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公开(公告)号：CN110511958A
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201910803637.7
申请日：2019-08-28
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，涉及一种可以在转基因植物中同时表达小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK和整合素β1亚基基因Pxβ双链RNA（dsRNA）结构的RNAi载体，通过农杆菌介导的方法将该RNAi载体导入植物基因组，从而获得抗小菜蛾的转基因植株。本发明通过接虫试验，表明转基因植株可以同时沉默小菜蛾PxAK和Pxβ基因26.6%-30.9%的转录表达水平，且小菜蛾幼虫发育历期显著延长，化蛹率降低，从而导致死亡率升高了22.5%，为小菜蛾的防治提供了一种新方法，也为害虫防治提供了新策略。
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公开(公告)号：CN110511957A
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201910803541.0
申请日：2019-08-28
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，涉及沉默小菜蛾整合素β1亚基基因Pxβ的RNAi载体及其应用。选取小菜蛾整合素β1亚基基因Pxβ中497 bp的保守序列片段为靶标序列，利用Gateway技术将该靶标序列片段以正反两个方向插入植物表达载体pHellsgate-4中，构建表达靶标序列dsRNA结构的植物表达RNAi载体；通过农杆菌介导转化法，将该载体插入植物的基因组，获得表达靶标序列dsRNA结构的转基因植株。接虫试验表明转基因植株使小菜蛾靶标基因Pxβ的转录水平下调了44.7%-49.8%，同时也显著地降低小菜蛾化蛹率，减轻了蛹重，从而导致死亡率升高15.0%，为小菜蛾的防治提供了一种新方法。
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公开(公告)号：CN110438151A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910803596.1
申请日：2019-08-28
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，涉及一种可以在转基因植物中表达小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的双链RNA（dsRNA）结构的RNAi载体，通过农杆菌介导的方法将该RNAi载体导入植物基因组，从而获得抗小菜蛾的转基因植株。本发明通过接虫试验，表明转基因植株可以导致小菜蛾PxAK基因的转录水平下调66.5%-79.7%，从而降低了化蛹率，导致死亡率升高了17.5%，为小菜蛾的防治提供了一种新方法，也为害虫防治提供了新策略。
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公开(公告)号：CN116042616B
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202211499256.2
申请日：2022-11-28
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12N1/21 , A01K67/033 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了饲喂dsRNA抑制小菜蛾CYP6BG基因表达的方法，本方案通过选定具有预设特定功能的dsRNA片段，利用大肠杆菌HT115表达该特定dsRNA，其不仅工艺成本低廉，而且可以一次性表达针对多个基因的dsRNA，还兼具操作简便的优点；而在产物应用上，由于只需要将表达了dsRNA的菌液添加到饲料表面，通过饲喂的方式导入虫体，因此，在机理研究上对昆虫的伤害性也最小，可以广泛的推广用于快速筛选和昆虫抗药性相关的基因，为探索昆虫抗性的发展提供一种有效的研究手段；而其在用于昆虫治理时，使用的方式简单，能够具有较好的可行性，具有较好的应用推广价值。
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公开(公告)号：CN110438151B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN201910803596.1
申请日：2019-08-28
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，涉及一种可以在转基因植物中表达小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK的双链RNA（dsRNA）结构的RNAi载体，通过农杆菌介导的方法将该RNAi载体导入植物基因组，从而获得抗小菜蛾的转基因植株。本发明通过接虫试验，表明转基因植株可以导致小菜蛾PxAK基因的转录水平下调66.5%‑79.7%，从而降低了化蛹率，导致死亡率升高了17.5%，为小菜蛾的防治提供了一种新方法，也为害虫防治提供了新策略。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108834901A
公开(公告)日：2018-11-20
申请号：CN201810874255.9
申请日：2018-08-03
Applicant: 福建农林大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种促进油菜生根的培养基，包括以下组分：MS 4.43 g/L、蔗糖30 g/L、琼脂粉8 g/L、AgNO3 5 mg/L和0.1-2 mg/L NAA或IBA，pH值为5.8。通过比较油菜无根苗在添加了0.1-2 mg/L NAA或IBA的生根培养基的生根效果后，筛选到0.1 mg/L NAA为油菜生根最佳添加激素和浓度，生根培养24日后，生根率最高，为92.5%，须根数最多，主根较长，且于切割位点处生根。本发明可以解决油菜生根培养基添加激素不统一，生根效率参差不齐的情况，通过提高油菜生根效率，从而提高转基因油菜的成功率。
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公开(公告)号：CN116042616A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211499256.2
申请日：2022-11-28
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12N1/21 , A01K67/033 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了饲喂dsRNA抑制小菜蛾CYP6BG基因表达的方法，本方案通过选定具有预设特定功能的dsRNA片段，利用大肠杆菌HT115表达该特定dsRNA，其不仅工艺成本低廉，而且可以一次性表达针对多个基因的dsRNA，还兼具操作简便的优点；而在产物应用上，由于只需要将表达了dsRNA的菌液添加到饲料表面，通过饲喂的方式导入虫体，因此，在机理研究上对昆虫的伤害性也最小，可以广泛的推广用于快速筛选和昆虫抗药性相关的基因，为探索昆虫抗性的发展提供一种有效的研究手段；而其在用于昆虫治理时，使用的方式简单，能够具有较好的可行性，具有较好的应用推广价值。
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公开(公告)号：CN115786480A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211530967.1
申请日：2022-12-01
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12Q1/6869 , C12N15/89 , A01K67/033
Abstract: 本发明公开了一种基于小菜蛾成虫基因组DNA的粗提筛选PxPolycalin纯合突变品系的方法，包括如下步骤：1)注射sgRNA和Cas9蛋白混液至15min内产的小菜蛾卵中；2)待其正常羽化后与野生型品系进行交配，提取已产卵的G0代亲本成虫基因组DNA粗提液，并进行PCR扩增、测序；3)选择有突变的G0代子代(G1代)进行自交，保留亲本(G1代)突变类型一致的G2代个体即为纯合突变品系；本发明操作简单，大幅度减少了实验所用的时间，适用于大量昆虫样本的基因组DNA提取，尤其是基于CRISPR/Cas9技术筛选基因组纯合突变品系。此外，本发明所用到的试剂成本低廉，容易配制，保存方法简单，对操作人员友好。本发明的方法实用性广，能应用于多种昆虫不同组织/发育阶段基因组DNA的提取。
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公开(公告)号：CN110511958B
公开(公告)日：2020-09-08
申请号：CN201910803637.7
申请日：2019-08-28
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，涉及一种可以在转基因植物中同时表达小菜蛾精氨酸激酶基因PxAK和整合素β1亚基基因Pxβ双链RNA（dsRNA）结构的RNAi载体，通过农杆菌介导的方法将该RNAi载体导入植物基因组，从而获得抗小菜蛾的转基因植株。本发明通过接虫试验，表明转基因植株可以同时沉默小菜蛾PxAK和Pxβ基因26.6%‑30.9%的转录表达水平，且小菜蛾幼虫发育历期显著延长，化蛹率降低，从而导致死亡率升高了22.5%，为小菜蛾的防治提供了一种新方法，也为害虫防治提供了新策略。
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公开(公告)号：CN109220788A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201810874260.X
申请日：2018-08-03
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种组培用油菜种子的灭菌方法，先将种子放在水中浸泡1 h，去除浮在水面上的种子，自来水冲洗2遍，转移至超净工作台内，75%酒精处理消毒1 min，用3%NaClO灭菌种子15min（期间保持晃动转态），再用无菌水冲洗5-6次，最后将种子转移至无菌滤纸上晾干即可。其中，3%NaClO是从0%-30%NaClO灭菌种子效果中筛选出的最佳灭菌浓度，灭菌15min是用最佳浓度3%NaClO灭菌种子10min-30min中筛选到的最佳灭菌时间。本发明可以获得最多的健康苗用于转基因油菜的生产，从而提高油菜基因转化的成功率。
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