一种共负载紫杉醇和锰酞菁的适配体铁蛋白纳米粒的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN114984217A

    公开(公告)日:2022-09-02

    申请号:CN202210701245.1

    申请日:2022-06-21

    Abstract: 本发明公开了一种共负载紫杉醇和锰酞菁的适配体铁蛋白纳米粒的制备方法及应用,共负载紫杉醇和锰酞菁的适配体铁蛋白纳米粒的制备方法为:通过化学偶联的方法将AS1411修饰在铁蛋白外表面;并通过温度法将紫杉醇与锰酞菁两种药物共负载在适配体铁蛋白内。本发明修饰了适配体AS1411的铁蛋白纳米载药系统,不仅增强了纳米粒子的靶向性,而且共负载的两种药物结合了化学治疗与光动力治疗,提高了肿瘤细胞的抑制效果,为后续药物靶向肿瘤细胞治疗提供了非常好的载体模型,具有很好的应用前景。

    一种紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法及其应用

    公开(公告)号:CN112457382B

    公开(公告)日:2021-12-07

    申请号:CN202011462595.4

    申请日:2020-12-14

    Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法及其应用。紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法,包括重组表达质粒、重组蛋白的表达和蛋白的纯化;重组表达质粒时,所用质粒为pET‑20b(+),将紫花苜蓿植物铁蛋白基因序列克隆至pET‑20b(+)质粒的NdeI和XhoI酶切位点之间,得含目的基因的重组质粒。本发明紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法,得到的紫花苜蓿植物铁蛋白呈球形笼状结构,分子量约为28kDa,直径约为12±0.5nm,水溶性好、热力学稳定性高,分散均一。作为一种新型的植物铁蛋白,为生物活性物水溶性、稳定性和生物利用度等的提高,提供了一种新型纳米载体,在食品、医疗、保健等方面有良好的应用前景,具有很高的应用价值。

    一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法

    公开(公告)号:CN110423742A

    公开(公告)日:2019-11-08

    申请号:CN201910698944.3

    申请日:2019-07-31

    Abstract: 一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法,构建含Ecoil短肽的铁蛋白重组质粒和含Kcoil短肽的酶重组质粒;将构建好的重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株TOP10感受态细胞,获得相应的基因工程菌株;将基因工程菌接种于LB培养基中诱导培养,利用亲和层析和体积排阻色谱得到纯化的铁蛋白与酶;在纯化的铁蛋白内部空腔中合成Fe3O4;将获得的磁性铁蛋白与酶混合,通过Ecoil螺旋肽和Kcoil螺旋肽的相互作用,可形成磁性铁蛋白固定化酶。本发明采用基因融合,与以传统共价键的方式实现酶的固定化相比,避免了酶活性中心的破坏,明显提高了表面展示酶的效果和酶活,也大大降低了成本。

    一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法

    公开(公告)号:CN110423742B

    公开(公告)日:2022-10-18

    申请号:CN201910698944.3

    申请日:2019-07-31

    Abstract: 一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法,构建含Ecoil短肽的铁蛋白重组质粒和含Kcoil短肽的酶重组质粒;将构建好的重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株TOP10感受态细胞,获得相应的基因工程菌株;将基因工程菌接种于LB培养基中诱导培养,利用亲和层析和体积排阻色谱得到纯化的铁蛋白与酶;在纯化的铁蛋白内部空腔中合成Fe3O4;将获得的磁性铁蛋白与酶混合,通过Ecoil螺旋肽和Kcoil螺旋肽的相互作用,可形成磁性铁蛋白固定化酶。本发明采用基因融合,与以传统共价键的方式实现酶的固定化相比,避免了酶活性中心的破坏,明显提高了表面展示酶的效果和酶活,也大大降低了成本。

    一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法

    公开(公告)号:CN114533698A

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202210137407.3

    申请日:2022-02-15

    Abstract: 本发明公开了一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法,包括如下步骤:1)利用化学偶联法制备修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白;2)在特定离子强度条件下,利用温度法在步骤1)所得的铁蛋白内负载药物,制得铁蛋白载药纳米粒。本发明制得的修饰了肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒,具有较强的肿瘤穿透能力以及肿瘤细胞生长抑制作用,且D型RGERPPR肽修饰的铁蛋白‑紫杉醇载药纳米粒的效果最好,为后续药物靶向穿透至肿瘤细胞的治疗提供了良好的载药模型,具有很好的应用前景。

    蔗糖密度梯度离心分离铁蛋白纳米颗粒的方法

    公开(公告)号:CN111948589A

    公开(公告)日:2020-11-17

    申请号:CN201910416453.5

    申请日:2019-05-17

    Abstract: 本发明涉及一种蔗糖密度梯度离心分离铁蛋白纳米颗粒的方法。该方法的具体步骤为:首先将蔗糖溶于缓冲液中,配制质量百分比浓度分别为20%,35%,50%,65%的蔗糖溶液,采用层铺法,依次缓慢滴加一定量的蔗糖溶液;然后将装载四氧化三铁后的铁蛋白样品缓慢加到蔗糖梯度溶液中;在4℃,50,000rpm,5h的条件下,进行水平离心;最后将混合液缓慢等分吸出,利用紫外分光光度计分别在280nm和410nm波长下分别测定所在蔗糖溶液层的蛋白质含量和铁含量。最终分离得到在铁蛋白空腔内装载了四氧化三铁的铁蛋白,实现了铁蛋白空腔内是否装载四氧化三铁的分离,为分离铁蛋白提供除磁场分离以外的另一种简便可行的方法。

    一种共负载紫杉醇和锰酞菁的适配体铁蛋白纳米粒的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN114984217B

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202210701245.1

    申请日:2022-06-21

    Abstract: 本发明公开了一种共负载紫杉醇和锰酞菁的适配体铁蛋白纳米粒的制备方法及应用,共负载紫杉醇和锰酞菁的适配体铁蛋白纳米粒的制备方法为:通过化学偶联的方法将AS1411修饰在铁蛋白外表面;并通过温度法将紫杉醇与锰酞菁两种药物共负载在适配体铁蛋白内。本发明修饰了适配体AS1411的铁蛋白纳米载药系统,不仅增强了纳米粒子的靶向性,而且共负载的两种药物结合了化学治疗与光动力治疗,提高了肿瘤细胞的抑制效果,为后续药物靶向肿瘤细胞治疗提供了非常好的载体模型,具有很好的应用前景。

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