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公开(公告)号：CN105400808A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510603431.1
申请日：2015-09-22
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/873 , C12N15/89 , A01K67/027 , C12Q1/68
Abstract: 一种利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体，属于生物技术领域。本发明的目的是利用VASA基因的生殖特异性表达，来建立转基因猪模型的利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体。本发明载体的构建方法是：①VASA转录起始位点上游序列扩增与纯化；②VASA转录起始位点上游序列测序；③VASA-Cre表达载体构建。本发明利用基因工程技术构建了一个生殖系统特异表达cre重组酶的质粒，并且重组质粒可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在。该质粒可以保证在生殖系统中特异表达cre重组酶，可以与loxp相结合，进行相关生殖系统表达基因的敲除，为cre重组酶系统的发展和相关基因的研究起到积极的推动作用。
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公开(公告)号：CN103497932A
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201310481480.3
申请日：2013-10-16
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12Q1/68 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种对猪圆环病毒2型（PCV2）高敏感的细胞系，同时还公开了该细胞系的制备方法，采用PCV2感染PK-15细胞后3-羟-3-甲戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMG-CoAreductase，HMGCR）的表达有显著变化，且沉默HMGCR基因后，PCV2的TCID50达108.5/mL。用RNA干扰技术获得HMGCR基因沉默细胞系，并经过筛选，最终可获得对PCV2高度敏感的细胞系。用本发明制备的HMGCR基因沉默细胞培养猪圆环病毒2型，可获得较高滴度的病毒，有利于猪圆环病毒2型致病机理研究、病毒培养、全病毒灭活苗开发及工业化生产。
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公开(公告)号：CN102382800A
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201110404508.4
申请日：2011-12-08
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种细胞信号通路抑制剂诱导猪脂肪细胞形成的方法，将猪胚胎成纤维细胞以4~6×104个/cm2的比例均匀的接种到Corning细胞培养板中，使用诱导培养基培养；37℃，5％CO2培养箱中培养20天时，对细胞进行观察并油红O染色证明其为脂肪细胞。利用细胞信号通路抑制剂而非转基因来诱导细胞转化，可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变。同时该方法对于研究脂肪细胞的形成机制有一定的促进作用，其简便性和安全性可被广泛的应用，可用于脂肪形成机制的研究，也能在疾病治疗等临床应用上发挥作用。
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公开(公告)号：CN101550427B
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN200910066596.4
申请日：2009-02-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/06 , A01K67/027 , C12Q1/25
Abstract: 本发明提供一种检测Cre位点特异重组酶活性的转基因报告猪及培养方法，采用基因工程的方法构建LoxP位点锚定终止子，后接报告基因的打靶载体，当Cre重组酶存在的情况下，将Loxp卯定的终止子删除，使后接的报告基因得以表达，从而用于监测Cre重组酶的活性；通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以特异性检测Cre活性的成纤维细胞；利用体核移植技术进行克隆猪。用于在体内监测Cre重组酶的活性，为建立人类疾病模型提供了监测工具，解决了目前转基因克隆猪的技术不成熟，克隆效率较低问题。
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公开(公告)号：CN101984062A
公开(公告)日：2011-03-09
申请号：CN201010182404.9
申请日：2010-05-26
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种维持干细胞自我更新的6个猪源关键基因的体外转录质粒构建，其特征在于具体制备方法如下：首先设计基因体外转录空载体Vitro-TransPMD-18T，然后获得EGFP和维持干细胞自我更新的猪源的6个关键基因的cDNA，并按相应的酶切位点进行酶切连接，最后用体外转录试剂盒对7个体外转录质粒进行体外转录，得到相应的mRNA，然后将Vitro-Trans-EGFP转染进猪胚胎成纤维细胞：其6个基因体外转录出的mRNA转染进猪胚胎成纤维细胞后能够使其转变成猪的多能干细胞；6个基因体外转录出的mRNA能够高效翻译。
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公开(公告)号：CN117044681A
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202310843945.9
申请日：2023-07-11
Applicant: 吉林大学
IPC: A01K67/027 , C12N15/85 , C12N15/52 , C12N15/877 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供一种COP1基因不表达的异种移植供体猪及其制备方法，COP1基因能引起异种免疫排斥风险，还利用CRISPR/Cas9系统敲除COP1基因，验证了COP1基因不表达可有效降低供体猪的器官、组织和/或细胞与接受者IgG和IgM的结合能力，提高供体猪的器官、组织和/或细胞抵抗接受者补体介导的细胞毒性的能力，可以延长供体猪的器官、组织和/或猪细胞接受者生存时间。
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公开(公告)号：CN114409741B
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN202111457334.8
申请日：2021-12-02
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种PCV2、PCV3和PCV4三联亚单位疫苗及其制备方法，包括三种重组蛋白，分别是PCV2 Cap蛋白、PCV3 Cap蛋白和PCV4 Cap蛋白，所述的PCV2 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.1、所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的，所述的PCV3 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.2所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的，所述的PCV4Cap蛋白是将如SEQ ID NO.3所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的。可用于同时防治PCV2、PCV3和PCV4感染，显著的提高了针对PCV2、PCV3和PCV4的免疫原性，免疫后动物可诱导产生高效价的抗体。
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公开(公告)号：CN113817690B
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN202110918250.3
申请日：2021-08-11
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供猪圆环病毒4型制备方法及其应用，猪圆环病毒4型基因序列是在如SEQ ID NO.4所示的PCV4全基因组序列上游和下游插入调控序列得到，如SEQ ID NO.2所示的调控序列位于PCV4全基因组序列上游，如SEQ ID NO.3所示的调控序列位于PCV4全基因组序列下游。本发明首次制备得到的PCV4病毒样品，可用于PCV4感染及致病机制的研究、疫苗研发等，为PCV4感染引起的疫病提供理论依据及预防控制该疫病的有效工具，在临床、实验室研究上均具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114409741A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202111457334.8
申请日：2021-12-02
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种PCV2、PCV3和PCV4三联亚单位疫苗及其制备方法，包括三种重组蛋白，分别是PCV2 Cap蛋白、PCV3 Cap蛋白和PCV4 Cap蛋白，所述的PCV2 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.1、所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的，所述的PCV3 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.2所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的，所述的PCV4Cap蛋白是将如SEQ ID NO.3所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的。可用于同时防治PCV2、PCV3和PCV4感染，显著的提高了针对PCV2、PCV3和PCV4的免疫原性，免疫后动物可诱导产生高效价的抗体。
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公开(公告)号：CN113621610A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202110686753.2
申请日：2021-06-21
Applicant: 吉林大学重庆研究院
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供一对敲除猪HSPA6基因部分保守区域的sgRNA序列及应用，应用在敲除HSPA6基因部分保守基因区域中，或应用在制备敲除HSPA6基因部分保守区域产品中的应用，本发明能实现有效敲除，并且敲除后显著抑制猪HSPA6基因表达，本发明应用于以HSPA6基因为靶点的神经退行性疾病及应激性疾病药物的研发，构建的敲除HSPA6基因部分保守区域的猪源细胞可作为解析HSPA6基因表达的分子调节机制的研究模型。
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