鸡球虫ADF重组卡介苗及制备方法

    公开(公告)号:CN102552893A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201110439688.X

    申请日:2011-12-26

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种鸡球虫ADF重组卡介苗,同时还提供了该疫苗的制备方法,获得鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊,提取RNA,反转录成cDNA,根据已克隆的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列的开放阅读框设计引物进行PCR,与PMD-18T载体连接进行克隆,测序鉴定正确后,酶切回收目的片段,再分别与用同种酶进行酶切反应的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体PMV261和整合表达载体PMV361相连,连接正确的重组质粒转化到BCG中,经抗性筛选和PCR鉴定,获得阳性鸡柔嫩艾美耳球虫重组卡介苗。该活载体疫苗稳定性好,运输和保存较为容易,易于生产,产品不需纯化,可直接用于免疫保护试验.免去了蛋白质后处理的复杂工序,从而大大降低了成本,适宜于广大农村。

    一种新的犬新孢子虫速殖子的体外培养和染色方法

    公开(公告)号:CN102533556A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201010593980.2

    申请日:2010-12-17

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及了一种新的犬新孢子虫速殖子的体外培养和染色方法,其特征在于培养的具体步骤为:首先常规培养MCF-7乳腺癌细胞,当其长成细胞单层后,按104/ml接种1ml犬新孢子虫;之后用含2%胎牛血清的RPIM-1640培养基进行培养,每天利用倒置显微镜观察胞外新孢子虫速殖子的数目;染色的具体步骤为:新孢子虫速殖子经多聚甲醛固定,吖啶橙染色后经普通荧光显微镜照相观察;该培养方法简单实用,可快速培养新孢子虫速殖子,并且经吖啶橙染色后利用普通荧光显微镜即可快速、直观、清晰的观察到胞内寄生虫。

    微小隐孢子虫双价核酸疫苗及制备方法

    公开(公告)号:CN101422620A

    公开(公告)日:2009-05-06

    申请号:CN200810050899.2

    申请日:2008-06-30

    Applicant: 吉林大学

    CPC classification number: Y02A50/489

    Abstract: 本发明提供一种微小隐孢子虫双价核酸疫苗及制备工艺,以真核表达载体pVAX1为载体,将两个微小隐孢子虫保护性抗原基因联合CPG免疫加强序列串联插入到pVAX1真核表达载体的多克隆位点区,获得了含免疫加强序列的微小隐孢子虫双价核酸疫苗。选用了两个保护性抗原基因进行了双价核酸疫苗的研制,并在此基础上引入了CPG免疫加强序列,以增强其免疫保护效果。本发明疫苗具有较强的细胞免疫和体液免疫作用,并且引入的CPG基序又具有激活免疫系统,诱导天然免疫应答,分泌免疫球蛋白和各种细胞因子的作用,两者优势组合,从而可以达到更好的预防动物微小隐孢子虫病的目的。

    旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法

    公开(公告)号:CN103114095B

    公开(公告)日:2015-09-23

    申请号:CN201310080980.6

    申请日:2013-03-14

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法,提供了旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B基因,并提供了该基因抗体的制备方法,分别制备旋毛虫和H7402肝癌细胞的抗血清,利用间接ELISA方法确定H7402肝癌细胞抗原与旋毛虫阳性血清、旋毛虫抗原与H7402肝癌细胞阳性血清间存在相关抗原;利用多克隆抗体从旋毛虫cDNA文库中免疫筛选获得与H7402肝癌相关的抗原蛋白基因。克隆并原核表达相关蛋白,纯化复性其原核表达蛋白作为免疫原免疫小鼠,获得相关抗原基因蛋白的抗体。旋毛虫AN1重组蛋白抗原的抗体能对H7402肝癌产生强的抑制作用,且获得的旋毛虫AN1重组蛋白抗原的抗体易于制备和工业化生产。

    犬恶丝虫ELISA检测试剂盒及制备方法

    公开(公告)号:CN102798716A

    公开(公告)日:2012-11-28

    申请号:CN201110419523.6

    申请日:2011-12-15

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了用于犬的犬恶丝虫ELISA检测试剂盒及制备方法,利用从犬恶丝虫成虫cDNA表达文库中筛选出的与编码马来丝虫肌球蛋白尾家族蛋白的同源基因命名为MTFP(同源性88%),在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)表达的MTFP蛋白作为抗原,建立了检测犬的犬恶丝虫感染的间接ELISA方法。该检测特异性高、灵敏度高、准确性高、稳定性好。具有操作简单、检测快速,易于判断等优点,适合于临床的快速诊断和基层、农村等流行病学调查大规模应用。

    旋毛虫与肿瘤相关抗原抗体制备方法及医用用途

    公开(公告)号:CN102532314A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201010593973.2

    申请日:2010-12-17

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及一种旋毛虫与肿瘤相关抗原抗体制备方法及医用用途,其特征在于具体的制备方法如下:旋毛虫与肿瘤相关抗原加等量的完全福氏佐剂乳化后,常规方法皮下首免小鼠、兔或牛、驴等动物,两周后以旋毛虫与肿瘤相关抗原加等体积的福氏不完全佐剂二免,一周后在加强免疫,二免和三免后分别静脉采血,分离血清,ELISA检测效价,当效价达到1∶6400以上标准后,静脉采血制备血清。旋毛虫与肿瘤相关抗原抗体具有抗肿瘤作用,同时抗旋毛虫与肿瘤相关抗原抗体易于制备和工业化。

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