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公开(公告)号：CN109468256A
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201811422515.5
申请日：2018-11-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及到生物技术领域，具体涉及整合四拷贝F18菌毛操纵子基因和双拷贝F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株、构建方法，包括如下步骤：pTargetT-X::PtetF18和pTargetT-X::PtetF4重组质粒的构建；通过整合四拷贝功能性F18菌毛操纵子基因和双拷贝功能性F4菌毛操纵子基因的益生菌克隆株的构建，得到无抗性的四拷贝F18菌毛基因和双拷贝F4菌毛基因复合整合克隆株。本发明的有益效果为：该重组菌能够有效提高对猪肠道传代上皮细胞的粘附性能；口服免疫小鼠能产生免疫血清，即抗F18菌毛和抗F4菌毛的IgG的抗体；口服免疫后小鼠的血清能显著减低F18+和F4+菌株对猪肠道传代细胞系IPEC-J2的粘附。
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公开(公告)号：CN107881260A
公开(公告)日：2018-04-06
申请号：CN201711145762.0
申请日：2017-11-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明提供一种对牛血清中牛病毒性腹泻病毒进行分离鉴定的方法，过程如下：将MDBK细胞与牛血清样品经三次盲传后离心处理，再提取病毒RNA，进一步利用试剂盒将RNA反转录合成病毒基因组cDNA；进行PCR反应完成血清样品中牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定。本发明的方法可以同时对大批量样品进行处理，不仅提高了工作效率，病毒经扩增培养后更易于准确检测，准确率得到提高，为临床样品和商品化血清批量样品分离BVDV均提供了切实可行的分离方法。
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公开(公告)号：CN106893732A
公开(公告)日：2017-06-27
申请号：CN201710251311.9
申请日：2017-04-18
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)感染性克隆的拯救方法。该方法是将GPV的完整基因组克隆入载体质粒pBSKNB，获得重组质粒；将重组质粒与转染试剂混合后，通过绒毛尿囊膜途径接种非免疫鹅胚，重组质粒在鹅胚中得到拯救；所述pBSKNB载体，是将pBluescript II(SK)质粒上原有的EcoRV和HindIII酶切位点分别用NcoI和BclI位点替换而得到。本发明产生的感染性病毒可致死鹅胚，拯救病毒与亲本病毒具有一致生物学特性。该拯救方法操作简便高效，避免了转染细胞带来的繁琐和低效问题，在GPV反向遗传学研究和疫苗创制上具有潜在应用价值。
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公开(公告)号：CN104186423B
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201410480181.2
申请日：2014-09-18
Applicant: 扬州大学
IPC: A01K67/027
Abstract: 本发明涉及梅山猪高产抗病新品系的培育方法，其特点是：对梅山猪核心群进行F18大肠杆菌感染，根据表型鉴定结果组建梅山猪F18大肠杆菌抗病育种基础群；对基础群中F18大肠杆菌抗性型群体细胞因子（IL‑2、IL‑6、IL‑10、IL‑12、IFN‑α和IFN‑γ）进行浓度测定；通过建立主成分综合评价模型，根据不同个体的综合得分来对一般抗病力进行综合指数选育，同时对繁殖性能等性状进行检测和选择，组建第一个世代；用群体继代选育和分子标记辅助选择的方法，经过4‑5个世代，逐步实现育种目标，建立新品系核心群。新品系猪具有抗断奶仔猪腹泻和水肿病、抗应激、适应环境能力强、肉质优、饲料报酬高、产仔数多的优点。
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公开(公告)号：CN104774932A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510133034.2
申请日：2015-03-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种用于判定大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药水平的引物、探针和分子检测试剂盒。本发明的试剂盒可快速、敏感、准确判断大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药水平，特异性扩增大肠杆菌的核酸，而不扩增其它细菌、病毒、寄生虫、植物、动物等的核酸，并且可应用于多种组织器官与物种来源的临床样本，无需细菌分离纯化，本发明能够为疾病的及时治疗及合理用药提供参考，为耐药机制的研究提供技术支持。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103931560A
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201410191082.2
申请日：2014-05-07
Applicant: 扬州大学
IPC: A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种苏太猪一般抗病力综合选择指数选择育种方法。方法是仔猪在35日龄时采集前腔静脉血，获得血清样品后测定白介素2(IL-2)、白介素4(IL-4)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、白介素12(IL-12)、β干扰素(IFN-β)的浓度，同时对实验猪群体进行分组，之后将上述6个指标数据转化为标准化Z分值，代入所建综合选择指数公式计算每个群体的综合选择指数值，根据值的大小确定一般抗病力较强个体。本发明的检测方法操作简单，准确度高，并可实现自动化的直接检测，本发明将在猪的抗病育种实践中发挥巨大作用。
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公开(公告)号：CN102023217A
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN201010568455.5
申请日：2010-12-01
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及牛病毒性腹泻病毒抗原的双抗夹心生物素-亲和素ELISA检测试剂盒及使用该试剂盒的检测方法。该试剂盒包括用于ELISA检测的洗涤液、显色液、终止液，Streptavidin-HRP、阳性对照，阴性对照，其特征在于还有包被牛病毒性腹泻病毒单抗3D8的酶标板、生物素标记的牛病毒性腹泻病毒单抗3F9。用该试剂盒进行检测无交叉反应；可避免因体内抗体滴度低而出现漏检现象；特异性高，使用生物素-亲和素增敏剂，起放大作用，灵敏度增高，提高检出率，同时减少了二抗的用量，适于推广使用。
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公开(公告)号：CN101792798A
公开(公告)日：2010-08-04
申请号：CN201010018206.9
申请日：2010-01-19
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及苏太猪抗F18大肠杆菌病新品系的培育方法，具体是：第一步：利用FUT1基因标记对苏太猪核心群检测基因型，选择AG个体为亲本进行杂交，杂交后代组建为抗病育种基础群；第二步：选留基础群中AA型个体，对AA型群体重要经济性状进行检测和选择，进行分子标记育种效率评估，同时运用BLUP模型进行种猪的遗传评估，组建第一个世代；第三步：采用常规育种技术并结合分子标记辅助选择进行持续测定分析和世代选育提高，经过4-5个世代，育成的新品系猪具有抗断奶仔猪腹泻和水肿病、瘦肉率高、肉质优、饲料报酬高、产仔数多、抗应激、适应环境能力强的优点。本发明还可为其他培育猪种的抗断奶仔猪腹泻和水肿病抗病育种提供指导。
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公开(公告)号：CN118909057B
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411048366.6
申请日：2024-08-01
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K16/46 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61K39/108 , A61P31/04 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了PEDV刺突（S）蛋白受体结合结构域（RBD）的优势B细胞抗原表位、其嵌合基因、重组菌株及其制备方法和针对其在ETEC和PEDV多联多价疫苗中的应用。本发明制备的F4‑F18‑PEDV‑S重组疫苗株能同时表达猪源ETEC的F4和F18菌毛，以及PEDV S蛋白RBD的优势中和B细胞抗原表位。提取的重组疫苗株的菌毛与弗氏佐剂乳化后免疫小鼠，在小鼠体内能同时诱导高水平的抗FaeG、抗FedF和抗PEDV S蛋白的抗体，并且免疫小鼠血清在体外能抑制F4+ ETEC和F18+ ETEC标准菌株对仔猪小肠细胞的黏附；对PEDV2b毒株（HSW）的中和效价达到1:80。该重组疫苗株有望开发成为预防ETEC和PEDV混合感染所致仔猪腹泻的多联多价疫苗，具有极大的应用价值。
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公开(公告)号：CN118620037B
公开(公告)日：2024-12-13
申请号：CN202410652934.7
申请日：2024-05-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , C07K16/08 , G01N33/569 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒（ASFV）外囊膜p12蛋白表面B细胞中和表位及其筛选验证方法和应用，具体公开了ASFV外囊膜蛋白p12中两种筛选的B细胞表位GN08和MA11，其中抗表位GN08的单克隆抗体产生的杂交瘤细胞（保藏号CCTCC NO:C2023192），其分泌的细胞上清液和小鼠源腹水，利用ASFV病毒感染猪原代肺巨噬细胞（PAM）的细胞中和试验验证其具备中和ASFV病毒的活性，而抗MA11表位的杂交瘤细胞分泌的细胞上清液和小鼠源腹水不具备中和ASFV病毒活性。因此，GN08表位是ASFV外囊膜p12蛋白表面B细胞的中和表位，具备开发成为中和病毒表位靶点的应用潜力。
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