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公开(公告)号：CN103278627A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310193976.0
申请日：2013-05-22
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明的一种检测非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体的多抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒属于生物技术和动物传染病诊断研究领域，包括三种ASFV重组抗原表达与纯化、ASFV抗体阳性和阴性对照血清制备、最佳包被抗原组合及浓度确定、多抗原ELISA（MA-ELISA）反应参数优化、ASFV抗体阴性血清临界值确定以及MA-ELISA检测人工感染和田间血清样品的灵敏性、特异性、可重复性测定。通过大量已知血清样品检测证明，本发明的MA-ELISA检测血清ASFV抗体的灵敏性、特异性和可重复性显著高于世界动物卫生组织推荐的ELISA方法和国外同类试剂盒，可用于ASFV血清学诊断、流行病学调查和生猪进出口检疫检验。
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公开(公告)号：CN102296069B
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201110255463.9
申请日：2011-08-31
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 本发明涉及的有效抑制不同毒株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）复制的非翻译区特异人工微小RNA（miRNA）属于基因工程和生物制品研究领域，所述微小RNA序列如SEQ ID NO：1-4之一所示。本发明还公开了包括基于RNA聚合酶II的人工miRNA表达载体构建、miRRNAi设计、双链寡核苷酸合成与克隆、miRNA表达检测及其对不同毒株PRRSV复制的抑制作用。与针对其它PRRSV基因的siRNA相比，本发明筛选的人工miRNA针对病毒RNA基因组的非翻译区保守序列，既能抑制同源毒株复制，也能抑制异源毒株复制，既可用于抗PRRSV感染制剂开发，也可用于转基因猪抗病品系培育。
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公开(公告)号：CN101921878A
公开(公告)日：2010-12-22
申请号：CN201010288475.7
申请日：2010-09-21
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒核酸扩增引物、检测方法和试剂盒。所说的引物对和特异性核酸探针选自SEQIDNO：1-12。其检测方法包括步骤：（a）利用PCR引物扩增待测样本中核酸；（b）将烷巯基标记的检测探针标记至纳米金颗粒上；（c）将生物素标记的捕捉探针和步骤（b）纳米金标记的检测探针与变性的PCR产物杂交；（d）将步骤（c）的杂交体系加入包被链亲素的酶标板，捕捉杂交复合物；（e）银染增强捕捉的纳米金；（f）终止银染增强反应，肉眼观察灰度判定结果。本发明具有检测敏感性高、检测特异性强以及检测成本低的特点，可有效排除PCR方法检测非洲猪瘟病毒出现的假阳性或假阴性，快速检测出非洲猪瘟病毒核酸。
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公开(公告)号：CN105886489A
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201610300134.4
申请日：2016-05-09
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N9/506 , C07K14/57 , C12N15/70 , C12N2800/101 , C12N2800/22 , C12P21/06
Abstract: 本发明属于生物技术研究领域，具体涉及一种烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVP)活性包涵体及其制备方法和在重组蛋白制备中的应用。所述TEVP活性包涵体由两个PT连接头分隔的ELK16自聚肽和烟草蚀纹病毒蛋白酶组成。其制备方法包括表达载体构建、活性包涵体表达与纯化、重组蛋白切割和目的蛋白回收。与现有的TEVP相比，本发明的TEVP活性包涵体具有制备简单、容易从终产物中去除和价格低廉等优点，可以用于各种重组蛋白的制备。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103278627B
公开(公告)日：2015-09-02
申请号：CN201310193976.0
申请日：2013-05-22
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明的一种检测非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体的多抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒属于生物技术和动物传染病诊断研究领域，包括三种ASFV重组抗原表达与纯化、ASFV抗体阳性和阴性对照血清制备、最佳包被抗原组合及浓度确定、多抗原ELISA（MA-ELISA）反应参数优化、ASFV抗体阴性血清临界值确定以及MA-ELISA检测人工感染和田间血清样品的灵敏性、特异性、可重复性测定。通过大量已知血清样品检测证明，本发明的MA-ELISA检测血清ASFV抗体的灵敏性、特异性和可重复性显著高于世界动物卫生组织推荐的ELISA方法和国外同类试剂盒，可用于ASFV血清学诊断、流行病学调查和生猪进出口检疫检验。
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公开(公告)号：CN103525775B
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201310485894.3
申请日：2013-10-16
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及表达猪繁殖与呼吸综合征病毒游离受体重组腺病毒组及其制备与应用。所述重组腺病毒组，是由表达猪唾液酸粘附素前4个IgV结构域和与猪IgG Fc片段融合蛋白的重组腺病毒，及表达脱衣壳受体CD163第5-9个SRCR结构域与猪IgG Fc片段融合蛋白的重组腺病毒组成。该重组腺病毒组应用于制备防治猪繁殖与呼吸综合征制剂。与现有的疫苗相比，本发明制备的重组腺病毒为复制缺陷性病毒，不能在猪体内扩散传播，不存在散毒和毒力返强风险，表达的两种游离受体的协同作用能显著抑制不同毒株PRRSV感染，可以作为防控PRRS的新型制剂进行开发。
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公开(公告)号：CN103293306A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310197035.4
申请日：2013-05-22
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及的一种非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体检测胶体金免疫层析试纸条制备方法属于生物工程和动物疫病诊断领域，包括ASFV重组抗原p54表达、纯化、抗体制备、胶体金免疫层试纸条制备及其检测ASFV抗体的灵敏性和特异性。与现有的其他血清学方法相比，用本发明建立的胶体金免疫层析试纸条具有方便、快速、灵敏和特异等优点，能在5分钟内获得明确的诊断结果，并能直接检测可疑猪血清（或抗凝血）的病毒抗体，特别适合现场ASFV血清学诊断、流行病学调查和生猪国际贸易检疫检验。
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公开(公告)号：CN102080096A
公开(公告)日：2011-06-01
申请号：CN201010585352.X
申请日：2010-12-13
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/66
Abstract: 本发明涉及一种便于外源蛋白纯化的原核表达载体及构建方法。所说的天表达载体结构如图1所示，它是在载体pET30a基础上，插入多克隆位点及Mxe-ELP基因序列，构建而成。将欲表达得外源蛋白编码基因插入多克隆位点，转化感受态宿主细胞，诱导表达后，利用弹性蛋白样多肽的生物学特点，再借助内含肽MxeGyrA在硫醇存在条件下能自我切割特点，从而分离、纯化出表达的外源蛋白。该表达系统与其他原核表达系统相比，避免使用价格昂贵的层析技术，且操作简单易行，在蛋白生产领域有着极其明显的优势，特别适用于可溶性蛋白的表达纯化。
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公开(公告)号：CN101402945B
公开(公告)日：2010-10-06
申请号：CN200810234683.1
申请日：2008-11-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明建立的表达抗传染性法氏囊病病毒miRNA的重组禽腺联病毒制备方法属于基因工程和生物制品研究领域，包括siRNA的选择、双链短发夹寡核苷酸的合成与克隆、含miRNA表达盒禽腺联病毒转移载体的构建、重组禽腺联病毒的产生与鉴定、重组病毒表达的miRNA对传染性法氏囊病病毒复制和基因表达抑制作用的检测。与现有的其他技术相比，该系统不仅能在禽源细胞中有效、持久地表达miRNA，对传染性法氏囊病病毒复制和基因表达具有特异、持久的抑制作用，而且对家禽无任何致病作用，不仅可用于体外实验，而且可作为抗禽病毒感染的新型生物制剂进行开发。
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