公开(公告)号：CN112553173B

公开(公告)日：2022-05-31

申请号：CN202011529752.9

申请日：2020-12-22

Applicant: 江苏阿尔法药业股份有限公司

Inventor： 陈本顺 ,  李大伟 ,  何伟 ,  石利平 ,  徐春涛 ,  钱若灿 ,  叶金星 ,  张维冰 ,  万新强 ,  尹斌 ,  徐秋斌

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及医药化学领域，特别是涉及药物中间体的制备领域，更为具体的说是涉及野生氧化酶突变体及其制备方法和应用。所述野生氧化酶突变体为NADH依赖型氧化酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用本发明公开的野生氧化酶突变体能够高效氧化生成(4R‑cis)‑6‑甲醛基‑2,2二甲基‑1,3‑二氧六环‑4‑乙酸叔丁酯。不仅反应条件温和，而且在辅酶系统参与下可以达到无副产物产生的效果，对环境友好，是一种经济、高效的制备方法。

公开(公告)号：CN114457099A

公开(公告)日：2022-05-10

申请号：CN202111556110.2

申请日：2021-12-18

Applicant: 江苏阿尔法药业股份有限公司

Inventor： 陈本顺 ,  李大伟 ,  徐春涛 ,  何伟 ,  尹强 ,  张维冰 ,  邱磊 ,  江涛 ,  尹斌

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，尤其是一种索马鲁肽核心肽链的生物发酵制备方法，所述核心肽链为Lys26Arg34GLP‑1(9‑37)、Lys26Arg34GLP‑1(10‑37)或Lys26Arg34GLP‑1(11‑37)；具体方法为，通过将核心肽链与融合蛋白所需的内切酶或其突变体耦联获得融合蛋白DNA序列，然后构建融合蛋白的表达载体，载入表达细胞，融合蛋白表达后获得包涵体，复性纯化后酶切获得产物。该方法相较于将酶切与复性同时进行，无需额外添加内切酶，成本低，经济高效，且对环境更加友好。

公开(公告)号：CN113512569A

公开(公告)日：2021-10-19

申请号：CN202110272153.1

申请日：2021-03-12

Applicant: 江苏阿尔法药业股份有限公司

Inventor： 陈本顺 ,  叶金星 ,  石利平 ,  张维冰 ,  何伟 ,  徐春涛 ,  程瑞华 ,  马跃跃 ,  尹斌 ,  陆波

IPC: C12P13/00 ,  C07C221/00 ,  C07C225/16

Abstract: 本发明涉及生物制药技术领域，尤其是一种洛匹那韦中间体酶催化合成方法，包括以下步骤：1)化合物Ⅳ与三氟乙酸在溶剂中反应，制得化合物Ⅲ；然后向反应瓶中加入碳酸氢钠、水、溶剂和化合物Ⅲ，开启搅拌，降温至‑5～5℃左右，向反应瓶内加入溴化钾和Tempo，滴加次10％氯酸钠溶液，TLC监控反应体系；反应完全后，加入硫代硫酸钠溶液，搅拌，水层用溶剂萃取，合并有机层，浓缩至干，重结晶，析晶后抽滤，干燥，得到化合物II；2)以化合物II为底物，在酮羰基还原酶、辅酶、酶循环氢供体、辅酶循环酶、助溶剂和缓冲液的存在下，进行生物催化反应生成洛匹那韦中间体，即化合物I。本发明的合成方法反应条件温和，对环境友好，实现了手性中间体的绿色合成。