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公开(公告)号：CN102864116A
公开(公告)日：2013-01-09
申请号：CN201210392834.2
申请日：2012-10-16
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了一株产丁二酸基因工程菌菌株，其分类命名为大肠埃希氏菌BA016（EscherichiacoliBA016），其保藏号登记号为CCTCC NO：M 2012350。本发明还提供了该菌株的构建方法与发酵生产丁二酸的方法，通过过量共表达外源丙酮酸羧化酶和烟酸磷酸核糖转移酶，使重组大肠杆菌能够利用葡萄糖代谢生长，减少副产物丙酮酸的生成，从而大幅度提高丁二酸的得率及生产强度。
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公开(公告)号：CN102864113A
公开(公告)日：2013-01-09
申请号：CN201210392035.5
申请日：2012-10-16
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种产丁二酸的菌株及其生产丁二酸的方法和应用。其中，所述菌株的分类命名为大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）BER208，其保藏编号为：CCTCCNO：M2012351。所述菌株在发酵培养基中，以葡萄糖为单一性碳源在厌氧条件下快速生长，并能高产丁二酸，该菌株发酵48小时，OD600达到了6.87，丁二酸产量达到10.5g/L，相对于出发菌株，丁二酸产量提高了2倍多。
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公开(公告)号：CN102643774A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210143173.X
申请日：2012-05-10
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌（Escherichia coli）BA306，其保藏编号为CCTCC NO：M2012103。其构建过程主要包括失活或敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因和磷酸转运系统中的ptsG基因，并过量共表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶和烟酸磷酸核糖转移酶，使重组大肠杆菌能够高效利用葡萄糖、木糖、阿拉伯糖及果糖等单糖，同时高效利用各种比例混合糖以及纤维素水解液生长，大幅度提高了丁二酸的合成效率。其发酵方法采用两阶段发酵方式，有氧阶段提高生物量，厌氧阶段发酵产酸。
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公开(公告)号：CN102154339A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201110038939.3
申请日：2011-02-16
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种产丁二酸大肠杆菌基因工程菌株的构建方法，具体涉及一种基于NAD(H)系统改造后的大肠杆菌菌株的构建方法，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段改造大肠杆菌的NAD(H)生物合成途径，过量表达与该途径有关的酶的活性，有效的提高了大肠杆菌胞内NAD(H)的总量，并综合利用氧化还原电位等发酵调控手段进一步提高了胞内NAD(H)的总量并维持合适的NADH/NAD+比例，确定基于辅酶调控丁二酸的生物合成策略，大幅度提高了丁二酸的合成效率。
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公开(公告)号：CN103937733B
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201410099403.6
申请日：2014-03-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法，具体是一株能够高效利用蔗糖和糖蜜生长并产丁二酸重组菌株。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌BA501，其保藏号登记号为CCTCC NO:M 2014014。其构建过程主要包括以以缺乏乳酸脱氢酶基因、丙酮酸甲酸裂解酶基因活性和染色体ptsG基因发生自发突变的大肠杆菌AFP111为出发菌株，表达外源蔗糖通透酶、蔗糖水解酶及果糖激酶基因后，经连续驯化培养，得到一株高效利用蔗糖和糖蜜生长并产丁二酸的菌株，大幅度提高了丁二酸的合成效率。其发酵方法采用两阶段发酵方式，有氧阶段提高生物量，厌氧阶段发酵产酸。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103952447B
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201410212929.0
申请日：2014-05-20
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及了一种利用玉米粉全水解液作为发酵培养基厌氧发酵生产丁二酸的方法。本发明采用玉米粉双酶解法生产的葡萄糖水解液为唯一碳源，玉米粉生产葡萄糖所产生的滤渣——玉米渣经中性蛋白酶酶解所得到的玉米糖渣水解液作为唯一氮源，将这两种水解液组合形成玉米粉全水解液作为发酵培养基，在不添加其他营养物质条件下，利用其厌氧发酵生产丁二酸。本发明发酵生产丁二酸的方法，可以代替价格昂贵的酵母粉和蛋白胨，同等条件下，与LB培养基发酵生产丁二酸相比，丁二酸的产量提高了1.37%，转化率提高了21.65%。本方法更经济，更清洁，该方法对于丁二酸产业化有着重大的意义及经济价值。
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公开(公告)号：CN103320366B
公开(公告)日：2014-12-31
申请号：CN201310288538.2
申请日：2013-07-10
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一株能够在纯厌氧条件下利用廉价合成培养基消耗木糖及含高组分木糖的木质纤维素水解液合成丁二酸的大肠杆菌及其筛选方法和用途，其分类命名为埃希氏菌属大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）BA308，其保藏号登记号为：CCTCC NO：M2013159。本发明采用常压低温等离子体诱变大肠杆菌，利用合成培养基平板筛选出能够在厌氧条件下快速生长的菌株，该菌株可以在厌氧条件下，利用无机氮源消耗木糖及含高组分木糖的木质纤维素水解液生长并积累丁二酸。由于原始出发菌株在纯厌氧，合成培养基条件下，生长非常慢，产酸量也很低，因此该突变株BA308具有重大的社会意义和经济价值。
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公开(公告)号：CN103952447A
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201410212929.0
申请日：2014-05-20
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及了一种利用玉米粉全水解液作为发酵培养基厌氧发酵生产丁二酸的方法。本发明采用玉米粉双酶解法生产的葡萄糖水解液为唯一碳源，玉米粉生产葡萄糖所产生的滤渣——玉米渣经中性蛋白酶酶解所得到的玉米糖渣水解液作为唯一氮源，将这两种水解液组合形成玉米粉全水解液作为发酵培养基，在不添加其他营养物质条件下，利用其厌氧发酵生产丁二酸。本发明发酵生产丁二酸的方法，可以代替价格昂贵的酵母粉和蛋白胨，同等条件下，与LB培养基发酵生产丁二酸相比，丁二酸的产量提高了1.37%，转化率提高了21.65%。本方法更经济，更清洁，该方法对于丁二酸产业化有着重大的意义及经济价值。
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公开(公告)号：CN103937733A
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201410099403.6
申请日：2014-03-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及一株产丁二酸基因工程菌及其发酵生产丁二酸的方法，具体是一株能够高效利用蔗糖和糖蜜生长并产丁二酸重组菌株。本发明的产丁二酸基因工程菌菌株分类命名为大肠埃希氏菌BA501，其保藏号登记号为CCTCCNO:M2014014。其构建过程主要包括以以缺乏乳酸脱氢酶基因、丙酮酸甲酸裂解酶基因活性和染色体ptsG基因发生自发突变的大肠杆菌AFP111为出发菌株，表达外源蔗糖通透酶、蔗糖水解酶及果糖激酶基因后，经连续驯化培养，得到一株高效利用蔗糖和糖蜜生长并产丁二酸的菌株，大幅度提高了丁二酸的合成效率。其发酵方法采用两阶段发酵方式，有氧阶段提高生物量，厌氧阶段发酵产酸。
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公开(公告)号：CN102936575B
公开(公告)日：2014-05-07
申请号：CN201210515218.1
申请日：2012-12-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）LL016，其保藏号为CCTCCNO：M2012429。本发明还公开了上述大肠埃希氏菌LL016在利用合成培养基纯厌氧发酵生产丁二酸中的应用以及方法。该菌株可以在厌氧条件下，利用无机氮源和葡萄糖生长，并大量积累丁二酸，菌株LL016生长速率较快，且产酸量较高，具有重大的社会意义和经济价值。
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