公开(公告)号：CN106676199A

公开(公告)日：2017-05-17

申请号：CN201710027687.1

申请日：2017-01-16

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王乃东 ,  张佳鑫 ,  杨毅 ,  王爱兵 ,  邹亚文 ,  屠迪 ,  杨凌宸 ,  邓治邦 ,  张南乡子

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2531/125

Abstract: 本发明公开了一种用于检测犬圆环病毒的引物和高效CL‑RCA‑PCR检测试剂盒及方法，所述引物为DogCV‑D‑F：GTGCTTCACCATCAATAATCCTACT和DogCV‑D‑R：AGACTGAGCCGCCGATAGAG；所述试剂盒中包含上述引物。本发明中犬腹泻物样本仅采用DogCV引物PCR方法进行检测。该引物、CL‐RCA‐PCR试剂盒及检测方法的准确性高、特异性强、灵敏性高。

公开(公告)号：CN106399371A

公开(公告)日：2017-02-15

申请号：CN201610823307.0

申请日：2016-09-14

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 王爱兵 ,  王乃东 ,  杨毅 ,  刘谭彬 ,  湛洋 ,  雷新诺 ,  刘伟 ,  杨凌宸 ,  雷红宇

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N15/8509 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/105 ,  A01K2267/03

Abstract: 本发明提供了一种构建基因替代小鼠研究野生型和突变体非肌性肌球蛋白重链II功能的方法。本发明改造的mpNTKV-LoxP载体更适合于构建基因打靶载体特别是基因替代目的，新加入的Pac I和Swa I都是识别八个碱基的限制性内切酶，有利于较大DNA片段的插入。构建的MYH9基因替代(即内源MYH9基因被外源编码非肌性肌球蛋白重链II基因所替代)打靶载体通过电转导入小鼠ES细胞中，经过药物筛选，ES细胞单克隆挑选，Southern Blot或PCR鉴定，发生同源重组的阳性单克隆细胞率高达90％以上，易于获得所需细胞系。使用阳性ES细胞显微注射至小鼠囊胚获得MYH9基因替代嵌合体小鼠，并且该嵌合体小鼠可以交配传代，从而获得MYH9基因替代杂合子及纯合子后代。