利用地高辛标记EDC交联桥连法检测miRNAs方法

    公开(公告)号:CN103293318A

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201310190051.0

    申请日:2013-05-22

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开一种利用地高辛标记EDC交联桥连法检测miRNAs的方法,应用地高辛标记系统,灵敏度比传统地高辛标记Northern blots检测系统至少高50倍,与放射性同位素标记Northern blots检测系统相当;对环境不会造成污染,非常安全,同时无需杂交步骤,能在9-10h之内完成,方便快速,检测成本较低。解决了当前检测方法安全性不高、程序复杂、价格昂贵、灵敏度低等问题。

    旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法

    公开(公告)号:CN103114095A

    公开(公告)日:2013-05-22

    申请号:CN201310080980.6

    申请日:2013-03-14

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B重组蛋白抗原及其制备方法,提供了旋毛虫AN1型锌指蛋白-2B基因,并提供了该基因抗体的制备方法,分别制备旋毛虫和H7402肝癌细胞的抗血清,利用间接ELISA方法确定H7402肝癌细胞抗原与旋毛虫阳性血清、旋毛虫抗原与H7402肝癌细胞阳性血清间存在相关抗原;利用多克隆抗体从旋毛虫cDNA文库中免疫筛选获得与H7402肝癌相关的抗原蛋白基因。克隆并原核表达相关蛋白,纯化复性其原核表达蛋白作为免疫原免疫小鼠,获得相关抗原基因蛋白的抗体。旋毛虫AN1重组蛋白抗原的抗体能对H7402肝癌产生强的抑制作用,且获得的旋毛虫AN1重组蛋白抗原的抗体易于制备和工业化生产。

    弓形虫重组卡介苗及制备方法

    公开(公告)号:CN102198267A

    公开(公告)日:2011-09-28

    申请号:CN201110068082.X

    申请日:2011-03-22

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供一种弓形虫重组卡介苗及制备方法,首先将获得刚地弓形虫保护性抗原基因,进行TA克隆,测序鉴定正确后酶切回收目的片段,再分别与同样进行酶切反应的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV261和整合表达载体pMV361相连,重组质粒转化到BCG,经抗性和PCR筛选得到阳性刚地弓形虫重组卡介苗。本发明疫苗热稳定性好,运输和保存较为容易,易于生产,产品不需纯化,可直接用于免疫保护试验,免去了蛋白质后处理的复杂工序,从而大大降低了成本,适宜于广大农村。

    鸡球虫ADF重组卡介苗及制备方法

    公开(公告)号:CN102552893B

    公开(公告)日:2013-09-18

    申请号:CN201110439688.X

    申请日:2011-12-26

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种鸡球虫ADF重组卡介苗,同时还提供了该疫苗的的制备方法,获得鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊,提取RNA,反转录成cDNA,根据已克隆的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列的开放阅读框设计引物进行PCR,与PMD-18T载体连接进行克隆,测序鉴定正确后,酶切回收目的片段,再分别与用同种酶进行酶切反应的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体PMV261和整合表达载体PMV361相连,连接正确的重组质粒转化到BCG中,经抗性筛选和PCR鉴定,获得阳性鸡柔嫩艾美耳球虫重组卡介苗。该活载体疫苗稳定性好,运输和保存较为容易,易于生产,产品不需纯化,可直接用于免疫保护试验.免去了蛋白质后处理的复杂工序,从而大大降低了成本,适宜于广大农村。

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