一种植物原花色素二聚体、三聚体快速分离制备方法

    公开(公告)号:CN106518831B

    公开(公告)日:2018-07-20

    申请号:CN201610946727.8

    申请日:2016-10-26

    Abstract: 本发明公开了一种植物原花色素二聚体、三聚体快速分离制备方法,将富含原花色素植物原料的乙醇水溶液提取物,经液‑液萃取后,过凝胶柱,再经FPLC或HSCCC分离,分别得到原花色素二聚体、三聚体成分。本发明的工艺适用于不同来源下的原花色素二聚体和三聚体的分离纯化,具有普适性。本发明的工艺方法得到的原花色素二聚体、三聚体纯度高,方法安全性强、操作简单、耗时短、生产成本低、环境友好、符合绿色化学标准,适用于工业化生产,具有极大的商业价值。

    一种植物原花色素二聚体、三聚体快速分离制备方法

    公开(公告)号:CN106518831A

    公开(公告)日:2017-03-22

    申请号:CN201610946727.8

    申请日:2016-10-26

    CPC classification number: C07D311/62

    Abstract: 本发明公开了一种植物原花色素二聚体、三聚体快速分离制备方法,将富含原花色素植物原料的乙醇水溶液提取物,经液-液萃取后,过凝胶柱,再经FPLC或HSCCC分离,分别得到原花色素二聚体、三聚体成分。本发明的工艺适用于不同来源下的原花色素二聚体和三聚体的分离纯化,具有普适性。本发明的工艺方法得到的原花色素二聚体、三聚体纯度高,方法安全性强、操作简单、耗时短、生产成本低、环境友好、符合绿色化学标准,适用于工业化生产,具有极大的商业价值。

    双脂肪酶细胞表面共展示工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN105062909A

    公开(公告)日:2015-11-18

    申请号:CN201510600813.9

    申请日:2015-09-18

    CPC classification number: Y02E50/13

    Abstract: 本发明公开了一种双脂肪酶细胞表面共展示工程菌及其构建方法和应用,该工程菌,为以酿酒酵母细胞壁蛋白Sed1p作为锚定蛋白,以米根霉脂肪酶和南极假丝酵母脂肪酶B为双脂肪酶靶蛋白,共同展示在毕赤酵母细胞表面,构建出的双脂肪酶细胞表面共展示重组酵母工程菌。本发明将米根霉脂肪酶与南极假丝酵母脂肪酶B共展示于毕赤酵母细胞壁表面,制备了米根霉脂肪酶与南极假丝酵母脂肪酶B细胞表面共展示型全细胞催化剂,该表面共展示型全细胞催化剂最高酶活为686U/g-细胞干重,分别是单独展示米根霉脂肪酶或南极假丝酵母脂肪酶B的酶活力的3倍和2倍,催化油脂转酯化反应甲酯得率达96%。

    一种耐高温酸性阿拉伯糖苷酶及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN103409397A

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201310391170.2

    申请日:2013-09-02

    Abstract: 本发明公开了一种耐高温酸性阿拉伯糖苷酶及其编码基因和应用,该耐高温阿拉伯糖苷酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。该耐高温阿拉伯糖苷酶具有极强的耐热性能和偏酸性pH条件下高活性的特性,在80℃、pH5.5的条件下酶活性最高;该蛋白酶在温度为60-95℃、pH为5.0-7.0的范围内,均具有较高的酶活。该阿拉伯糖苷酶的耐热性能极高,在75℃的反应体系中,保温2h酶活仍保持80%以上。上述特性使得本发明得到的阿拉伯糖苷酶比现有阿拉伯糖苷酶具有更大的优越性,适用于75℃以上高温、偏酸性pH条件下半纤维素的降解,具有潜在的工业应用价值。

    一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法

    公开(公告)号:CN110423742B

    公开(公告)日:2022-10-18

    申请号:CN201910698944.3

    申请日:2019-07-31

    Abstract: 一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法,构建含Ecoil短肽的铁蛋白重组质粒和含Kcoil短肽的酶重组质粒;将构建好的重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株TOP10感受态细胞,获得相应的基因工程菌株;将基因工程菌接种于LB培养基中诱导培养,利用亲和层析和体积排阻色谱得到纯化的铁蛋白与酶;在纯化的铁蛋白内部空腔中合成Fe3O4;将获得的磁性铁蛋白与酶混合,通过Ecoil螺旋肽和Kcoil螺旋肽的相互作用,可形成磁性铁蛋白固定化酶。本发明采用基因融合,与以传统共价键的方式实现酶的固定化相比,避免了酶活性中心的破坏,明显提高了表面展示酶的效果和酶活,也大大降低了成本。

    一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法

    公开(公告)号:CN114533698A

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202210137407.3

    申请日:2022-02-15

    Abstract: 本发明公开了一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法,包括如下步骤:1)利用化学偶联法制备修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白;2)在特定离子强度条件下,利用温度法在步骤1)所得的铁蛋白内负载药物,制得铁蛋白载药纳米粒。本发明制得的修饰了肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒,具有较强的肿瘤穿透能力以及肿瘤细胞生长抑制作用,且D型RGERPPR肽修饰的铁蛋白‑紫杉醇载药纳米粒的效果最好,为后续药物靶向穿透至肿瘤细胞的治疗提供了良好的载药模型,具有很好的应用前景。

    一种表达芳樟醇合成酶的融合基因及其应用

    公开(公告)号:CN110904134B

    公开(公告)日:2021-05-14

    申请号:CN201911292338.8

    申请日:2019-12-16

    Abstract: 本发明提供了一种表达芳樟醇合成酶的融合基因及其应用,涉及代谢工程菌技术领域,所述融合基因自5’端至3’端依次包括启动子‑核糖体结合位点RBS‑融合标签‑芳樟醇合成酶基因bLIS。本发明利用所述融合基因构建了多种不同的重组表达载体,并转化具有GPP合成能力的大肠杆菌,构建工程菌。经验证,所述融合基因、重组表达载体可显著提高芳樟醇合成酶的表达量和可溶性表达,将改造的重组表达载体转入具有GPP合成能力的大肠杆菌重组菌,可有效提高生产菌的芳樟醇产量,在芳樟醇的生物合成过程中具有广泛的应用前景。

    蔗糖密度梯度离心分离铁蛋白纳米颗粒的方法

    公开(公告)号:CN111948589A

    公开(公告)日:2020-11-17

    申请号:CN201910416453.5

    申请日:2019-05-17

    Abstract: 本发明涉及一种蔗糖密度梯度离心分离铁蛋白纳米颗粒的方法。该方法的具体步骤为:首先将蔗糖溶于缓冲液中,配制质量百分比浓度分别为20%,35%,50%,65%的蔗糖溶液,采用层铺法,依次缓慢滴加一定量的蔗糖溶液;然后将装载四氧化三铁后的铁蛋白样品缓慢加到蔗糖梯度溶液中;在4℃,50,000rpm,5h的条件下,进行水平离心;最后将混合液缓慢等分吸出,利用紫外分光光度计分别在280nm和410nm波长下分别测定所在蔗糖溶液层的蛋白质含量和铁含量。最终分离得到在铁蛋白空腔内装载了四氧化三铁的铁蛋白,实现了铁蛋白空腔内是否装载四氧化三铁的分离,为分离铁蛋白提供除磁场分离以外的另一种简便可行的方法。

Patent Agency Ranking