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公开(公告)号：CN105527446B
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201610014747.1
申请日：2016-01-11
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 一种多肽抗原检测牛结核分枝杆菌抗体的ELISA试剂盒，属于生物技术检测领域，本利用牛结核分支杆菌特异性多肽，体外人工合成作为抗原快速检测牛结核分枝杆菌的抗体。采用人工合成5种多肽抗原作为包被液，有效提高多肽与目标抗体的结合效率，从而显著提高可检测灵敏度，同时显著降低非特异背景读值，特异性高。本发明的牛结核分枝杆菌抗体ELISA检测试剂盒具有操作简单、诊断速度快、在进行大规模检测中经济方便等优点，是一种便于普及的好方法，具有广泛的应用前景。采用本发明的ELISA检测试剂盒检测牛结核分枝杆菌抗体，成本低，有利于推广使用。
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公开(公告)号：CN106995486A
公开(公告)日：2017-08-01
申请号：CN201710248360.7
申请日：2017-04-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种GyV8新型环形病毒VP3可溶性蛋白的制备方法。该方法是用pGEX‑6p‑1线性化载体以及GyV8病毒VP3基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP3，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现GyV8的VP3蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP3可溶性蛋白。本发明不依赖于酶切位点及限制性内切酶的重组酶ExnaseTM II体外重组技术克隆GyV8病毒VP3基因，简化克隆过程，实现VP3基因快速克隆表达。
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公开(公告)号：CN106754691A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611139082.3
申请日：2016-12-12
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/078
Abstract: 一种从家禽全血样本快速分离高纯度红细胞的方法，涉及家禽血液分离鉴定检测技术领域。将柠檬酸钠或肝素抗凝的家禽血样先与PBS或生理盐水混合后再加到淋巴细胞分离液表面，经水平离心机离心处理，弃去离心后的血浆、淋巴细胞、淋巴细胞分离液和最上层的红细胞，取得高纯家禽红细胞，纯度达到99.9%以上，没有血液中其他细胞，尤其是淋巴细胞的污染，为研究家禽红细胞的生物学功能提供了非常好的生物样品。本发明建立了一种方便快速有效分离高纯度家禽红细胞的方法，便于显微操作，能够高效、准确地获取高纯度家禽红细胞进行后续的细胞鉴定及生物学功能研究。
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公开(公告)号：CN106692964A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201611102065.2
申请日：2016-12-05
Applicant: 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司 , 福建圣维生物科技有限公司
IPC: A61K39/235 , A61P31/14 , C12N7/00
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , C12N7/00 , C12N2710/10034
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及血清4型禽腺病毒灭活苗及其制备方法。所述血清4型禽腺病毒灭活苗，其抗原为通过悬浮培养方法获得的效价不低于109TCID50/ml的灭活后的血清4型禽腺病毒。本发明的利用鸡肝细胞，通过激流式生物反应器悬浮培养技术高效扩增血清4型禽腺病毒，并研制出高效价血清4型禽腺病毒灭活苗。该疫苗效价可达109TCID50/ml，是传统鸡胚疫苗效价的100倍。高效价血清4型禽腺病毒灭活苗的制备可大大降低疫苗的成本，提供疫苗免疫效果，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN105037504B
公开(公告)日：2016-11-30
申请号：CN201510359309.4
申请日：2015-06-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种AGV2型环形病毒VP2可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX‑6p‑1线性化载体以及AGV2病毒VP2基因片段的引物，利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆VP2，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP2蛋白与GST的融合可溶性表达，并获得纯化的VP2可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP2可溶性表达及纯化的蛋白，可直接提供VP2可容性蛋白作为AGV2诊断抗原；作为免疫原获得抗VP2多克隆抗体；为开展AGV2血清学流行病学调查及VP2功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白；并为进一步探究VP2生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN103773891B
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201410067290.1
申请日：2014-02-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测耐药基因TetK的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst DNA聚合酶8Μ/μL、l0mM dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、l0μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B（50mM MgCl2）和反应液C（100X的荧光染料SYBR GreenⅠ）。通过对细菌基因组DNA提取、耐药基因TetK的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测，从而检测出耐药基因TetK。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单，适于现场快速检测。
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公开(公告)号：CN105274089A
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201510802359.5
申请日：2015-11-19
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种表达绿色荧光囊膜融合蛋白的REV病毒传染性克隆的构建方法，是将特定PCR引物扩增出的绿色荧光EGFP基因片段，插入到线性化的REV病毒基因组Env基因的N端，利用商品化的重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆，随后转化到大肠杆菌进行质粒扩增与鉴定；并将阳性克隆转染DF1细胞，拯救获得表达绿色荧光囊膜融合蛋白的REV病毒。
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公开(公告)号：CN104726498A
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201510153415.7
申请日：2015-04-02
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867
Abstract: 本发明涉及一种基于J亚群禽白血病病毒LTR的线性化真核表达载体的构建及应用。本发明是SEQ ID NO.1和2的序列为引物，以JSNT毒株为模板，进行PCR扩增得ALV-J病毒LTR线性化载体；本发明不仅可用于研究ALV-J或其它反转录病毒的复制、转译、致病等机制；而且能实现对外源基因的快速克隆、高效表达。
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公开(公告)号：CN104450695A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410704520.0
申请日：2014-11-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种流感病毒基因克隆方法，具体涉及A型流感病毒基因PCR扩增引物及A型流感病毒基因快速克隆方法。本发明提供了A型流感病毒8个基因片段的PCR扩增引物和流感病毒反向遗传线性化载体的引物。本发明还提供了A型流感病毒基因快速克隆方法，用上述引物通过PCR反应即聚合酶链式反应扩增出流感病毒基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体，然后利用重组酶将上述线流感病毒各基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体在体外重组克隆，并转化到大肠杆菌进行克隆。本发明的大大简化了传统的流感病毒反向遗传技术中的基因克隆过程，解决传统的流感病毒反向遗传技术中流感病毒基因的克隆过程复杂、效率不高的问题。
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公开(公告)号：CN104330560A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410629638.1
申请日：2014-11-11
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56983
Abstract: 双夹心ELISA检测禽网状内皮组织增生病病毒（REV）抗原的试剂盒，属于生物技术检测领域，该试剂盒用于REVP30蛋白抗原检测，最低可以检测到101.82个TCID50的REVHA1101或SNV病毒株所携带的P30抗原。本发明为临床REV抗原的快速检测提供了可靠手段。该试剂盒操作简便、快速，可以用于REV的检测，适用于基层各级兽医部门、出入境检验检疫、疫苗生产企业等REV快速大量检测。该方法所需成本低廉，经济效益显著、应用前景广泛。
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