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公开(公告)号:CN111394329A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010365349.0
申请日:2018-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体T171A及其应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明通过对环糊精葡萄糖基转移酶进行突变,得到了环糊精葡萄糖基转移酶歧化活力更高的突变体。突变体T171A的摇瓶发酵酶歧化活力分别为野生酶的1.22倍。本发明对环糊精葡萄糖基转移酶工业化生产具有一定意义,并提高了该酶的在食品、医药、化工行业中的应用潜力。
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公开(公告)号:CN106190880B
公开(公告)日:2020-03-24
申请号:CN201610574252.4
申请日:2016-07-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了高产麦芽寡糖基海藻糖合成酶的基因工程菌及其应用,属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明以pPIC3.5k为载体,以Pichia pastoris KM71为表达宿主,表达Sulfolobus acidocaldarius来源的麦芽寡糖基海藻糖水解酶,得到重组菌pPIC3.5k‑treY/P.pastoris。发酵产麦芽寡糖基海藻糖合成酶活可达3128.7U·mL‑1,远高于本发明构建的其他重组毕赤酵母或者大肠杆菌,具有工业应用价值。
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公开(公告)号:CN110592059A
公开(公告)日:2019-12-20
申请号:CN201910853186.8
申请日:2017-09-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明提供了一系列酶活提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体。突变体T439A、T439A/Q585R、T439A/G586D麦芽寡糖基海藻糖合成酶的酶活分别为野生酶的2.1倍、2.4倍、2.7倍。
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公开(公告)号:CN109456950A
公开(公告)日:2019-03-12
申请号:CN201811330680.8
申请日:2018-11-09
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1074 , C12N15/70 , C12P19/12 , C12Y204/01019
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体及其应用,属于酶工程技术领域。本发明对来源于Bacillus circulans的环糊精葡萄糖基转移酶的234位的甲硫氨酸进行定点突变,M234I、M234A、M234L和M234V突变体对麦芽糖的受体亲和力均比野生型提高了45.6%、34.7%、30.3%和36.9%,本发明的环糊精葡萄糖基转移酶突变体能够应用于海藻糖制备中,使海藻糖的转化率得到进一步的提高。
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公开(公告)号:CN109022396A
公开(公告)日:2018-12-18
申请号:CN201811002140.7
申请日:2018-08-30
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/28 , C12N15/56 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12P19/14 , C12P19/04 , C12P19/02 , C12P19/12 , C12R1/125
CPC classification number: C12N9/2417 , C12P19/02 , C12P19/04 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12Y302/01001
Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的α‑淀粉酶突变体及其应用,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的突变体是通过将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的α‑淀粉酶的第82位氨基酸由赖氨酸突变为谷氨酸或将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的α‑淀粉酶的第405位氨基酸由丝氨酸突变为精氨酸或同时将将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的α‑淀粉酶的第82位氨基酸由赖氨酸突变为谷氨酸以及第405位氨基酸由丝氨酸突变为精氨酸得到的;将以编码本发明的突变体的基因为目的基因、以pHY300PLK为表达载体、以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WS5为表达宿主构建得到的重组枯草芽孢杆菌工程菌发酵48h,可使得发酵液中α‑淀粉酶的酶活提高至474.7U/mL。
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公开(公告)号:CN108753746A
公开(公告)日:2018-11-06
申请号:CN201810568782.7
申请日:2018-06-05
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12N15/70 , C12P19/12 , C12P19/18 , C12Y204/01245
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体,属于酶工程以及蛋白质工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的一个氨基酸位点进行突变,得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶相比更高的热稳定性。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体在50℃的半衰期比野生型增加41h,是野生型的2倍,即本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的稳定性较野生型提高了2倍。
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公开(公告)号:CN107058201A
公开(公告)日:2017-08-18
申请号:CN201710058443.X
申请日:2017-04-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N9/10 , C12N9/24 , C12N15/54 , C12N15/56 , C12P19/16 , C12P19/14 , C12P19/12 , C12R1/19
CPC classification number: C12N9/1051 , C12N9/2402 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12P19/16 , C12Y204/01245 , C12Y302/01141
Abstract: 本发明公开了一种提高MTSase和MTHase产量的方法,属于发酵工程和酶工程技术领域。本发明提供了一种表达MTSase和/或MTHase的重组大肠杆菌,以此重组大肠杆菌发酵生产MTSase和MTHase,并应用于制备海藻糖,具有比较好的效果。本发明的优点在于首次将Athrobacter ramosus S34来源的MTSase和MTHase基因在E.coli BL21(DE3)中表达,且经发酵优化酶产量较高。同时创造性地将MTSase和MTHase同时在一株菌中表达,并且经过发酵优化具有较高产量。重组两种酶共同作用生产海藻糖,产海藻糖水平稳定、原料来源广泛,生产成本较低。
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公开(公告)号:CN103757960B
公开(公告)日:2017-01-25
申请号:CN201310749747.2
申请日:2013-12-31
Applicant: 江南大学
CPC classification number: Y02W30/648
Abstract: 本发明公开了一种角质酶在造纸工业中的应用,包括以下:采用角质酶控制二次胶黏物、脱墨或以聚丙烯酸酯为底物的模拟白水处理,属于造纸废水处理领域。角质酶为来源于Thermobifidafusca,氨基酸序列如Genbank编号AAZ54920.1或AAZ54921.1所示;或氨基酸序列与Thermobifidafusca的角质酶至少有90%同源性且具有角质酶活性的酶,将其添加到各种要处理的水体中,利用角质酶对设备中的二次胶黏物进行处理、脱墨、对循环白水进行处理,相对于原有方法以及脂肪酶法效果好、成本低,提高产品质量和生产效率,降低单位产品的能源消耗,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN105969713A
公开(公告)日:2016-09-28
申请号:CN201610343218.6
申请日:2016-05-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产麦芽寡糖基海藻糖水解酶的基因工程菌及其应用,属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明以E.coli Origami(DE3)为宿主,构建了高产麦芽寡糖基海藻糖水解酶的基因工程菌pET‑32a(+)‑treZ/E.coli Origami(DE3)。以该菌株为生产菌株在发酵罐进行发酵产酶,酶活力可达204.0U·mL‑1,约为摇瓶发酵的4.9倍。本发明降低了麦芽寡糖基海藻糖水解酶生产成本,为实现海藻糖的工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号:CN105907816A
公开(公告)日:2016-08-31
申请号:CN201610438468.8
申请日:2016-06-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶法生产大元环糊精的方法,属于环糊精生产技术领域。本发明是利用4?α?糖基转移酶以天然淀粉为底物生产大元环糊精,填补了该技术领域内的空白,为大元环糊精大规模的生物法生产奠定了基础;本发明方法总的反应周期短,只需要12小时;具有生产成本低、产品纯度高、工艺流程简单、生产周期短等诸多优点。
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