请日:2018-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种促进油菜生根的培养基,包括以下组分:MS 4.43 g/L、蔗糖30 g/L、琼脂粉8 g/L、AgNO3 5 mg/L和0.1-2 mg/L NAA或IBA,pH值为5.8。通过比较油菜无根苗在添加了0.1-2 mg/L NAA或IBA的生根培养基的生根效果后,筛选到0.1 mg/L NAA为油菜生根最佳添加激素和浓度,生根培养24日后,生根率最高,为92.5%,须根数最多,主根较长,且于切割位点处生根。本发明可以解决油菜生根培养基添加激素不统一,生根效率参差不齐的情况,通过提高油菜生根效率,从而提高转基因油菜的成功率。

    一种利用与RNAi工程菌混配提高Bt杀虫活性的方法

    公开(公告)号:CN111793639A

    公开(公告)日:2020-10-20

    申请号:CN202010626736.5

    申请日:2020-07-02

    Abstract: 本发明属于农业生物技术领域,涉及一种利用与RNAi工程菌混配提高Bt杀虫活性的方法,选取能够干扰小菜蛾精氨酸激酶基因的苏云金芽孢杆菌工程菌8010AKi和BMB171AKi,将工程菌分别与苏云金芽孢杆菌8010按比例混合后,喂饲小菜蛾。试验表明当8010与8010AKi以9:1的比例,与BMB171AKi以7:3的比例混合喂饲小菜蛾,均能显著提高苏云金芽孢杆菌8010对小菜蛾的致死率,小菜蛾的死亡率分别达到了68.9%和73.1%,说明按一定比例的混配确实能提高Bt的杀虫活性,这为今后应用Bt生物农药制剂拓展了方向,同时也为应用RNAi工程菌提供了新思路。

    一种利用PCR产物抑制昆虫基因表达的方法

    公开(公告)号:CN107446953B

    公开(公告)日:2020-09-15

    申请号:CN201710578602.9

    申请日:2017-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种利用PCR产物抑制昆虫基因表达的方法,依次包括下述步骤:1)确定昆虫靶标基因,PCR扩增获得该基因的全基因序列并测序;2)根据步骤1)得到的DNA序列确定实验的DNA片段,PCR扩增并纯化DNA片段;3)将步骤2)得到的DNA片段利用微量注射的方法注射入昆虫体内;4)对步骤3)的昆虫进行RT‑qPCR的检测,确定其靶标基因的相对表达水平。

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