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公开(公告)号:CN110093392A
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201910272325.8
申请日:2019-04-04
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯微生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种四霉素A高产菌株YB101及其筛选方法和发酵生产方法。本发明对化学诱变复合紫外诱变处理后的大量菌株进行筛选时,利用多孔板培养技术并结合酶标仪检测结合于一体的简便、快速、精准、高效的高通量筛选技术应用于筛选高产目标产物的活性菌株,从而得到高产TMA活性菌株。本发明因此能够大大减轻工作量,提高筛选效率,并且操作程序简单,方法稳定,重现性好。在发酵培养过程中,利用优化的发酵条件,向发酵培养液中加入甘油,其最佳添加量的体积比为8.0%,用此含有甘油的发酵培养液对白色链霉菌进行发酵培养,通过优化发酵条件,最终检测TMA在发酵液中的产量为960.0μg/mL,相比菌株YB101的产量385.0μg/mL,提高了2.5倍。
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公开(公告)号:CN112877448B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202011615711.1
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Inventor: 丁郁 , 吴清平 , 王涓 , 相欣然 , 张菊梅 , 薛亮 , 陈谋通 , 吴诗 , 曾海燕 , 张友雄 , 韦献虎 , 庞锐 , 雷涛 , 叶青华 , 杨小鹃 , 张淑红 , 陈惠元 , 于鹏飞 , 余树波 , 陈鲁
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及5株具有我国自主知识产权的、符合国内传播规律的蜡样芽胞杆菌标准菌株,可用作食品、药品、临床检验等不同领域的标准参考菌株。其保藏号分别为:GDMCC 60865、GDMCC 60866、GDMCC 60867、GDMCC 60868和GDMCC 60869。5株标准菌株具有典型的生理生化特征,且样品来源、遗传背景、耐药性、毒力基因等信息清晰,完全满足食品、药品、临床检验方面对于标准菌株的要求。本发明还涉及一组用于检测、鉴别上述5株标准菌株的特异性靶标基因以及对应的PCR引物。最后,本发明还提供了一种存活率高、特异性的蜡样芽胞杆菌冻干保护剂,可用于本发明标准菌株的长期储存。
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公开(公告)号:CN112646907B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202011619324.5
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Inventor: 庞锐 , 吴清平 , 雷涛 , 张菊梅 , 丁郁 , 薛亮 , 陈谋通 , 王涓 , 吴诗 , 叶青华 , 曾海燕 , 徐环 , 卢勉飞 , 蔡芷荷 , 杨小鹃 , 张淑红 , 陈惠元 , 陈鲁
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及3株具有我国自主知识产权的、符合国内传播规律的副溶血性弧菌标准菌株,可用作食品、药品、临床检验等不同领域的标准参考菌株。其保藏号分别为GDMCC 60870、GDMCC 60871和GDMCC 60872。3株标准菌株具有典型的生理生化特征,且样品来源、遗传背景、耐药性、毒力基因等信息清晰,完全满足食品、药品、临床检验等方面对于标准菌株的要求。本发明还涉及一组用于检测、鉴别上述3株标准菌株的特异性靶标基因以及对应的PCR产物。最后,本发明还提供了一种存活率高、特异性的副溶血性弧菌冻干保护剂,可用于本发明标准菌株的长期储存。
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公开(公告)号:CN112899378A
公开(公告)日:2021-06-04
申请号:CN202011610680.0
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Inventor: 曾海燕 , 吴清平 , 张菊梅 , 丁郁 , 陈谋通 , 薛亮 , 王涓 , 叶青华 , 吴诗 , 陈惠元 , 雷涛 , 古其会 , 杨小鹃 , 张淑红 , 卢勉飞 , 蔡芷荷 , 徐环 , 李程思 , 陈鲁
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及4株具有我国自主知识产权的、符合国内传播规律的克罗诺杆菌标准菌株,其保藏号分别为GDMCC 60861、GDMCC 60862、GDMCC 60863、GDMCC 60864。4株标准菌株具有典型的生理生化特征,且样品来源、遗传背景、耐药性等信息清晰,可用作食品、药品、临床检验等不同领域的标准参考菌株。本发明还涉及一组用于检测、鉴别上述4株标准菌株的特异性靶标基因以及对应的PCR产物。最后,本发明还提供了一种存活率高、特异性强的克罗诺杆菌冻干保护剂,可用于长期储存本发明标准菌株。
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公开(公告)号:CN112094328A
公开(公告)日:2020-12-18
申请号:CN202010994172.0
申请日:2020-09-21
Applicant: 华南农业大学 , 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
IPC: C07K14/205 , C07K1/14 , C07K1/34
Abstract: 本发明提供了一种空肠弯曲杆菌外膜囊泡的提取及纯化方法,包括以下方法:S1培养空肠弯曲杆菌,获得菌液;S2提取菌液外膜囊泡,获得粗提的外膜囊泡;S3采用Optiprep密度梯度离心法纯化粗提的外膜囊泡。本发明的将超速离心法和Optiprep密度梯度离心法相结合提取纯化空肠弯曲杆菌外膜囊泡,Optiprep梯度离心液浓度为35%的位置回收OMVs。本发明的方法还优化了空肠弯曲杆菌的培养基和培养条件,提高了空肠弯曲杆菌的生长率,这有利于获得更多的OMVs的,增加了OMVs的量。通过本发明的方法制备OMVs减少了杂质纯度更高。
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公开(公告)号:CN109609668A
公开(公告)日:2019-04-12
申请号:CN201910105795.5
申请日:2019-02-01
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种鼠伤寒沙门菌MLVA分型的检测引物组、试剂盒及应用。本发明针对鼠伤寒沙门菌4个具有较好分辨能力的VNTR位点设计特异性引物,建立多重PCR扩增检测方法,对各位点PCR扩增产物片段进行测序,采用本地Blast技术对测序结果进行分析,获得4个位点重复序列数目组合,对鼠伤寒沙门菌进行MLVA分型。本发明的方法可对鼠伤寒沙门菌进行稳定的分型检测,仅分析4个VNTR位点、一次多重PCR扩增检测、直观方便的本地Blast分析获得VNTR重复序列数目,其分辨率与原MLVA-5点分型方法相同,但分型效率高于原有MLVA-5位点法,更简单、方便。
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公开(公告)号:CN111979142B
公开(公告)日:2022-08-05
申请号:CN202010731841.5
申请日:2020-07-27
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种同时携带耐药基因cfr和lsa(E)的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其检测方法。金黄色葡萄球菌Sta2868B2,保藏号:GDMCC No:61037。本发明提供了一种同时检测多重耐药基因cfr和lsa(E)的引物组及双重PCR检测方法。该方法具有良好的稳定性和特异性,通过对多组引物进行比较后选定的两对最佳引物;通过调整退火温度来进一步提高反应的特异性,本方法对cfr和lsa(E)的检测具有高度特异性,相互之间及与耐药基因无交叉反应,另外还具有较好的重复性;此外,利用本发明可以一次检测两种耐药基因,全部反应在2个小时内完成,省时省力。同时,利用本发明不需要昂贵的荧光PCR仪,也不需要合成昂贵的探针及相应的试剂,检测成本低,操作简便,利于医院和基层部门实验室应用推广。
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公开(公告)号:CN111057775B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN201911394381.5
申请日:2019-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一组用于检测沙门氏菌的分子靶标,所述分子靶标包括如SEQ ID NO.1~13所示的核苷酸序列。本发明还提供例了一组用于检测如权利要求1所述的用于检测沙门氏菌分子靶标的引物,其核苷酸序列如SEQ IDNO.14~39所示。采用本发明的引物针对特异性靶标进行PCR扩增,通过检测扩增产物是否含有目的条带判定样品中是否含有沙门氏菌,该方法降低了检测成本,更加具有实用性;本发明的特异性分子靶标即13个保守核酸具有单一的特异性,检测结果特异,结果判定简单。
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公开(公告)号:CN113388539B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202011617902.1
申请日:2020-12-30
Applicant: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) , 广东环凯生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了用于检测5株沙门氏菌的特异性分子靶标,所述分子靶标为:(a)如SEQ ID NO:1~5所示的任意一种或几种核苷酸序列;或者,(b)在(a)中的核苷酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个核苷酸且与(a)中核苷酸具有90%以上同源性的核苷酸序列。同时还提供了5株含有所述特异性分子靶标的沙门氏菌标准菌株,其保藏号分别为:GDMCC 60847、GDMCC 60848、GDMCC 60849、GDMCC 60850、GDMCC 60851。本发明的沙门氏菌标准菌株具有典型的沙门氏菌生理生化特性,且能较好地反映该菌在中国地区的遗传背景。
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